乳源免疫调节肽通过泛素-蛋白酶体途径抑制卵巢癌耐药性及其机制研究

目的 研究乳源免疫调节肽(PGPIPN)抑制卵巢癌耐药性及其机制.方法 MTT法检测PGPIPN与抗癌药顺铂(DDP)联合用药抑制人卵巢癌敏感细胞株(SKOV3)、耐药细胞株(SKOV3-DDP)和原代卵巢癌细胞的半数抑制浓度(IC50)和细胞增殖抑制率,PCR法和Western blot法检测人卵巢癌细胞株和原代卵巢癌细胞用药情况下泛素-蛋白酶体途径相关基因的表达.结果 PGPIPN和DDP联合用药细胞增殖抑制率显著高于单独DDP组或PGPIPN组,差异有统计学意义( P＜0. 05),PCR和Western blot结果表明 PG-PIPN通过调节泛素-蛋白酶体途径相关基因表达降低卵巢癌细胞的耐药性. PGPIPN促进SIAH和PSMA1 表达,降低β-catenin基因的表达(P ＜0. 05,P ＜0. 01),且有剂量依赖性.结论 PGPIPN通过泛素-蛋白酶体途径降低卵巢癌细胞对DDP的耐药性.     

单克隆抗体血型定型试剂临床应用

建立国际首株IgA类抗人血型物质单克隆抗体,并用此研制成功国内唯一的纯细胞培养上清液配制、不需浓缩、不需添加任何添加剂的IgA类ABO血型定型试剂.在国内6个医疗卫生单位检测包括献血员、新生儿、血液病和肿瘤等各类人群临床样本507 114例,经正反定型及与标准血清对照,结果显示,该试剂血型定型准确率达100%,其特异性强、亲和力好,效价高且稳定.     

骨髓基质细胞在胞外基质涂层钛表面的黏附和铺展

背景:为模拟胞外基质对生物行为的调控功能,通常采用基质中的活性成分对钛表面进行改性,但这些单一的活性成分与天然基质仍有差距.目的:在体外观察成骨细胞自身分泌的胞外基质修饰的钛表面对骨髓基质干细胞生物学行为的影响,为进一步指导钛种植体表面的仿生构建提供实验依据.设计、时间及地点:细胞-材料学体外对照观察,于2008-12/2009-02在安徽医科大学医学生物工程实验室完成.材料:SPF级新生1～3 d龄SD乳鼠2只,SD大鼠2只,由安徽省实验动物中心提供.TA2纯钛棒为宝鸡金埠钛设备有限公司产品.方法:取SD乳鼠,采用改良组织块法培养成骨细胞.取直径12 mm的钛棒,加工成厚1 mm纯钛片,消毒后放入24孔培养板中,用DMEM培养液将成骨细胞浓度调整为3×10.L-1,取1 mL/孔接种于钛片上,经过反复冻融脱玄细胞留下基质,即为基质化钛片.取SD大鼠,采用全血贴壁法培养骨髓摹质干细胞,取传至第3代的细胞,分为基质化钛片组、纯钛片组,用DMEM培养液将其浓度调整为1×108L-1,分别接种于基质化钛片和纯铁片上,1 mL/孔.主要观察指标:通过荧光免疫组化、扫描电镜观察和MTT检测,评价两组钛片上骨髓基质细胞的早期黏附及铺展情况.结果:接种4 h时与纯钛片组比较,基质化钛片组细胞黏附率显著升高(P＜0.05).接种4 h后,骨髓基质干细胞在基质化钛片表面已呈现出一定的附着形态:24 h后细胞呈良好的铺展形态,紧贴附于基质化钛片表面,出现伪足突起,细胞间以这种突起建立相互联系;72 h后细胞充分铺展,胞体平铺面积迅速扩大.结论:胞外基质的存在能够促进骨髓基质细胞的早期黏附,并且有利于细胞的进一步铺展.     

肺癌患者癌组织和血浆p16基因甲基化的检测及其临床意义

目的研究非小细胞肺癌患者癌组织和血浆p16基因甲基化及其临床意义。方法选择120例非小细胞肺癌患者,用巢式甲基化特异性聚合酶链反应法检测其肺癌组织、癌旁正常组织和外周血血浆p16基因的甲基化,并对120例正常对照组血浆样品进行p16基因甲基化检测,各组检测结果进行比较。结果肺癌组织p16基因甲基化率44.2%,高于癌旁组织的11.7%(P0.01);非小细胞肺癌患者血浆样品中p16基因甲基化检测率为32.5%,对照组血浆未检测到p16基因甲基化(P0.01);肺癌患者血浆样品与癌组织p16基因甲基化检出率比较差异无显著性(P0.05);患者血浆样品与癌旁组织p16基因甲基化检出率比较差异有显著性(P0.01)。结论肺癌患者癌组织和血浆样本p16基因甲基化的检测都为肺癌的早期筛查和诊断提供了有价值的参考信息。     

生物技术大实验教学改革的若干实践

生物技术是一门涉及领域宽、涵盖范围广、基础性强的新兴生物学科,是现代生物学发展并与相关学科交叉融合的产物.生物技术包括基因工程、蛋白质工程、细胞工程、发酵工程等领域[1].     

枯否细胞条件培养基及混合血清对肝星状细胞HSC-T6的刺激作用

目的探讨枯否细胞条件培养基(KCCM)、混合的新生牛血清(NBS)和大鼠血清(RS)对肝星状细胞(HSC)增殖和胶原合成的促进作用.方法采用KCCM、单纯NBS及混合血清刺激大鼠HSC-T6细胞,用3H-TdR和3H-脯氨酸掺入法检测HSC增殖活性和胶原合成状况.结果不同刺激剂作用48 h后,HSC均体积增大,胞突增多延长,核分裂像增多.48 h的3H-TdR和96 h的3H-脯氨酸掺入明显增加.结论混合血清对HSC-T6的综合激活作用较KCCM和单纯10% NBS的作用明显,能明显促进其增殖和胶原合成,是有效的肝纤维化体外模型.     

NSCLC患者血浆p16和MGMT基因甲基化检测及临床意义

目的：检测非小细胞肺癌（non—small cell lung cancer，NSCLC）患者外周血血浆中p16基因、O^6-甲基乌嘌呤-DNA甲基转移酶（O^6-methylguanine—DNA methyhransferase，MGMT）基因启动子的甲基化状态，探讨p16、MGMT基因启动子的异常甲基化在NSCLC筛查及早期诊断中的意义。方法：利用巢式甲基化特异性聚合酶链反应法检测NSCLC患者外周血血浆p16、MGMT基因启动子的甲基化状态。结果：65例NSCLC血浆样品中分别发现19例（29．23％）p16基因启动子异常甲基化和16例（24．62％）MGMT基因启动子异常甲基化，45例正常对照血浆组未检测到p16、MGMT基因启动子的异常甲基化（P〈0．05），血浆中两基因甲基化检出率与NSCLC的分型及临床分期无明显相关性（P〉0．05）。结论：利用巢式甲基化特异性PCR法检测外周血血浆中p16、MGMT基因启动子的甲基化，可为NSCLC的筛查、早期诊断及预后判断提供有价值的信息。     

广西某血站献血员巴贝虫感染情况调查

目的 调查分析广西某采血站献血员感染巴贝虫情况,提供我国巴贝虫的流行病学基础资料,也为安全输血提供科学依据.方法 于2013年从广西某血站搜集抗凝输血袋残留血,共计1 900份,采用巴贝虫属18S rRNA和β-tubulin的引物Nest-PCR、形态学观察及间接荧光免疫方法(IFA),对献血员血液内的巴贝虫感染情况进行检测.结果 广西某采血站献血员血液内巴贝虫感染总阳性率为2.53％(48/1 900),均为田鼠巴贝虫(Babesia microti),巴贝虫属18S rRNA引物扩增灵敏度远高于β-tubulin引物.显微镜检查有38份标本在红细胞内发现有核呈圆形且致密、胞质呈环形且纤细的环状体,巴贝虫属18S rRNA的Nest-PCR阳性标本血清IFA在抗体滴度≥1∶64未观察到特异性荧光,视为阴性.结论 健康献血员中存在一定比例的Babesia microti感染率,对于有免疫功能低下的接受输血者来说,应当增加输血样本的巴贝虫检测.     

用重组抗原检测鼻咽癌病人血清IgA／gp125抗体

用重组抗原检测鼻咽癌病人血清ＩｇＡ／ｇｐ１２５抗体薛绍礼１皮国华２谷淑燕２李平１抗Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒ病毒（ＥＢＶ）壳抗原（ＶＣＡ）ＩｇＡ抗体，是鼻咽癌（ＮＰＣ）早期诊断的一个重要血清学指标。曾先后用免疫荧光法（ＩＦ）和免疫酶法（ＩＥ）进行检测［１...     

抗Epstein－Bars病毒壳抗原gp125单克隆抗体的研制

用重组痘苗病毒在１４３细胞上表达的ｇＰ１２５粗提物免疫Ｂａｌｂ／Ｃ小鼠，用杂交瘤技术获得７株稳定分泌抗Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒｓ（ＥＢ）病毒ｇｐ１２５单克隆抗体的杂交瘤细胞株。对杂交瘤细胞及单克隆抗体进行一系列分析和鉴定，初步建立了用表达产物及特异性单克隆抗体检测ＥＢ病毒ＩｇＡ／ｇｐ１２５抗体的三步ＥＬＩＳＡ法。用此法检测ＩｇＡ／ＶＣＡ阳性的鼻咽癌病人血清及ＩｇＡ／ＶＣＡ阴性的正常人血清，结果完全吻合。