苦参素对慢性乙型肝炎患者血清TGF-β1、TNF -α及肝纤维化指标的影响

 目的探讨苦参素在慢性乙型肝炎中抗肝纤维化的作用机制.方法采用ELISA和RIA方法对治疗Ⅰ组(对照组)和治疗Ⅱ组(苦参素组)患者治疗前及治疗3月后的慢性肝炎轻度、中度、重度及肝硬化患者171例血清转化生长因子β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PcⅢ)、Ⅳ胶原(C-Ⅳ)、层连蛋白(LN)含量进行测定,并设立30例健康献血人员作为正常组.结果治疗前两组患者血清TGF-β1、TNF-α、HA、PcⅢ、C-Ⅳ、LN均不同程度的升高,与正常组相比差异有显著性意义(P＜0.05或P＜0.01);治疗后均有不同程度的降低,治疗Ⅱ组治疗后与治疗前相比明显下降(P＜0.05或P＜0.01),并与治疗Ⅰ组在慢性肝炎中度、重度、肝硬化间差异有显著性意义(P＜0.05或P＜0.01).结论苦参素具有逆转肝纤维化的作用,有部分机制通过抑制TGF-β1、TNF-α的分泌,并且具有良好的耐受性.     

RT－PCR，ELISA和IFA技术应用于汉坦病毒检测的比较

作者报道反转录聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ），双单克隆抗体（ＭｃＡｂ）夹心法酶联免疫吸附试验（ＳａｎｄｗｉｃｈＥＬＩＳＡ）和间接免疫荧光技术（ＩＦＡ）三种方法对汉坦病毒７６～１１８株细胞培养物中病毒ＲＮＡ及抗原的检测情况，并比较了三种方法的敏感性．结果表明：ＲＴ－ＰＣＲ敏感性最高，种毒后２４ｈ内即可检出病毒ＲＮＡ；其次为夹心法ＥＬＩＳＡ，种毒后４８ｈ可检出冻融细胞上清内的病毒抗原；ＩＦＡ检出感染细胞内病毒抗原的最短时间为７２ｈ．作者对设计引物与提高ＲＴ－ＰＣＲ的敏感性进行了讨论。     

原核表达汉滩病毒囊膜糖蛋白G1和G2的免疫学特性

目的 研究大肠杆菌表达的汉滩病毒囊膜糖蛋白Ｇ１和Ｇ２的免疫原性和免疫保护作用。方法 将大肠杆菌表达的Ｇ１和Ｇ２免疫小白鼠,测定免疫小鼠血清中汉滩病毒抗体的间接免疫荧光抗体和中和抗体滴度并利用被动免疫保护试验观察Ｇ１和Ｇ２免疫小鼠血清和脾细胞对汉滩病毒致死性感染乳鼠的保护作用。结果 表达Ｇ１和Ｇ２免疫小鼠血清中抗汉滩病毒抗体的滴度分别为１：１６０,１：３２０;Ｇ１,Ｇ２共同免疫不能提高免疫效果;ＮＰ     

290例药物性肝损伤患者临床特征分析*

目的 探讨药物性肝损伤(DILI)患者的病因构成、临床特点和预后情况。方法 2013年1月～2016年2月我科诊治的300例DILI患者,根据Roussel Uclaf因果关系(RUCAM)量表评估。结果 经RUCAM量表评分诊断为DILI患者290例;引起DILI的药物为中药,占42.8%,抗菌药和抗结核药物分别占9.3%和7.6%;基础疾病以胃炎最为多见,占18.6%;肝细胞型占54.5%;中度肝损伤占37.6%;肝衰竭发生率为5.5%,治疗有效率为93.8%,死亡4例。结论 应用RUCAM量表有助于DILI的规范化诊断,中药导致的肝损伤不可忽视,大部分DILI患者临床预后较好,少数发生急性肝衰竭,预后差,应引起高度重视。     

γ链细胞因子对慢性乙型肝炎患者CD8~+T细胞上TIM-3表达的调节

目的通过检测T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子(TIM-3)在慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血单个核细胞(PBMC)CD8+T细胞上的表达,探讨共用γ链细胞因子对CHB患者CD8+T细胞上TIM-3表达的影响。方法选取2014年1-5月在第四军医大学唐都医院传染科就诊的CHB初治患者15例,以及健康体检者8例。抽取两组全血,利用Ficoll密度梯度离心法分离出PBMC。分别给予γ链细胞因子白细胞介素(IL)2、IL-7、IL-15、IL-21和人抗CD3/CD28刺激,未刺激孔作为阴性对照。培养4 d后,用单克隆抗体染色,采用流式细胞仪检测CD8+T细胞上TIM-3的表达情况。计量资料比较采用成组t检验。结果与未刺激组相比,TIM-3在CD8+T细胞上表达如下:人抗CD3/CD28和IL-2、IL-15、IL-7刺激组显著升高,分别为(9.629±9.916)%,P=0.000 1;(3.817±2.694)%,P=0.000 6;(5.772±4.732)%,P=0.005 4;(3.560±2.045)%,P=0.030 2。IL-21刺激组表达虽有所增加,为(2.503±2.117)%,但差异无统计学意义,P=0.934 1。结论人抗CD3/CD28、γ链细胞因子中的IL-2、IL-7和IL-15都能够有效上调TIM-3在CHB患者CD8+T细胞上的表达,提示通过抑制它们不仅可以下调TIM-3的表达,而且可能会增强CHB患者体内CD8+T细胞的杀伤作用。     

丙型肝炎病毒C和E1区的DNA改组

目的:利用DNA改组技术进行不同亚型的HCVC和E1区的人工进化.方法:首先利用PCR扩增两段具有较高序列同源性的1kb左右的基因片段,两者相比较同源性大于83%.然后将其等量混合,在Mg2 存在的条件下,用DNase Ⅰ切割成50bp左右的小片段.这些小片段在不外加引物的条件下,利用PCR反应进行重聚,再将重聚物经过一轮正常的PCR扩增.结果:获得了与原来片段大小相当的基因片段.结论:这一技术为进一步筛选高活性的HCV C和E1区打下基础,有利于从一组序列同源性程度较高的基因库构建随机嵌合基因,并为改组其他基因家族提供了借鉴.     

RANTES-K慢病毒载体的构建及其慢病毒的产生和鉴定

目的：构建含CC细胞内趋化因子（CC-intrakine,RANTES-K）基因的慢病毒载体,为研究Ⅰ型人免疫缺陷病毒（HIV-1）感染的基因治疗奠定基础．方法：应用PCR技术,扩增目的基因片段RANTES-K,纯化后的PCR产物定向连接入pLenti6／V5-D-TOPO载体,构建慢病毒载体pLenti6／V5-R-K,并在293FT细胞中建立慢病毒株,最后转染HeLa细胞观察RANTES蛋白的表达．结果：成功构建了慢病毒载体pLenti6／V5-R-K,并证实RANTES蛋白可在人宫颈癌HeLa细胞系内表达．结论：慢病毒载体可介导CC-intrakine（RANTES-K）基因高效稳定转染HeLa细胞,可用于抗HIV-1感染的基因治疗．     

汉坦病毒基因重排的初步研究

为探明汉坦病毒Ⅰ型与Ⅳ型间能否发生基因重排以及发生重排的频率和特点 ,用汉坦病毒Ⅰ型 76- 118株与Ⅳ型ＰＨＶ株共同感染ＶｅｒｏＥ6细胞 ,在感染病毒第 8天刮片用间接免疫荧光检测病毒抗原 ,荧光达到 ～ 。将细胞及上清液冻融 3次 ,离心取上清液备用。在 4°Ｃ条件下 ,将 76- 118和ＰＨＶ混重的毒种做 10倍系列稀释 ,选取 10 - 4,10 - 5,10 - 63个稀释度进行空斑形成试验 ,挑取空斑 36个 ,分别加入Ｅ6细胞中培养 ,经两代培养后提取ＲＮＡ后进行反转录。在ＧｅｎｅＢａｎｋ上获取Ⅰ型和Ⅳ型Ｌ ,Ｍ ,Ｓ片段的基因序列 ,经对比分析 ,…     

CD4+CD25+调节性T细胞和感染免疫

免疫抑制是减轻机体免疫损伤的重要机制，近来研究发现，CD4^＋CD25^＋调节性T细胞是免疫抑制系统的关键组分之一。这群细胞具有明显的免疫抑制效能，通过与细胞直接接触发挥作用。本文就CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的生物学特性及其在感染免疫中的作用进行简要综述。