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CRISPR/Cas9是一种新型的基因组定向编辑技术,近年来在烟草基因组的定向编辑中得到了广泛应用。CRISPR/Cas9介导的多基因编辑技术在许多物种中表现出很大的潜力,为了探索CRISPR/Cas9介导烟草多基因编辑的技术体系,本文针对烟草PCS1、HMA2、eIF4E、TOM3、TOM1 5个不同性状相关的基因构建了多靶点敲除的CRISPR/Cas9系统,并借助农杆菌介导的遗传转化技术转化烟草品种K326。对阳性植株的筛选、靶位点基因组的PCR扩增与测序分析表明,构建的CRISPR/Cas9多基因编辑系统成功转化到烟草中,能够同时靶向突变5个基因。5个基因同时突变的检出率为53.8%,单基因的突变检出率在76.9%与92.3%之间。进一步的脱靶检测分析显示,在所预测脱靶的候选位点上均未发生脱靶现象。本文构建的CRISPR/Cas9多基因编辑系统可将多个基因进行有效突变,为烟草基因功能研究和基于CRISPR/Cas9技术的多性状改良奠定了基础。 相似文献
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为研究外源dsRNA介导的RNA干扰(RNA interference, RNAi)对烟草黄瓜花叶病毒(cucumber mosaic virus, CMV)侵染的抑制作用,选择与病毒在寄主体内胞间移动和长距离运输密切相关的移动蛋白(Movement protein, MP)基因为靶标,通过克隆CMV MP基因,结合序列分析评估设计dsRNA,以体外合成的方式制备了MP基因中一段490 bp的dsRNA。通过与CMV共接种,结合MP基因表达水平和病毒发病症状,综合评价MP dsRNA对CMV的抑制效果。结果表明,外源喷施的MP dsRNA显著降低了染病烟株中CMV基因的表达水平,有效抑制了病毒的侵染和危害,具有烟草CMV生物防治的应用潜力。 相似文献
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NAND Flash存储器以其容量大、成本低和速度快的优势,在嵌入式系统中得到广泛的应用。但是,由于NAND Flash固有的器件特性,必须要有驱动才能对其进行读写,存储于其上的代码不能直接执行,因此其并不适合作为系统启动代码的存储介质。一般采用NOR Flash存储启动代码并直接执行,然后再引导存储于NAND Flash中的操作系统镜像,这增大了系统成本和功耗。设计并实现了一种基于NAND Flash的CPU安全启动方法。该方法首先通过软硬件结合的方式,在片内NAND Flash控制器中增加块映射表结构,并由NAND Flash中第1块空间存储的代码进行好块寻找和块映射表填写,使NAND Flash的一部分存储空间可以直接映射为硬件可访问的内存空间,从而使得NAND Flash可以作为系统启动的存储介质,实现仅需NAND Flash存储的系统。还提出了一种扩展BootROM的方案,结合NAND Flash地址映射结构,将片内BootROM的一部分扩展到NAND Flash的第1块存储空间中,并通过Hash比对验证BootROM,从而有效降低了片内BootROM的设计复杂度,减少了代码量。通过提出的方法,可以有效地实现单NAND Flash系统的安全启动,降低了系统成本,提高了系统的安全特性。 相似文献
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AT89C52在定量包装电子称量系统的应用 总被引:5,自引:0,他引:5
本文研究单片机在定量包装电子称量系统中应用的具体实现,该系统以89C52单片机为核心,配以称量传感器、AD转换器、显示、键盘、EEPROM等相关电路,实现对包装机电子称量系统的控制。文中介绍了系统的结构、功能和测量原理,给出系统的硬件组成和软件流程。 相似文献
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利用旁压试验分析设计横向受荷桩 总被引:1,自引:0,他引:1
本文从理论上导出如何通过旁压曲线确定桩的P-y曲线。对地基土的反力函数提出双曲线模型P(z,y)=y/[a(z)y+b(z)]的假设,并考虑其系数a(z),b(z)随深度z成线性变化。以这一模型拟合桩的P-y曲线族,求出系数a(z),b(z),得到地基土反力P(z,y)的数学表达式。对横向受荷桩的求解问题则采用弹性地基梁的微分方程,用有限差分法,并考虑边界条件进行求解,编制了单桩受横向静荷载作用下的分析求解程序,供饱和粘性土中的单桩计算应用,并通过一个实例进行计算对比,表明理论结果与实测结果相当吻合。 相似文献
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