木犀草素联合下调miR-425-5p对宫颈癌HeLa细胞生物学特性的影响

目的 探讨木犀草素联合下调miR-425-5p对宫颈癌HeLa细胞生物学特性的影响及可能机制。方法 将宫颈癌HeLa细胞（购自中国医学科学院肿瘤细胞库）分成Control组（不做任何处理）、Anti-NC组（在HeLa细胞中用Lipofectamine 2000转染inhibitor control）、Anti-miR-425-5p组（在HeLa细胞中用Lipofectamine 2000转染miR-425-5p inhibitor）、木犀草素+Anti-NC组（在HeLa细胞中用Lipofectamine 2000转染inhibitor control,经40 μmol/L木犀草素处理）、木犀草素+Anti-miR-425-5p组（在HeLa细胞中用Lipofectamine 2000转染miR-425-5p inhibitor,经40 μmol/L木犀草素处理）共5组,并对上述5组采用MTT测定细胞培养24 h后A值（以A值代表细胞增殖活性）,平板克隆实验测定细胞培养12 d后克隆形成率,流式细胞术检测细胞培养24 h后凋亡率,Transwell小室测定细胞培养24 h后侵袭和迁移数目,Western blot法检测细胞培养24 h后p-Akt、c-caspase-3、c-caspase-9、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、MMP-2、Bax、Bcl-2蛋白表达水平,比较5组上述指标差异。结果 与Anti-NC组比较,Anti-miR-425-5p组、木犀草素+Anti-NC组、木犀草素+Anti-miR-425-5p组细胞增殖活性、侵袭与迁移数目和MMP-9、MMP-2、p-Akt蛋白表达水平均明显降低,细胞凋亡率和c-caspase-3、c-caspase-9、Bax蛋白表达水平升高,Bcl-2蛋白表达减少,差异均有统计学意义（P<0.05）。与Anti-miR-425-5p组、木犀草素+Anti-NC组比较,木犀草素+Anti-miR-425-5p组细胞增殖活性、侵袭与迁移数目和MMP-9、MMP-2、p-Akt蛋白表达水平均明显降低,细胞凋亡率和c-caspase-3、c-caspase-9、Bax蛋白表达水平升高,Bcl-2蛋白表达减少,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 木犀草素联合下调miR-425-5p可抑制宫颈癌HeLa细胞增殖、侵袭和迁移,诱导细胞凋亡,作用机制可能与抑制Akt信号通路的激活有关。     

赶黄草水煎液对金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌生物膜形成的影响

目的 探究赶黄草水煎液在体外对金黄色葡萄球菌(SA)和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌生物膜(MRSA)形成的影响。方法 采用微量肉汤稀释法测定赶黄草水煎液对金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),根据MIC和MBC绘制杀菌曲线,采用结晶紫染色法和激光共聚焦观察赶黄草水煎液对SA和MRSA生物膜形成的影响,并通过测定胞外多糖和胞外DNA的含量研究赶黄草水煎液破坏SA和MRSA生物膜的作用方式。结果 赶黄草水煎液对SA的MIC和MBC分别为1.36和2.71 mg/mL,对MRSA的MIC和MBC为2.71和5.73 mg/mL;赶黄草水煎液可使SA和MRSA均生长受到抑制,抑制生物膜的形成、减少胞外多糖和胞外DNA的释放。结论 赶黄草水煎液对SA和MRSA具有良好的抑菌作用,可通过抑制胞外多糖和DNA的分泌破坏生物膜的形成。     

不同载体木犀草素固体分散体的制备及溶出度测定

目的:制备不同载体的木犀草素(LUT)固体分散体(SD),提高LUT的溶解度和溶出度,并探讨不同载体对药物溶解度和溶出度的影响。方法:应用平衡溶解度和超饱和溶液抑晶试验,筛选合适的载体材料并采用溶剂法制备SD;在单因素试验基础上,以药载比、温度和乙醇用量为影响因素,溶出度为指标,采用Box-Behnken设计优化处方和工艺;用差式扫描量热法(DSC)、扫描电镜(SEM)、X-射线衍射(XRD)以及傅里叶红外光谱(FTIR)对SD进行表征。结果:选择聚乙烯己内酰胺-聚醋酸乙烯酯-聚乙二醇接枝共聚物(Soluplus^?)和共聚维酮(PVP/VA)为载体材料;最优条件为药载比1∶11,温度60℃,乙醇用量50 mL(Soluplus^?)或35 mL(PVP/VA);与原料药相比,2种SD溶解度分别提高42倍(Soluplus^?)和102倍(PVP/VA);120 min时2种SD的累积溶出度均达到95%;SEM、DSC和XRD表征结果显示,药物在SD中均以无定形态存在;IR结果显示,药物与载体之间存在氢键作用。结论:2种载体制...     

白花蛇舌草化学成分及其抗结肠癌活性初探

目的 分析中药白花蛇舌草40%乙酸乙酯部位的化学成分,并初步探讨其抗结肠癌活性。方法 采用中压制备色谱、制备型高效液相色谱对白花蛇舌草40%乙酸乙酯部位进行分离纯化;根据理化性质及波谱数据鉴定化合物结构。采用MTT法检测化合物对结肠癌细胞HT-29和SW480的生长抑制作用。结果 共分离得到9个化合物,分别鉴定为齐墩果酸（1）、白桦脂酸（2）、熊果酸（3）、山柰酚（4）、槲皮素（5）、大黄素（6）、大黄酸（7）、芦荟大黄素（8）、大黄酚（9）,其中化合物1,2（半数抑制浓度≥100.4,26.5μmol/L）对HT-29和SW480细胞的生长抑制作用较强。结论 化合物2,6,7,8为首次从该植物中分离得到,化合物1,2为白花蛇舌草的抗结肠癌活性成分。     

舒肝解郁胶囊联合圣·约翰草提取物片治疗抑郁症的疗效观察

目的 探讨舒肝解郁胶囊联合圣·约翰草提取物片治疗抑郁症的临床疗效。方法 选取2018年7月—2020年12月衡水市第七人民医院收治的200例抑郁症患者,按随机数字表法将所有患者分为对照组和治疗组,每组各100例。对照组口服圣·约翰草提取物片,1片/次,3次/d。治疗组在对照组基础上口服舒肝解郁胶囊,2粒/次,每日早晚各1次。两组疗程均为6周。观察两组的临床疗效,比较治疗前后两组17项汉密尔顿抑郁量表（HAMD-17）、90项症状自评量表（SCL-90）评分、匹兹堡睡眠质量指数（PSQI）、36项健康调查简表（SF-36）总分。统计两组不良反应情况。结果 治疗后,治疗组总有效率是92.00%,较对照组的82.00%显著提高（P<0.05）。治疗2、4、6周后两组HAMD-17评分均显著降低（P<0.05）,均以治疗组下降更显著（P<0.05）。治疗后两组SCL-90中各因子（包括抑郁、人际关系敏感、躯体化、精神病性、强迫症状等）评分及其总评分均显著降低（P<0.05）,均以治疗组下降更显著（P<0.05）。治疗后,两组PSQI总分均显著降低,SF-36总分均显著提高（P<0.05）,均以治疗组改善更显著（P<0.05）。治疗过程中,治疗组不良反应发生率是3.00%,显著高于对照组的2.00%;两组比较差异无统计学意义。结论 舒肝解郁胶囊联合圣·约翰草提取物片能有效提高抑郁症患者的总体疗效,减轻抑郁症状,改善心理健康状况、睡眠质量及生活质量,控制病情发展,且安全性高。     

基于网络药理学白花蛇舌草治疗胰腺神经内分泌肿瘤作用机制探讨及体外实验验证

目的 采用网络药理学方法探讨白花蛇舌草治疗分化良好的胰腺神经内分泌肿瘤（pNET）的作用机制,并通过体外细胞实验进行验证。方法 应用中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）获取白花蛇舌草的活性成分和作用靶点,通过GEO、GeneCards、OMIM、PharmGkb、Drugbank数据库获取pNET的疾病相关靶点,通过R软件对共同靶点进行基因本体（GO）和京都基因和基因组百科全书（KEGG）通路富集分析。以CCK-8法和Western blotting体外实验观察白花蛇舌草提取物对人胰腺神经内分泌肿瘤BON-1、QGP-1细胞的增殖抑制作用及对细胞凋亡相关蛋白Bcl-2表达的影响。结果 筛选得到白花蛇舌草活性成分7个,成分相关靶点158个;获得pNET疾病相关靶点2 870个,成分与疾病共同相关靶点119个。共同靶点的GO功能富集分析共得到2 099个条目,KEGG富集分析共得到162条信号通路,包括细胞凋亡、PI3K/Akt、P53等信号通路。不同质量浓度［0（对照）、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5 mg·mL^-1］白花蛇舌草提取物干预BON-1、QGP-1细胞48 h后,细胞增殖明显受到抑制,且抑制作用具有明显的浓度相关性。与对照组比较,随着白花蛇舌草提取物质量浓度增加,BON-1、QGP-1细胞的增殖受到明显抑制,漂浮死亡细胞数增加;与对照组比较,高质量浓度白花蛇舌草提取物可显著降低BON-1、QGP-1细胞Bcl-2蛋白表达（P < 0.05）。结论 白花蛇舌草提取物能够有效抑制人胰腺神经内分泌肿瘤BON-1、QGP-1细胞增殖,通过抑制Bcl-2蛋白表达促进细胞凋亡;白花蛇舌草能够通过多成分、多靶点、多通路的途径治疗胰腺神经内分泌肿瘤。     

腺苷蛋氨酸联合复方赶黄草方治疗胆道梗阻所致胆汁淤积性肝损伤的疗效分析

目的:探讨腺苷蛋氨酸联合复方赶黄草方治疗胆道梗阻所致胆汁淤积性肝损伤的临床疗效。方法:选取2018 年10 月—2019 年4 月在我院收治的胆道梗阻所致胆汁淤积性肝损伤的患者70 例,根据随机数字表法将患者分为对照组和观察组,每组患者35 例。其中对照组患者使用丁二磺酸腺苷蛋氨酸肠溶片,观察组患者额外联合复方赶黄草方汤剂,比较两组的疗效、肝功能以及炎性因子的水平。结果:治疗后,两组患者血清中的直接胆红素(DBIL)、总胆固醇(CHOL)、丙氨酸氨基转氨酶(ALT)、天冬氨酸氨基转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(TBIL)、间接胆红素(IBIL) 水平均显著降低(P ＜ 0.05),且观察组优于对照组;两组患者白细胞计数(WBC)、C 反应蛋白(CRP)表达水平均显著降低(P ＜ 0.01),同时观察组下降水平较对照组更加明显(P ＜ 0.05),而两组患者血清IgA、IgE、Ca2+ 水平与治疗前比差异无统计学意义(P >0.05)。结论:腺苷蛋氨酸联合复方赶黄草方可以有效缓解胆道梗阻所致胆汁淤积性肝损伤临床症状,能够改善患者肝功能并降低炎症反应水平。     

HPLC-DAD同时测定洋甘菊中木犀草素-7-O-β-D葡萄糖苷和芹菜素-7-O-β-D葡萄糖苷的含量

目的建立同时测定洋甘菊中木犀草素-7-O-β-D葡萄糖苷和芹菜素7-O-β-D葡萄糖苷含量测定的HPLC方法。方法色谱柱:Agilent Zorbax SB-C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:甲醇-0.2%磷酸(34∶66);流速:1.0 ml/min;柱温25℃;进样量10μl;检测波长:350 nm。结果木犀草素-7-O-β-D葡萄糖苷和芹菜素-7-0-β-D葡萄糖苷的线性范围分别为5.11~409.00、12.56~1 005.00μg/ml,相关系数r>0.999 3,具有良好的线性。精密度、稳定性符合要求,木犀草素-7-O-β-D葡萄糖苷和芹菜素-7-0-β-D葡萄糖苷加样回收率分别为96.44%~103.55%、95.12%~101.52%,RSD均为0.03%。结论该方法简便、准确、重复性好,适用于洋甘菊中木犀草素-7-O-β-D葡萄糖苷和芹菜素7-O-β-D葡萄糖苷含量测定。     

威草胶囊对尿酸性肾病大鼠肾组织miR-29a和miR-30c的影响和机制

目的观察威草胶囊对尿酸性肾病大鼠肾组织miR-29a和miR-30c表达的影响,探讨威草胶囊降血尿酸和肾保护作用的具体机制。方法将50只SPF级SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、别嘌呤醇组、威草胶囊小剂量组、威草胶囊大剂量组,每组10只。正常组给予普通饲料喂养,其余4组均给予高嘌呤饲料喂养,在给予高嘌呤饲料后的第20天停用高嘌呤饲料,均改用普通饲料喂养。正常组和模型组每日给予蒸馏水2 m L灌胃,别嘌呤醇组给予别嘌呤醇0.05 g/(kg·d)灌胃,威草胶囊小剂量组、大剂量组分别给予威草胶囊0.9g/(kg·d)、1.8 g/(kg·d)灌胃,共4周。4周后处死大鼠,检测血清UA、BUN、SCr水平;摘取双侧肾脏,做HE染色、Masson染色,免疫组织化学方法检测CTGF、TGF-β1、ColⅠ、ColⅢ表达情况,实时荧光定量PCR法测定大鼠肾组织中miR-29a和miR-30c表达情况。结果模型组大鼠血清UA、BUN、SCr水平均明显高于正常组(P均0.05);别嘌呤醇组血清UA水平明显低于模型组(P0.05),威草胶囊小剂量组、大剂量组血清UA、BUN、SCr水平均明显低于模型组(P均0.05);威草胶囊大剂量组血清UA、BUN水平均明显低于别嘌呤醇组(P均0.05),威草胶囊小剂量组血清UA、BUN、SCr水平与威草胶囊大剂量组比较差异均无统计学意义(P均0.05)。HE染色、Masson染色:正常组少量肾组织纤维化,纤维化程度轻;模型组纤维化区域增多,纤维化程度重;别嘌呤醇组肾组织纤维化改变不明显;威草胶囊小剂量组和大剂量组肾组织间质纤维化程度明显减轻,威草胶囊大剂量组接近正常。模型组大鼠肾组织中CTGF、TGF-β1、ColⅠ、ColⅢ表达量均明显高于正常组(P均0.05);威草胶囊小剂量组和大剂量组CTGF、ColⅠ、ColⅢ表达量和威草胶囊大剂量组TGF-β1表达量均明显低于模型组和别嘌呤醇组(P均0.05);威草胶囊小剂量组CTGF、TGF-β1、ColⅠ、ColⅢ表达量与威草胶囊大剂量组比较差异均无统计学意义(P均0.05)。模型组大鼠肾组织中miR-29a、miR-30c表达水平均明显低于正常组(P均0.05);威草胶囊小剂量组和大剂量组miR-29a、miR-30c表达水平均明显高于模型组(P均0.05),别嘌呤醇组与模型组比较差异无统计学意义(P均0.05);威草胶囊大剂量组miR-29a、miR-30c表达水平均明显高于别嘌呤醇组(P均0.05);威草胶囊小剂量组miR-29a、miR-30c表达水平与威草胶囊大剂量组比较差异均无统计学意义(P均0.05)。结论威草胶囊可改善尿酸性肾病大鼠的肾功能,减轻肾组织纤维化程度,与其升高肾组织miR-29a、miR-30c的表达水平,降低TGF-β1、CTGF的表达,减少ColⅠ、ColⅢ的生成有关,别嘌呤醇不具有此作用。