羟乙基淀粉沉降法分离脐血过程的深入分析及条件优化

目的　进一步提高HES(羟乙基淀粉 )沉降法分离脐血单个核细胞的收率。方法　对比和分析对该沉降过程完成后上下层的白细胞数 ,并考察HES浓度、HES与脐血体积比、沉降距离对该过程白细胞收率的影响。结果　沉降过程存在因红细胞团向下沉降而推动白细胞向上运动的对流现象 ,该现象受到细胞占悬浮液总体积的比例和红细胞下降速度的影响 ,增加沉降距离能增加对流的作用距离 ,有利于提高白细胞的收率 ,提高HES与脐血的体积比也有利于提高白细胞收率。悬浮液中HES浓度 <0 .6 %时 ,细胞不能有效沉降 ,>3%时 ,会引起白细胞在红细胞中的夹带而影响收率。用 3%HES以 2∶1与脐血混合 ,在沉降距离为 2 5cm的沉降管中沉降 4 0min ,分离后白细胞收率达 94 .3%。结论　采用 3%HES溶液 ,并提高HES与脐血的体积比和增加沉降距离 ,可进一步提高HES沉降法分离脐血单个核细胞的收率     

浙江温岭帕金森病线粒体DNA基因突变与多态性研究

目的 研究温岭散发性帕金森病(PD)线粒体DNA(mtNDA)基因突变与国人散发性PD相关性.方法 对88例散发性PD患者和60例正常健康人的基因位点G1719A、G4580A、C7028T进行扩增,将其异常结果进行基因测序,确定基因突变发生位点.结果 在PD患者G1719A附近有4例1711(G→A)1738(A→G),3例1738(A→G),1例1664(G→A)突变；在G4580A附近有1例4476(A→G),1例4638(A→G),1例4651(→T)突变；在C7028T附近有1例6984(C→T),1例6979( G→C) 6984(C→T),3例7083(C→),4例6963(G→A),1例6910(C→A)突变,共发现11种突变类型,对照组无发现突变位点.结论 散发性PD患者存在线粒体基因位点突变,预示线粒体基因突变参与了PD的发病过程.     

GM-CSF体外促进多倍体巨核细胞的生成

在TPO IL-3的细胞因子组合中添加不同浓度GM-CSF，从脐血CD34^ 细胞定向诱导巨核细胞的形成，以此考察GM-CSF对巨核细胞体外扩增和成熟的作用。比较了TPO IL-3、TPO IL-3 GM-CSF(5、20、100μg／L)的4种细胞因子组合对巨核细胞扩增及形成多倍体的作用。结果发现：在TPO IL-3的细胞因子组合中添加GM-CSF有利于总细胞的扩增，对巨核细胞的纯度没有显著的影响。体外培养14d后，培养物巨核细胞中多倍体(≥8N)巨核细胞比例明显提高，从中可以看出GM-CSF能促进巨核细胞多倍体的形成。     

脐血细胞在搅拌悬浮生物反应器中的生长特性

目的:了解脐血细胞在搅拌悬浮生物反应器中的生长特性,为开发搅拌悬浮生物反应器大规模生产造血细胞提供实验依据。方法:实验于2003-06/11在华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室动物细胞与组织工程研究室完成。脐血细胞在基本细胞因子组合干细胞因子+白细胞介素3+白细胞介素6的刺激作用下,考察其在静态和动态培养系统中的生长规律,搅拌转速(30,60r/min)对脐血细胞细胞周期分布和凋亡的影响以及不同形状搅拌桨(平翼桨、搅拌棒)对脐血细胞生长的影响。结果:①总细胞的扩增:随着细胞逐步适应体外生存环境,总细胞开始表现出增殖的趋势,且转瓶扩增效果略好于孔板,但差异不显著。②CD34+细胞的扩增:在相同细胞因子组合的培养条件下,动态培养在短期培养(1周左右)过程中表现出了明显的增殖优势,而静态培养更有利于维持造血干/祖细胞状态。③总集落形成细胞的扩增:在短期培养中动态培养系统具有明显的生长优势,随着培养时间的延长,静态培养对总集落形成细胞的维持作用优于动态培养。④不同搅拌转速对脐血细胞细胞周期分布和凋亡的影响:相对于静态培养,CD34+细胞除了G2期含量显著增加外,对其他细胞周期和凋亡无显著影响,随着搅拌转速从30r/min提高到60r/min时,CD34+细胞周期分布和凋亡差异不明显,而细胞周期分布和凋亡比率在静态培养和60r/min的转瓶培养情况下更为相似,表明流体作用力的增强对CD34+细胞的生长行为没有影响。⑤不同搅拌桨形状对造血细胞培养的影响:相同搅拌转速(30r/min)下培养来源相同的脐血细胞,1周后平翼桨转瓶中的单个核细胞数锐减,而搅拌棒转瓶却能保持基本不变,且差异显著(P<0.05)。说明不同搅拌桨形式导致混合方式的差异以及由此产生的不同流体作用力等对造血细胞增殖造成某种程度的影响。结论:动态培养能支持脐血细胞的生长,且造血干/祖细胞的增殖优于静态培养。搅拌转速的增加对脐血细胞细胞周期分布和凋亡无显著影响,而不同的搅拌形式与脐血细胞的增殖有关。     

缺血性脑卒中二级预防患者消化道出血影响因素的前瞻性研究

目的 探讨缺血性脑卒中(CIS)二级预防患者消化道出血(GB)的影响因素.方法 根据是否发生GB,分为出血组和非出血组.采用单因素分析和多因素分析相结合方法探讨GB的影响因素.结果 出血组年龄≥65岁、GB史、胃病史、肾功能不全、起病急、CIS发作次数≥2次及NIHSS评分＞12分的比例显著高于非出血组,其差异有统计学意义(P＜0.05);出血组联用他汀类、质子泵抑制剂和胃黏膜保护剂的比例显著低于非出血组,其差异有统计学意义(P＜0.05);Logistic回归分析显示:年龄≥65岁、GB史、胃病史、起病急、NIHSS评分＞12分和CIS发作次数≥2次为GB的危险因素;联合他汀类和质子泵抑制剂为GB的保护因素.结论 老龄、GB和胃病病史、起病急骤、NIHSS评分较高及CIS发作次数较多均为CIS并发GB的危险因素,联用他汀类和质子泵抑制剂可降低GB风险.     

多种性病并患病人的诊治探讨

我院收治的性传播疾病的病人中,数种性病并患者较多,本文就其中并患肝炎、淋病及梅毒的2例女性患者的诊治进行探讨。例1,女性,28岁,未婚,推销员。因恶心纳差,巩膜黄染10余天来院就诊。体检:皮肤及巩膜重度黄染。肝脾未触及,肝区叩击痛( )。肝功检验:TTT15u,TFT17u,GPT182u,Ⅱ50u。乙肝5项中:     

脂蛋白（a）与脑梗塞

目的 为了研究脂蛋白(a)[LP(a)]与脑梗塞的关系。方法 采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法对89例脑梗塞患者和46例正常对照组进行了血清LP(a)水平测定。结果 脑梗塞患者血清LP(a)水平明显高于正常对照组(P<0.05)。同时发现皮层梗塞患者血清LP(a)水平明显高于基底神经节区梗塞患者(P<0.05)。结论 血清LP(a)水平增高是脑梗塞的重要危险因素之一。     

卒中相关性肺炎病原菌分布及耐药性分析

目的 探讨卒中相关性肺炎病原菌的分布特点及耐药性,为临床更好的使用抗菌药物提供参考.方法 对214例卒中相关性肺炎患者痰液进行细菌培养和药敏试验,并进行分析.结果 共获得阳性菌株250株,其中革兰阴性杆菌155株(62.0％),以大肠埃希菌、肺炎克雷伯杆菌、鲍曼复合醋酸钙不动杆菌、铜绿假单胞菌、阴沟肠杆菌为主,对亚胺培南及带有β-内酰胺酶抑制剂药物较敏感;革兰阳性球菌63株(25.2％),以金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌为主,金黄色葡萄球菌对青霉素G、左氧氟沙星、氨苄西林高度耐药,对万古霉素、替考拉宁敏感;真菌32株(12.8％),分别为白念珠菌、热带念珠菌、光滑念珠菌.结论 卒中相关性肺炎的主要病原菌为革兰阴性杆菌,临床上可先经验性使用带有β-内酰胺酶抑制剂药物,并根据药敏试验结果调整抗菌药物.