存活3年以上肾移植患者环孢素血药浓度监测结果的临床分析

 目的 对存活3年以上肾移植患者环孢素（CsA）血药浓度监测的结果进行统计分析,分析术后患者环孢素用药剂量、血药浓度的个体差异,与性别、年龄的关系,评价新三联治疗方案是否可降低环孢素用量及血药浓度,并分析术后时间与ρ₂及ρ₀的关系。 方法 采用荧光偏振免疫法（FPIA）测定97例肾移植患者1 780例次环孢素血药浓度,分析术后时间、性别、患者年龄、免疫抑制方案等因素与环孢素血药浓度的关系。结果 患者进行肾移植术后,环孢素用药剂量、血药浓度随术后时间的延长而逐渐降低,且个体差异较大。在术后早期,女性患者的用药剂量稍大于男性。随着术后时间的延长,女性患者的用药剂量略低于男性患者,但两者无显著性差异。在用药剂量相似的情况下,女性患者环孢素血药浓度低于男性患者,尤其是术后24个月以后,男女两组血药浓度相比具有显著性差异（P<0.05）。随着年龄的增长,2组患者的用药剂量及血药浓度呈下降趋势;在术后同一时间段内,50岁以上患者环孢素用药剂量及血药浓度低于50岁以下患者,差异有统计学意义（P<0.05）。与老三联治疗方案组相比,新三联治疗方案组中环孢素用量明显减少,血药浓度值降低,呈明显统计学意义（P<0.05）。患者ρ₂及ρ₀随着移植时间延长及环孢素用量的减少而下降。结论 肾移植术后患者的环孢素用药剂量、血药浓度有较大的个体差异。应结合患者的临床表现作用进行全面分析,及时调整治疗方案,实现个性化用药,使环孢素在肾移植后的应用得到最佳治疗效果。     

自体骨软骨柱及骨膜骨柱混合嵌入修复大面积骨软骨复合缺损

骨软骨缺损是指同时有软骨下骨和软骨的复合缺损,重建坚强的软骨下骨支撑和光滑的软骨面对于远期效果同等重要.     

人胰岛素样生长因子I基因转染骨髓基质细胞的实验研究

目的检测人胰岛样生长因子Ⅰ基因转染骨髓基质细胞的效果及目的基因的表达情况,寻找一种改良组织工程种子细胞的新方法。方法抽取成年雄性山羊髂嵴骨髓,贴壁分离法接种培养骨髓基质细胞,检测细胞生长特性。取第2代细胞,按3∶1比例用FuGene6转染试剂介导,将重组真核表达质粒pIRES2 EGFP hIGF Ⅰ(EGFP为增强绿色荧光蛋白,hIGF Ⅰ为人胰岛素样生长因子Ⅰ)转染骨髓基质细胞,转染后4~72h和传代后分别用倒置荧光显微镜观察标志基因增强绿荧光蛋白的表达情况,计算转染效率。酶联免疫吸附试验检测培养上清液中hIGF Ⅰ的浓度变化。转染细胞爬片行hIGF Ⅰ免疫组化染色检测hIGF Ⅰ的表达。提取转染后48h的细胞总RNA,RT PCR检测hIGF Ⅰ和内核糖体进入位点(IRES)的表达。收集转染前及转染后48h的细胞行流式细胞仪检测细胞周期分布及荧光表达情况。结果成年山羊骨髓基质细胞在接种后24h开始贴壁,伸展成长梭形,原代细胞呈集簇状分布。在转染后4h即有细胞表达绿色荧光蛋白,荧光强度和表达细胞总数在48h达高峰, 72h时见部分细胞荧光强度下降,传代后仍可观察到EGFP的表达。转染后4~72h转染上清液中分泌hIGF Ⅰ的浓度呈逐渐上升趋势,在72h最高可达34 75ng/ml。转染后部分细胞形态发生变化。hIGF Ⅰ免疫组化染色证实在胞浆中     

自体骨软骨柱及骨膜骨柱混合嵌入修复大面积骨软骨复合缺损

骨软骨缺损是指同时有软骨下骨和软骨的复合缺损,重建坚强的软骨下骨支撑和光滑的软骨面对于远期效果同等重要.     

自体骨软骨柱及骨膜骨柱混合嵌入修复大面积骨软骨复合缺损

骨软骨缺损是指同时有软骨下骨和软骨的复合缺损,重建坚强的软骨下骨支撑和光滑的软骨面对于远期效果同等重要.     

人半月板纤维软骨细胞对人胰岛素样生长因子Ⅰ的效应反应

背景：人类半月板纤维软骨细胞可能会对有积极生物学效应的生长因子产生反应，例如人胰岛素样生长因子Ⅰ，半月板细胞也可能会成为将来临床基因治疗的有效供体。 目的：拟观察人半月板纤维软骨细胞对人胰岛素样生长因子Ⅰ的效应反应。 设计、时间及地点：开放性实验，于2007-10/2008-04在青岛大学附属医院骨科实验室完成。 材料：收集半月板撕裂和盘状半月板患者关节镜手术中切取的半月板组织用于人半月板纤维软骨细胞培养。 方法：利用聚合酶链式反应从人肝细胞cDNA文库中获得人胰岛素样生长因子Ⅰ基因，将其克隆入双顺反子真核表达载体pIRES2-EGFP中。将关节镜手术中切取的成人半月板组织，体外进行分离培养。利用阳离子脂质体FuGene6将人胰岛素样生长因子Ⅰ转染入人半月板纤维软骨细胞中。 主要观察指标：转染人胰岛素样生长因子Ⅰ后增强型绿色荧光蛋白的表达；检测细胞上清中人胰岛素样生长因子Ⅰ的分泌浓度；流式细胞仪检测细胞转染后的变化。 结果：基因测序及酶切，聚合酶链反应等均证实人胰岛素样生长因子Ⅰ基因的正确克隆，并形成正确的真核表达载体pIRES2-EGFP-hIGF-Ⅰ。人半月板纤维软骨细胞在接种40 h 后贴壁并伸展为成纤维细胞样，三角形或多角形外观。增强型绿色荧光蛋白的表达逐渐增加，在转染后56 h 达到峰值。细胞上清中人胰岛素样生长因子Ⅰ蛋白质的浓度变化趋势类似增强型绿色荧光蛋白的表达，峰值可达22.68 μg/L。蛋白免疫印迹、反转录-聚合酶链反应和免疫组织化学染色均证实人胰岛素样生长因子Ⅰ蛋白质的存在。转染后部分细胞表型发生变化，增殖加速。流式细胞仪检测转染后S期细胞比例增多。 结论：人类半月板纤维软骨细胞可被阳离子脂质体安全有效地转染，转染的人胰岛素样生长因子Ⅰ基因可分泌较高水平的生长因子并加速细胞的增殖。     

龙眼肉乙醇提取物对雌性大鼠垂体-性腺轴的作用

目的 :观察龙眼肉乙醇提取物对大鼠垂体 -性腺轴的作用。方法 :龙眼肉乙醇提取物给大鼠ip。 2 5g·kg- 1 ·d- 1 、5g·kg- 1 ·d- 1 ,共 1 0天 ,颈总动脉取血 ,用放射免疫法测定大鼠血浆中FSH、E2 、P、LH、T、PRL的含量。结果 :龙眼肉乙醇提取物明显降低雌性大鼠血浆中PRL、E2 、T的含量 (P <0 0 1 ) ,增加其FSH、P的含量 (P <0 0 1 )。但是对LH的含量无影响。结论 :龙眼肉乙醇提取物明显影响大鼠垂体 -性腺轴的内分泌机能。     

软骨移植与软骨下骨钻孔修复全层关节软骨缺损的比较实验研究

目的 :评价软骨移植、软骨下骨钻孔修复关节软骨缺损的生物特性和效果差异。方法 :采用重复拉丁方设计 ,将 36只雄性新西兰大白兔按三个因素三个水平进行随机区组 ,对左右后肢按设计好的创面大小制造全层软骨缺损。软骨移植组将不同家兔关节软骨交换嵌入移植。钻孔组依创面大小制造孔直径、间距、深度相同的骨孔 ,深达松质骨。对照组缺损不作任何修复。术后 4、8、1 2周处死取材 ,分别进行大体观察、光镜观察、电镜观察 ,对观察指标进行量化统计学分析。结果 :(1 )两实验组在第 1 2周时均能以类透明软骨组织修复缺损 ,而对照组为纤维肉芽组织 ,统计学分析表明各组间有显著性差异 (P <0 .0 1 )。 (2 )光镜观察表明两种手术方法均能以软骨的方式修复缺损 ,软骨移植组无明显免疫排斥迹象 ,软骨细胞有活性 ,各组间有显著性差异 (P <0 .0 1 )。 (3)形态学分析表明 ,随时间延长 ,光密度与修复高度渐增 ,其中软骨移植组优于其他各组 (P <0 .0 1 )。 (4)随时间延长修复效果逐渐改善。小创面修复效果与中等创面间无明显差异。 (5)电镜观察表明 ,两种手术方法均有软骨细胞生成 ,细胞器发达。对照组符合纤维肉芽组织特征。结论 :(1 )软骨移植、钻孔均能以类透明软骨的结局修复关节软骨缺损 ,软骨细胞生物学特性类似     

七龙天对低氧性肺动脉高压大鼠 IL-1β、TNF-α的影响

目的观察七龙天对低氧性肺动脉高压(HPH)大鼠白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因-α(TNF-α)的影响。方法将雄性SD大鼠随机分为6组:正常组、模型组、波生坦组、七龙天低剂量组、七龙天中剂量组、七龙天高剂量组。正常组大鼠置于正常环境中饲养,除正常组外所有实验大鼠均采用常压低氧法制模,从制模第1天始给药,连续3周。在直视下行右心导管术测定肺血流动力学参数,以RT-PCR法检测肺组织中IL-1β、TNF-α的mRNA表达及免疫组织化学技术检测IL-1β、TNF-α在肺小动脉内膜中的蛋白表达。结果七龙天及波生坦组均可明显降低大鼠肺动脉高压,且以七龙天高剂量组效果为佳,疗效呈药物剂量依赖表现。与正常组比较,各组的IL-1β、TNF-α表达水平(包括mRNA及蛋白)均有所增加,尤以模型组、波生坦组呈非常显著性差异(P0.01);与模型组比较,波生坦组无显著性差异(P0.05),七龙天各组可明显下调IL-1β、TNF-α表达水平(P0.01或P0.05),以七龙天高、中剂量组更为显著(P0.01或P0.05)。结论不同剂量七龙天均可降低肺动脉高压,且高剂量七龙天疗效优于波生坦。其降压机制与降低IL-1β及TNF-α表达量有关,但仍可能受其他血管张力因子及血管新生因子影响。     

扶正化痰活血方对2型糖尿病模型大鼠胰岛素抵抗的影响

目的：观察扶正化痰活血方对2型糖尿病模型大鼠的降血糖作用和对胰岛素抵抗相关指标的改善作用，并初步探讨其作用机制。方法：以链脲佐菌素加高脂饮食造成2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠模型，观察扶正化痰活血方对大鼠空腹血糖（FBG）、糖化血红蛋白（HBAlC）、血胰岛素含量（FINS）以及胰岛素样生长因子-1（IGF-1）的影响，并计算胰岛素敏感指数和胰岛素抵抗指数。结果：扶正化痰活血方不仅可明显降低糖尿病大鼠FBG及HBAlC，还可以降低FINS水平，升高IGF-1含量，使胰岛素敏感指数升高。结论：扶正化痰活血方具有较好的降血糖、升高胰岛素样生长因子-1含量、改善胰岛素抵抗、防治糖尿病并发症的作用。