肾综合征出血热患者B淋巴母细胞系的建立方法及意义

目的 :探讨EB病毒 (EBV)转化B淋巴细胞的最佳方法 ,为进一步研究肾综合征出血热 (HFRS)患者的细胞免疫功能奠定基础。　方法 :采用环孢素A(CsA)法、微量全血法和冻存全血法三种方法建立B淋巴母细胞样细胞系 (B LCL) ,比较建立细胞系成功率和所用时间。　结果 :EBV成功转化后的B LCL ,其体积增大并永生化 ,进而增生的淋巴细胞积聚成团。CsA法、微量全血法和冻存全血法转化的成功率分别为 73.3%、2 6 .7%和 4 6 .7%。　结论 :CsA法成功率高 ,建立细胞系所用时间短 ,是建立B LCL的最佳选择。     

应用巢式-实时定量PCR方法检测慢性乙型肝炎患者PBMC中HBV cccDNA

乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA（HBV cccDNA）是HBV复制的原始模板,是HBV持续感染的关键因素。外周血单核细胞（PBMc）中HBV cccDNA的存在状态及动态变化成为研究HBV肝外分布及复制问题的热点。诸多研究证实,PBMC中存在HBVDNA,但是否存在HBV复制模板HBV cccDNA及复制过程,却有不同意见。     

汉坦病毒感染者B淋巴细胞免疫应答

汉坦病毒感染存在错综复杂的免疫应答.B淋巴细胞受病毒抗原刺激后,可产生针对不同抗原的特异性抗体,发挥体液免疫效应,因此,B淋巴细胞免疫应答对疾病的预防、诊断治疗和发病机制研究具有重要意义.本文对汉坦病毒感染后的抗体应答、抗原交叉反应及B细胞表位定位作了简要综述.     

谈教学实践活动中的反思

教学反思是提高教师教学能力和水平的重要环节。现就教学反思的意义、过程以及反思的成分和方法作以论述,期望对刚步入讲台的青年教师有所帮助。     

针对HBVS区的siRNA的抗病毒活性

目的: 体外观察siRNA对HepG2 2.2.15细胞中乙型肝炎病毒(HBV)S-mRNA及HBsAg,HBeAg产生的影响. 方法: 设计并合成针对HBV S区的三条siRNA,构建含上述siRNA的表达载体pSilencer ZY1,pSilencer ZY2和pSilencer ZY3,pSilencer HK2测序及酶切鉴定后用脂质体介导重组质粒转染HepG2 2.2.15细胞,用酶免分析法对HepG2 2.2.15细胞上清中HBsAg,HBeAg进行检测,用逆转录聚合酶链反应检测HBV S-mRNA.结果: 成功构建了针对HBV S区的siRNA的表达载体,三条siRNA均可程度不同地抑制HepG2 2.2.15细胞上清中HBsAg,HBeAg的分泌,72 h抑制率达高峰,对HBsAg的抑制率分别为81%,29%及78%,对HBeAg的抑制率分别为35%,3%及49%,并有抑制HBV S-mRNA的作用.结论: 针对HBV S区的siRNA能明显抑制HBV的复制.     

肾综合征出血热外周静脉血细胞因子的变化与病情的关系

目的观察肾综合征出血热(HFRS)患者各病期外周静脉血血管内皮生长因子(VEGF)、可溶性血管内皮生长因子受体2(sVEGFR2)、血管生成-素1(ANG-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和干扰素-γ(IFN-γ)水平的变化及其变化与病程中血管渗漏的关系,为研究HFRS的发病机制提供依据。方法用酶联免疫吸附法(ELISA)检测了68例不同病期HFRS患者外周静脉血上述5种细胞因子,并以20例健康志愿者作为正常对照。同时对20例HFRS患者病程5期连续动态收集的外周静脉血标本中的VEGF进行了测定。结果在所有观察患者中,血浆VEGF水平从发热期开始增高[(337.6±238.0)ng/L],休克期达到峰值[(556.0±185.2)ng/L],少尿期开始迅速下降[(259.0±152.8)ng/L],在多尿期[(223.1±110.6)ng/L]和恢复期[(246.5±202.0)ng/L]回落到正常水平。HFRS患者sVEGFR2、ANG-1水平在休克、少尿、多尿期均低于健康对照组;TNF-α和IFN-γ水平在发热期、低血压休克期、少尿期和多尿期均高于健康对照组,其中大多数与后者比较差异有统计学意义。此外...     

肾综合征出血热患者血浆MCP-1水平及其临床意义

目的　分析肾综合征出血热（hemorrhagic fever with renal syndrome, HFRS）患者不同病期及不同临床型血浆单核细胞趋化蛋白-1（monocyte chemotactic protein-1, MCP-1）浓度变化与疾病相关性,为HFRS临床诊治提供参考依据。方法　以2012年10月—2014年1月期间在空军军医大学唐都医院住院就诊的81例HFRS患者及15例健康志愿者（正常对照组）作为研究对象,用酶联免疫吸附法分别检测其血浆中MCP-1水平,同步检测血常规、肾功能等指标,并分析MCP-1与临床常规检测指标的相关性。结果　在急性期,所有患者血浆MCP-1水平均明显升高,其中重型/危重型患者血浆MCP-1水平升高比轻型/中型更为显著;中型、重型、危重型患者血浆MCP-1水平急性期均高于恢复期及正常对照组（P均＜0.05）,恢复期与正常对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。Spearman相关分析显示血浆MCP-1水平与白细胞、尿素氮、肌酐水平呈正相关,与血小板水平呈负相关。结论　HFRS患者血浆MCP-1水平与疾病严重程度及疾病进程密切相关。     

肾综合征出血热患者TNF-α IL-6 IL-4 IFN-γ水平变化及意义

目的：了解肾综合征出血热（HFRS）患者不同病期和病型TNF-α、IL-6、IL-4、IFN-γ的水平变化及意义,为HFRS的发病机制研究提供资料。方法：用酶联免疫检测仪定量检测35例HFRS患者和10例健康对照血清TNF-α、IL-6、IL-4、IFN-γ水平,数据处理采用SPSS10.0统计学软件分析。结果：在不同病期的HFRS患者中,TNF-α、IL-6在发热期已升高,低血压期和少尿期达到高峰;不同病期IL-4含量没有明显变化,而IFN-γ在发热期已显著升高,至低血压期和少尿期仍处于较高水平。不同病型的HFRS患者中,随病情加重,TNF-α、IL-6的含量亦相应增高,特别在重型和危重型患者TNF-α、IL-6持续较高水平。不同病型IL-4含量在各组之间没有明显变化,而各病型IFN-γ含量均显著高于健康对照。结论：动态检测HFRS患者血清细胞因子含量,对病情进展和疾病严重程度的判断有一定意义;HFRS患者的免疫平衡偏向Th1。     

肾综合征出血热并发肝损害453例临床分析

目的探讨肾综合征出血热（HFRS）合并肝损害的临床特点及其规律性。方法对453例各期HFRS患者的肝功能及相关指标进行回顾性分析。结果各期HFRS患者均伴有肝损害，转氨酶轻度增高居多，γ-谷氨酰转肽酶（GGT）早期轻到中度升高，总胆红素仅轻度升高，碱性磷酸酶变化不明显。轻型、中型肾综合征出血热并发肝损害较少，重型、危重型多并发肝损害。结论肾综合征出血热早期即可并发肝损害，发生率较高，以转氨酶及GGT轻至中度增高为特征。不同类型HFRS患者肝损害程度与临床表现成正相关。肾综合征出血热病程中动态观察肝功能的变化有助于判断病情和预后。     

肾综合征出血热患者血清铁蛋白水平变化研究

目的观察不同分型及不同分期肾综合征出血热(hemorrhagic fever with renal syndrome,HFRS)患者血清铁蛋白(ferritin,FRT)水平变化,探讨其在重症HFRS早期预警及预后(死亡)评估中的作用。方法以空军军医大学第二附属医院传染科2011年10月—2013年12月收治的符合纳排标准的102例HFRS患者为研究对象,根据HFRS临床分型标准分为轻型、中型、重型和危重型4组,以28例健康志愿者为对照组。应用ELISA检测纳入患者急性期、恢复期及健康对照者的血清FRT水平。比较FRT在不同分型患者病程中的表达变化以及与对照组的差异;分析急性期FRT与常规实验室指标的相关性,评估其在反映HFRS疾病严重程度中的作用;采用Logistic回归分析构建基于急性期FRT和常规实验室指标的HFRS预后(死亡)风险模型,并应用ROC曲线评估模型及FRT对预后(死亡)的预测效力。结果纳入患者中,轻型17例、中型19例、重型27例、危重型39例。各组之间基线资料(年龄、性别、急性期采血时间)对比,差异无统计学意义(P>0.05)。各型HFRS患者急性期血清FRT水平均高于同型恢复期和对照组(P均<0.05),且随着病情加重逐渐增高,在危重型患者中表达最高(P<0.05)。HFRS患者急性期血清FRT水平与WBC、PLT、AST、APTT等常规实验室指标具有相关性,其中与PLT相关性最强(rs=-0.792,P=0.000)。应用Logistic回归分析构建HFRS预后(死亡)风险模型,最终进入模型的指标为WBC、AST和APTT。ROC曲线分析结果显示,急性期FRT对HFRS预后(死亡)的预测价值与WBC、PLT、AST、APTT等常规实验室指标相当,联合多个指标所构建的模型的预测价值高于单个指标。结论FRT在重症HFRS早期预警及预后(死亡)评估中具有重要价值,值得在临床推广应用。