成都地区体检人群胆石症患病率及其危险因素分析

[目的]探讨成都市健康体检人群中胆石症的患病率以及其危险因素,为胆石症的防治提供依据.[方法]以参与健康体检的4739例人群为研究对象,胆石症采用B超诊断或既往手术证实,收集相关体检资料进行统计学分析.[结果]胆石症总检出率为8.3%,其中男性患病率为7.0%,女性患病率为9.80k,,女性患病率高于男性,无论是男性还是女性,胆石症的患病率随年龄的增加而升高,分别在50～59岁年龄段以及60～69岁年龄段达到峰值;胆石症组年龄、体重指数、收缩压、舒张压,甘油三酯,总胆固醇,低密度脂蛋白、谷丙转氨酶和脂肪肝患病率均高于非胆石症组,而高密度脂蛋白则低于非胆石症组,空腹血糖增高在两组之间无统计学意义;多元回归分析显示性别,年龄,脂肪肝,高密度脂蛋白,谷丙转氨酶异常,空腹血糖增高6项指标与胆石症密切相关.[结论]成都市健康体检人群中胆石症的患病率较高,与多元代谢紊乱相关.     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体对乙型肝炎病毒启动子的调控作用

目的肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）能够诱导乙型肝炎病毒（HBV）感染细胞发生凋亡,但抑制病毒复制的具体机制不清楚,研究通过非凋亡浓度TRAIL对4种HBV启动子调控作用的研究,探讨HBV复制的可能调控机制。方法采用噻唑蓝法和末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记荧光法,检测不同浓度TRAIL作用后人肝癌细胞株HepG2的存活率。使用HBV的4种启动子重组质粒,4种启动子分别控制乙肝表面抗原、X抗原、核心抗原、PS1抗原基因的转录与表达。将受HBV上述4种启动子调控的荧光素酶报道基因表达质粒（SpLUC、XpLUC、CpLUC、PS1pLUC）转染HepG2细胞,6 h后按300、30、3 ng/mL浓度梯度加入可溶性TRAIL,采用双荧光报道基因分析系统检测细胞化学发光值,计算相对荧光素酶活性。结果 300 ng/mL是可溶性TRAIL诱导HepG2细胞凋亡的浓度阈值。采用远低于凋亡阈值浓度（30 ng/mL）的TRAIL可明显上调对HBV的Sp启动子活性（P〈0.001）,另3种质粒的相对荧光素酶活性在加入TRAIL后改变不大。结论 TRAIL仅对HBV的Sp启动子活性具有上调作用,其生物学意义值得进一步研究。     

携带丙型肝炎病毒非结构蛋白3基因的重组腺病毒构建研究

目的构建表达丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白3 (NS3)的复制缺陷型重组腺病毒,为防治HCV感染的基因免疫和基因治疗提供实验基础. 方法将HCV NS3基因定向克隆到穿梭质粒pAdTrack-CMV上,经与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1在大肠埃希菌BJ5183内同源重组后,转染293细胞进行包装,并反复感染293细胞进行扩增. 结果通过PCR扩增、酶切、核酸测序及Western杂交法检测鉴定,均证实插入穿梭质粒中的片段为HCV NS3基因(基因型1b);所包装出的复制缺陷型重组腺病毒AdEasy-GFP-NS3具有良好的感染能力,并可在293细胞中表达HCV NS3蛋白. 结论 AdEasy-GFP-NS3携带有HCV NS3基因,能有效地感染293细胞并高效表达,从而为丙型肝炎基因疫苗的进一步研究奠定了基础.     

慢性阻塞性肺疾病与肺癌发生的关系研究

目的 探讨慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease,COPD）与肺癌的临床相关性。 方法 收集肺癌患者180例、非肺癌对照组200例的临床资料〔包括病史、临床检查及1 s用力呼气容积（FEV1）〕,比较分析肺癌发生的相关危险因素。 结果 有慢性支气管炎、肺气肿、COPD或肺结核病家族史的患者,肺癌发生的风险增高（P<0.05)。现患COPD者比无COPD者发生肺癌的风险高2.78倍 (OR=2.78);当FEV1<80%时,肺癌发生的风险增高（P<0.05)。排除吸烟这一混杂因素后,现患COPD、低FEV1仍与肺癌发生有关。 结论 现患COPD及有COPD家族史均与肺癌发生有关。     

抗菌药物合理应用管理策略

采取成立管理组织发挥其职能作用;各种形式的全员培训;建立健全抗菌药物合理使用的管理制度,进行目标管理和宏观调控,多部门联合监督管理,实施用药的动态监测和超常预警;并适时反馈,以达持续改进抗菌药物合理应用的目的。调查结果和实践证明上述措施行之有效。     

preS2S/adw真核表达质粒构建及其表达的初步研究

目的：针对我国乙型肝炎（乙肝）病毒流行的血清型，采用美国药品及食物鉴定委员会承认的应用于疫苗临床使用的载体pVAX1，构建了肝病毒adw血清型核酸疫苗preS2S的真核表达质粒，对其在真核细胞中的表达进行初步研究。方法：采用PCR法扩增preS2S片段，插入pVAX1载体中，测定DNA序列后，转染SP2／0细胞，抽提转染后SP2／0细胞的总RNA，再用RT－PCR法扩增其中的preS2S片段，以检测其表达的基础，结果：测序证实了该片段为乙肝病毒adw型preS2S基因。PCR扩增法检测出的转染细胞中存在preS2S基因，结论：获得了adw血清型乙肝病毒preS2S的真核表达质粒，提示其能够在真核细胞中表达目的基因蛋白。     

体内外检测乙型肝炎DNA疫苗诱生小鼠特异性CTL活性的比较研究

目的：了解体内外两种方法检测乙型肝炎DNA疫苗诱生BALB／c小鼠特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTL）活性的特点，比较其异同，建立与体外法互为补充，且更加直观、简便的活体CTL活性检测模型。方法：用HBV-S真核表达质粒pVAX1／S对SP2／0细胞进行转染，经鉴定后作为目的靶细胞（稳定转染并表达HBV主蛋白，命名为SP2／0-S细胞）；对照靶细胞为稳定转染pVAX1空载质粒的细胞（命名为SP2／0-P细胞）备用。活体诱生实验：用目的或对照靶细胞分别使小鼠荷瘤，观察免疫及非免疫小鼠在各靶细胞负荷下的生存时间与肿瘤的生长情况，设置不同组合做同期对照观察，小鼠生存率的差异可以提示体内特异性CTL是否存在。体外诱生实验：采用经典CTL活性检测方法，LDH释放法成品药盒。SP2／0-S细胞与SP2／0-P细胞作为靶细胞，免疫鼠与非免疫鼠的脾细胞为效应细胞，按照不同效／靶比共孵育后以酶标仪检测LDH的释放活性。结果：活体诱生实验：免疫小鼠存活时间明显长于对照小鼠（P〈0．05）。体外诱生实验：免疫鼠CTL活性在彬靶比为50／1时出现最大杀伤活性，为36．9％，明显优于对照组（P〈0．05）。结论：体内外两种方法均能够检测到乙型肝炎DNA疫苗诱生BALB／c小鼠特异性CTL活性，实验中发现体外LDH释放法CTL活性并不高，但是总体上仍然能够反映CTL活性。而活体诱生实验操作相对简便，表现更为直观，可望成为与经典方法相互补充的新型实验模型。