HDV/HBV感染树鼠句肝组织中Fas/Fas配体表达的初步研究

目前已有许多实验研究证据直接表明Ｆａｓ／Ｆａｓ配体（ＦａｓＬ）介导了细胞凋亡。采用免疫组化和原位杂交技术检测ＨＤＶ／ＨＢＶ感染树鼠句肝组织中ＨＤＡｇ、Ｆａｓ／ＦａｓＬ表达;并采用免疫组化双重染色分析病毒抗原表达和Ｆａｓ／ＦａｓＬ表达之间的关系。１　材料与方法１．１　标本来源　３０份ＨＤＶ／ＨＢＶ感染树鼠句肝组织,取自本院传染科ＨＤＶ／ＨＢＶ感染的树鼠句动物,经ＥＬＩＳＡ、免疫组化和原位杂交技术证实,ＨＤＶ在肝细胞中稳定复制、表达,伴ＡＬＴ升高。１．２　检测方法　①ＨＤＡｇ、Ｆａｓ／ＦａｓＬ检测：…     

蛋白质组学在肿瘤研究中的应用进展

蛋白质组 (proteome)是细胞、组织或机体在特定时间和空间上表达的所有蛋白质。蛋白质组学 (protemics)是研究蛋白质组的一个新领域 ,它以蛋白质组为研究对象 ,分析细胞内动态变化的蛋白质组成成份、表达水平与修饰状态 ,了解蛋白质之间的相互作用与联系 ,在整体水平上研究蛋白质的组成与调控的活动规律。恶性肿瘤发生过程包括许多基因突变从而导致蛋白质的表达、结构和功能改变 ,最终导致细胞周期失控 ,细胞凋亡能力下降 ,细胞浸润转移能力加强。蛋白质组学可以分析、鉴定肿瘤细胞的蛋白质分子变化 ,为肿瘤的预防、诊断、治疗及预后提供极…     

中国藏族人群HLA-DRB1、-DQA1、-DQB1等位基因多态性与肺结核易感性的关联性研究

目的探讨HLA-DRB1、-DQA1和-DQB1等位基因多态性与中国藏族人群肺结核易感性之间的关系。方法采用聚合酶链反应/序列特异性引物(PCR/SSP)技术对176例中国西藏地区藏族肺结核患者和189例该地区藏族健康人群的HLA-DRB1、-DQA1和-DQB1等位基因多态性进行分析。结果 HLA-DRB1*0901、-DQA1*0101和-DQB1*0301在肺结核组的等位基因频率明显高于健康对照组,2组相比差异具有统计学意义(17.33%vs 7.94%,χ2=17.185,P=0.000,OR=2.811;25.85%vs 13.76%,χ2=22.382,P=0.000,OR=2.821;35.51%vs 19.58%,χ2=37.329,P=0.000,OR=3.809)。HLA-DRB1*1301/1302、-DQA1*0501在肺结核组的等位基因频率明显低于健康对照组,2组相比差异具有统计学意义(0.85%vs 6.08%,χ2=15.085,P=0.000,OR=0.125;14.49%vs 26.72%,χ2=22.44,P=0.000,OR=0.355)。结论 HLA-DRB1*0901、-DQA1*0101和-DQB1*0301与肺结核的易感性密切相关,可能是肺结核的易感基因。HLA-DQA1*0301与肺结核的保护性密切相关,可能为肺结核的保护基因。     

肝细胞移植的研究进展

由于肝脏供源的有限和肝移植 (ｌｉｖｅｒｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ ,ＬＴ)本身的复杂性 ,使一种简便有效且对机体影响较小的技术———肝细胞移植 (ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ ,ＨＣＴ)在近年得到很大发展。ＨＣＴ较ＬＴ具有以下优点 :①一个供体可以给多个受体提供细胞 ;②移植技术简单 ;③即使移植失败 ,对受体的影响也十分微小。因此 ,ＨＣＴ有更广泛的发展前景。一、肝细胞植入的部位1.腹腔内移植 :腹腔内移植具有易操作、腹腔内空间大、营养物质和代谢产物的交换表面积大等优点。尽管如此 ,此种方法也…     

倒千里光碱增强L02细胞在人鼠嵌合肝中的增殖能力

建立稳定持久的人鼠嵌合肝动物模型,必须提高移植细胞的增殖能力。倒千里光碱与部分肝切除术(RtS/PH)联合应用,是移植肝细胞增殖常用模式。我们对诱导免疫耐受的大鼠腹腔注射倒千里光碱,2周后行2/3肝切除术,同时经脾移植1,1’2双十八烷23,2,3’,3’2四甲基吲哚羧花2高氯酸盐(Dil,美国Sigma公司)染色后的L02细胞,建立Rts/PH肝细胞增殖模型。采用免疫荧光、Dil荧光示踪     

L02细胞人鼠嵌合肝模型的建立

目的 研究正常人L02肝细胞移植到具有正常免疫活性的大鼠肝内的存活情况，建立稳定的人鼠嵌合肝动物模型。方法 SD大鼠出生前宫内腹腔注射L02肝细胞，诱导胎鼠对人L02肝细胞产生免疫耐受，出生2周后经脾移植DiI染色后的人L02肝细胞，建立人鼠嵌合肝动物模型。采用免疫荧光、免疫组织化学、DiI荧光示踪等方法，在不同时相分别检测人白蛋白和特异性人增殖细胞核抗原，在荧光显微镜下观察人L02肝细胞在鼠肝内的分布。结果 于移植后1、2、4、6、8、10周在荧光显微镜下观察到人L02肝细胞在鼠肝内的动态分布，移植后2、4、6、8周大鼠均检测出人白蛋白，移植后2、4、6周检测出特异性人增殖细胞核抗原。结论 移植的人L02肝细胞在具有正常免疫活性的免疫耐受鼠体内能够存活、增殖，并产生人白蛋白。     

乙型肝炎患者组织相容性白细胞抗原-Ⅱ类基因多态性与肿瘤坏死因子活性的对比

目的　探讨乙型肝炎患者组织相容性细胞抗原(HLA) -Ⅱ类基因多态性与肿瘤坏死因子(TNF)活性之间的关系。方法　利用EB病毒(EBV)体外感染乙型肝炎患者外周血单个核细胞(PBMC),将其转化为淋巴母细胞系(LCL);应用结晶紫染色法检测LCL分泌TNF的细胞毒活性。结果　HLA DRB1*0301、HLA -DQA1*0501、HLA DQB1*030阳性组LCL分泌TNF的活性明显低于阴性组(t1 = 2.944,t2 = 3.397,t3 = 3.316,P< 0.01), HLA DRB1 * 1101/1102、HLA DQA1 *0301阳性组LCL分泌TNF的活性明显高于阴性组(t1=4.234,t2=4.873,P<0.01)。结论　HLA Ⅱ类基因可通过影响TNF来发挥免疫调节作用,与HBV感染慢性化或HBV清除有关。     

基于WebQuest的传染病学教学模式探讨

作为一种探究式教学模式,WebQuest在我国尚处于起步阶段,它主要利用因特网丰富资源实施教学。运用WebQuest进行传染病学教学,可使学生自主地建构所需的知识体系,有效地培养临床思维能力和创造性解决问题的能力,培养他们的团队协作精神,在一定程度上弥补了传统教学模式的不足,是一种较好的培养创新型医学人才的教学模式。     

L02细胞在2-乙酰氨基芴处理大鼠肝中的增殖

目的:应用2-乙酰氨基芴(2-acetaminofluorene, 2-AAF),研究L02细胞移植到具有正常免疫性的大鼠肝内的存活与增殖情况．方法:SD大鼠出生前宫内ip正常人L02肝细胞,诱导胎鼠对L02肝细胞产生免疫耐受,出生2 wk时分别ip小(1．2 mg／kg)、中(13 mg／kg)、大剂量(30 mg／kg)2-乙酰氨基芴或生理盐水,隔日行2／3肝切除术,同时经脾移植DiI染色后的人L02肝细胞,建立2-AAF／PH肝细胞增殖模型．采用免疫荧光、RT-PCR、免疫组化、DiI荧光示踪等方法,在不同时相分别检测人白蛋白、人白蛋白mRNA、增殖细胞核抗原(PCNA)以及在荧光显微镜下观察人L02肝细胞在鼠肝内的分布,并采用计算机图像分析系统分析不同时相PCNA阳性细胞的数密度和面积密度．结果:2-乙酰氨基芴实验组(小、中、大剂量)的各项检测,均与对照组无明显区别;于移植后1,2,4,6,8,10 wk在荧光显微镜下观察到人L02肝细胞在鼠肝内的动态分布;移植后2, 4,6,8 wk大鼠均检测出人白蛋白及人白蛋白mRNA;移植后2,4,6 wk检测出特异性人增殖细胞核抗原PCNA,移植后1,2,4,6,8 wk检测出非特异性PCNA．结论:2-AAF／PH模型中,2-乙酰氨基芴对移植L02细胞无明显增殖作用;L02细胞在2-乙酰氨基芴处理人鼠嵌合肝动物模型中存活10 wk,产生白蛋白功能持续8 wk．