创伤患者血浆降钙素原检测的临床意义

严重创伤患者常常并发全身炎症反应综合征(SIRS)、感染性并发症及多器官功能障碍综合征(MODS)，这将严重影响患者的预后。新近发现的炎症因子血浆降钙素原(procalcitonin，PCT)与脓毒症(sepsis)具有密切的相关性。笔者通过观察创伤患者血浆降钙素原水平变化，探讨降钙素原与损伤严重程度评分(ISS)、SIRS、脓毒症及MODS之间的关系。     

大鼠原发性脑于损伤延脑淀粉样β蛋白及其蛋白前体的表达

目的 探讨早期诊断原发性脑干损伤(PBSI)中弥散性轴索损伤(DAI)的敏感标记.方法 应用免疫组织化学SP法及RT-PCR技术研究在大鼠原发性脑干损伤模型中,延脑DAI与淀粉样β蛋白(Aβ蛋白)的表达及淀粉样β前体蛋白(β-APP)mRNA的半定量分析,以此来评估进行DAI早期诊断的有效性.结果 免疫组化Aβ染色神经轴突测量3～24 h损伤组,轴突明显增粗,并且稳步增加,与对照组相比差异均有统计学意义,并且与时间呈正相关,β-APPmRNA表达增加最早从1 h损伤组开始,并于3 h达到高峰.结论 β-APP是DAI的敏感性和特异性标记,RT-PCR技术是一种快速的和敏感的方法,再结合免疫组化技术检测Aβ蛋白,可能对早期诊断DAI是非常有效的.     

肾透明细胞癌中转化生长因子-β1?基质金属蛋白酶 2表达及其临床意义的相关性研究

目的:研究转化生长因子-β1(TGF-β1)、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinases 2,MMP2)在肾透明细胞癌(renal clear cell carcinoma.RCCC)中的表达及临床意义.方法:采用免疫组织化学SP法测定80例RCCC及30例癌周组织中TGF-β1与MMP2的表达.同时采用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)测定43例RCCC及43例癌周组织巾TGF-β1与MMP2基因的表达.结果:RCCC巾TGF-β1、MMP2表达强度均明显高于癌周组织,TGF-β1、MMP2表达与RCCC病理分级、临床分期相关;RCCC中TGF-β1与MMP2表达强度具有相关性;单因素生存分析显示TGF-β1、MMP2高表达与患者预后不良有关(P均<0.05).结论:TGF-β1、MMP2基因的表达参与了RCCC的发展,并且二者之间具有一定的相关性,提示可以作为判断RCCC预后的二个有效的联合分子指标.     

环孢素A联合苯基棕榈酰胺吗啡丙醇对K562/AO2细胞GCS基因表达的影响及对逆转多药耐药

目的 研究环孢素A(CsA)和苯基棕榈酰胺吗啡丙醇(PPMP)联合应用对人白血病多药耐药细胞株K562/AO2的葡萄糖神经酰胺合酶(GCS)基因表达的影响及对白血病多药耐药的逆转作用,探索逆转白血病细胞耐药的策略.方法 应用Alamar BlueTM多功能细胞染色法测定阿霉素(ADR)对K562和K562/AO2细胞的半数抑制浓度(IC50)及判断CSA的非细胞毒性剂量;采用RT-PCR法检测GCS基因和mdr1基因的mRNA表达.结果 CsA浓度低于4.5μg/ml对K562/AO2细胞无细胞毒性.ADR对K562和K562/AO2细胞的IC50分别为(0.84±0.04)μg/ml和(89.24±1.27)μg/ml;当1μg/ml CsA和25μmol/L PPMP单用或联合作用于K562/AO2细胞时,ADR的IC50分别为(7.81±0.74)、(17.49±0.53)、(2.82±0.07)μg/ml;而低浓度CsA(0.01μg/ml)和PPMP(10 μmol/1)联合作用时IC50为(16.08±1.25)μg/ml.CsA联合PPMP可明显降低GCS基因的mRNA表达,低浓度CsA和PPMP联用也有此作用.结论 CsA联合PPMP可通过抑制K562/AO2细胞的GCS基因mRNA表达有效逆转其耐药,低浓度CsA联合PPMP在逆转其耐药的同时降低了细胞毒性.     

PTD-p53 融合蛋白的表达、纯化及其对肝癌细胞的转导活性

目的：原核表达野生型p53与PTD的融合蛋白,检测PTD介导p53进入肝癌细胞的效率。方法：利用RT-PCR方法从A549细胞系中分离野生型p53基因,将该基因分别克隆入pTATHA和pET32a原核表达载体,在大肠杆菌BL21（DE3）LysS内诱导表达并进行纯化。以纯化的p53蛋白经腹腔免疫BALB/c小鼠,制备高效价的抗血清。将PTD-p53融合蛋白加入HepG2细胞培养上清,利用间接免疫荧光法检测PTD-p53融合蛋白导入HepG2细胞的效率。结果：成功地构建了含有野生型p53基因的原核表达载体,表达纯化了p53融合蛋白及p53蛋白,证实PTD-p53可以高效地转入HepG2细胞。结论：PTD-p53融合蛋白的表达纯化及活性分析,为应用PTD-p53蛋白治疗肝癌的实验研究奠定了理论基础。     

GCS基因的表达与急性白血病耐药的相关性探讨

目的:探讨葡萄糖神经酰胺合成酶(glucosylceramide synthase,GCS)基因的表达与急性白血病患者耐药的相关性.方法:以β-actin基因为内参照物,采用RT-PCR方法分析了36例耐药/非耐药急性白血病患者血标本中GCS基因及经典的多药耐药基因(mdr1)的表达情况;并同时对标本中的BCL-2基因和BAX基因的表达水平亦进行了检测,以初步探讨GCS基因导致肿瘤细胞耐药的机制.结果:急性白血病耐药组标本的GCS基因及mdr1基因的扩增条带吸光度(A)相对比值均明显高于非耐药组(P＜0.001).耐药组BCL-2基因扩增条带A相对比值同样明显高于非耐药组(P＜0.001),而BAX基因的表达则明显低于非耐药组(P＜0.01),BCL/BAX比值在耐药及非耐药组之间差异有显著性(P＜0.01).结论:GCS基因在急性白血病细胞耐药的形成过程中可能起重要作用,且GCS促进肿瘤细胞耐药的机制可能与其通过催化神经酰胺糖基化从而影响凋亡相关基因的表达有关.     

基因表达谱芯片在白血病耐药相关基因研究中的应用

目的探讨基因表达谱芯片技术在白血病耐药相关基因研究中的应用.方法首先采用荧光定量基因扩增技术检测了72例白血病患者的MDR1基因的表达,并利用含有4096条人类全长基因的cDNA表达谱芯片对其中3例MDR1基因高表达并表现为临床高度耐药的耐药实验组病例及3例MDR1基因低表达且未表现临床耐药的非耐药对照组病例的白血病耐药相关基因进行了研究. 结果基因表达谱分析两次重复实验结果显示总共有150条靶基因(约3.66%)在与以耐药组及非耐药组细胞RNA为模板合成的双探针杂交时表现出较大的差异.结论运用基因芯片对白血病耐药基因表达谱进行分析,能够筛选出白血病耐药相关基因.     

小儿泌尿生殖道炎症患者支原体感染情况的研究

目的 为了解儿童生殖道感染患者支原体感染的情况，进一步查清儿童生殖道感染的病原菌。方法 从儿科门诊和病房收集了103例泌尿生殖道感染患儿病灶部拭子标本进行淋病奈瑟菌(淋菌)、7种支原体、念珠菌、滴虫等病原体检测。结果 91例女童中82例(90．11％)检出淋菌，23例(25．27％)检出支原体，检出念珠菌和滴虫各1例(1．0％)；12例男童中7例(58．33％)检出淋菌，3例(25．oo％)检出支原体。7种支原体的检出率为：解脲脲原体(Uu)、17．48％，人型支原休(Mh)、6．80％，肺炎支原体(blpn)、2．91％，穿通支原体(Mpe)、3．88％，生殖支原体(Mg)、2．91％，发酵支原体(Mf)、0％，梨型支原体(Mpi)、0％。儿童淋病患者合并支原体感染率为23．60％。结论 儿童泌尿生殖道感染者淋菌和支原体为主要病原菌。     

遗传性对称性色素异常症两家系基因突变检测研究

目的:检测遗传性对称性色素异常症患者家系中腺苷脱氨酶(ADAR)基因的突变.方法:收集2个遗传性对称性色素异常症患者家系的临床资料,采用聚合酶链反应及直接测序法对家系内成员ADAR基因突变位点进行检测,同时对50名无血缘关系健康对照者的该位点进行直接测序.结果:在2个家系的患者中分别检测到2个不同的ADAR基因移码突变位点c.633insT和c.2742delC,而在家系内非患者及正常对照者中均未发现该2个突变.结论:该研究中2个遗传性对称性色素异常症家系中的患者存在ADAR基因的移码突变,且皆为首次报道.     

肝硬化患者血清sICAM-1水平变化与肝功能关系探讨

为了解肝硬化（ＬＣ）患者血清可溶性细胞间粘附分子－１（ｓＩＣＡＭ－１）水平的变化及其与患者肝功能损伤的关系。用酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）检测１７例正常人和３３例ＬＣ患者的血清ｓＩＣＡＭ－１。结果显示,ＬＣ患者血清ｓＩＣＡＭ－１水平显著高于对照组（ＨＣ）,且在肝功能分级中,呈现ＣｈｉｌｄＣ〉ＣｈｉｌｄＢ〉ＣｈｉｌｄＡ的规律。相关分析显示,ＬＣ患者血清ｓＩＣＡＭ－１与总胆红素（ＴＢ）及谷丙转氨酶（ＡＬＴ）均呈明显正相关。提示ＬＣ患者血清ｓＩＣＡＭ－１升高与肝细胞损伤有关,可反映ＬＣ的严重程度。