交联法固定化米曲霉菌体光学拆分DL-色氨酸的研究

采用戊二醛作交联剂,对米曲霉3042产氨基酰化酶液态发酵菌体进行固定化,固定化酶活保留率最高达到30.4%。固定化米曲霉菌体扫描电镜图可看出,通过固定化后菌体之间结合紧密程度提高,有利于米曲酰化酶附着在菌体上。对固定化米曲霉菌体分批拆分制备L-色氨酸进行了研究,固定化菌体酶活的半衰期约为27d。     

啤酒废酵母酶解液作为有机氮源厌氧发酵制备丁二酸的研究

确定了以啤酒废酵母为原料,酵母酶解液中α-氨基氮含量为考察指标的蜗牛酶酶解破壁条件;并以啤酒废酵母酶解液为有机氮源,厌氧发酵制备丁二酸。结果表明蜗牛酶破壁效果最好,其最佳反应条件为蜗牛酶用量10mg/g干物质,pH6.5,40℃水浴,反应16h,酵母酶解液中α-氨基氮含量为0.504g/100mL;当发酵培养基中葡萄糖浓度为50g/L,啤酒废酵母酶解液作为有机氮源时,菌株Actinobacillus succinogenes NJ113可以产34.6g/L丁二酸,收率69%,和以酵母膏为有机氮源厌氧发酵制备丁二酸(丁二酸浓度为35.1g/L,收率70.2%)比较,产量相近,成本较低。     

响应面法优化灰兜巴多肽脱色工艺

本文以灰兜巴蛋白的酶解液为原料,首次采用粉末活性炭对多肽液进行脱色处理,去除灰兜巴多肽液中的色素,以利于生物活性多肽的分离纯化。在单因素实验的基础上,用响应曲面法优化灰兜巴酶解液的脱色工艺。实验结果表明脱色剂为粉末活性炭时脱色效果最佳,其工艺参数为:p H3.3、活性炭用量1.6%、温度44℃、时间53min。在此条件下,灰兜巴蛋白酶解液的脱色率为73.12%,肽回收率为82.49%,与理论值相接近。该脱色工艺简单可靠,脱色效果好,且最大限度的保留了灰兜巴蛋白酶解液中的多肽含量,为开发灰兜巴多肽提供理论基础。     

高活性漆酶产生菌的发酵条件优化

对云芝菌产漆酶的发酵条件进行优化,考察C源、N源和诱导剂等因素对产酶的影响.结果表明:杂色云芝菌摇瓶产漆酶的最佳条件为葡萄糖1.25 g/L,羧甲基纤维素钠15 g/L,酵母膏15 g/L,KH2PO41 g/L,CaCl20.05 g/L,MgSO40.25 g/L,30℃、150 r/m条件下振荡培养,在72 h加入2 mmol/L 2,5-二甲基苯胺作为诱导剂,在96 h加入2 mmol/L Cu2+,经过7 d培养,菌的漆酶比活达到3 319.2 U/mL.     

脂肪酶催化液-固反应合成聚丁二酸丁二酯

以固定化酶Novozyme435为催化剂,在液-固混合体系中经酶催化1,4-丁二醇与丁二酸缩聚合成聚丁二酸丁二酯(PBS),考察反应条件对聚合效果的影响。采用GPC法对产物重均分子量Mw和分子量分布MwMn进行了测定;采用核磁共振法对产物结构进行了鉴定。最佳反应条件为:丁二酸与1,4-丁二醇的物质的量的比为17:23,Novozyme435用量为底物总质量的7%,聚合温度为65℃。以底物总质量200%的二苯醚为反应介质,真空条件下聚合48h,PBS的最大Mw可达到50800(MwMn=1.36)。实验表明,丁二酸在反应介质中的溶解程度和副产物水的去除是限制PBS聚合效果的最主要因素。     

响应面法优化β-聚苹果酸发酵培养基的研究

采用响应面法对出芽短梗霉菌发酵制备β-聚苹果酸的培养基进行优化。使用Plackett-Burman(P-B)实验设计对培养基中相关因素进行评价,筛选出有显著影响效应的因素。通过最陡爬坡实验、中心复合实验设计及响应面分析确定主要影响因素的最佳浓度及回归模型,并经实验验证模型的可行性。优化后三种显著影响因素:葡萄糖、丁二酸铵和碳酸钙,最佳浓度分别为:110.91、3.66、45.30g/L,β-聚苹果酸的发酵产量达到41.36g/L,较优化前的20.74g/L提高了199%。     

亚苄基海因水解制备苯丙酮酸的动力学

引　言苯丙酮酸是重要的医药中间体[1] ,其制备方法很多 ,主要有醋酐制备法[2 ] 、氯苄羰化合成法[3] 和亚苄基海因水解法[4 ] .其中亚苄基海因碱性水解制备苯丙酮酸是一条副产物少、水解收率高的生产路线 ,碱的种类和用量、水解温度和时间均影响着亚苄基海因的降解和苯丙酮酸的生成 ,因此 ,要获得高得率的苯丙酮酸 ,必须通过对各种影响水解动力学的因素进行研究分析 ,并建立亚苄基海因的水解动力学模型 .1　材料与方法1.1　实验试剂亚苄基海因 :工业级 ,自制 ;氢氧化钠、氢氧化钙、氢氧化钡、氢氧化钾等 :均为化学纯 ,南京化学试剂厂 .1.2…     

L-脯氨醇的合成

用NaBH4／I2还原体系将L-脯氨酸(L-proline)直接还原得到L-脯氨醇。通过对其还原和水解工艺的优化,获得规模制备的最优条件是：n(NaBH4)：n(I2)：n(L-proline)：2．5：1．75：1,室温下滴加碘,回流反应20h,然后在ω(NaOH)=20％的水溶液中90℃水解3h。产品L-脯氨醇的收率为88．4％,光学纯度大于99％。     

脱硫石膏对滨海盐渍土理化性能的影响研究

Na+等有害离子胁迫是滨海盐渍土理化性能无法得到提高的主要障碍因子之一,本文通过研究不同改良物料对消除和减轻这一障碍因子的作用性能和机理,为改良滨海盐渍土壤提供理论依据.     

瓜氨酸生产相关基因簇在谷氨酸棒杆菌中的组成型表达

构建1种组成型载体并将载体应用在表达瓜氨酸相关基因簇argCJBDF上。通过去除pXMJ19诱导型启动子上游阻遏蛋白lacI基因的方法,构建组成型质粒pXMJ19-lacI,并将谷氨酸棒杆菌中合成瓜氨酸途径的基因簇argCJBDF克隆到改造过的组成型载体中,实现瓜氨酸合成相关基因簇argCJBDF在谷氨酸棒杆菌的组成型表达。结果表明:重组菌在30℃摇瓶发酵72 h后,N-乙酰谷氨酸激酶的酶活达到(0.323±0.015)U/mg,瓜氨酸的产量达到4.33 g/L。成功构建的组成型表达载体,实现了外源基因簇argCJBDF在谷氨酸棒杆菌中的组成型表达。