川芎提取物的分离及其对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的药理作用

目的 评价采用大孔树脂方法分离的10种川芎组分对大鼠心肌缺血/再灌注损伤（myocardialischemia/reperfusion injury,I/R）后血栓形成、血小板功能和血管内皮因子的药理作用。方法 川芎饮片采用水提取后醇沉方法,分别采用大孔树脂分离和高速逆流色谱法分离得到10种不同的川芎组分。清洁级Wistar大鼠,♀♂各半,采用（按0.009 mL·g^-1体质量腹腔注射4%水合氯醛麻醉）结扎冠状动脉左前降支建立I/R模型。于结扎成功后（心电图显示）10 min时大鼠股静脉分别注射实验用药,川芎组分给药剂量为20 mg·kg^-1;阳性对照组给予川芎嗪（盐酸四甲基吡嗪二水化合物）,给药剂量为20 mg·kg^-1;假手术组和模型组给予等量生理盐水,每组10只。于缺血40 min再灌注120 min时取血,测定体外血栓形成的长度、湿重和干重,全血分离后放射免疫测定血浆内皮素-1含量,硝酸盐还原法测定血浆一氧化氮（NO）含量,比浊法测定血小板最大聚集率。结果 与假手术组比较,模型组的血栓长度、湿重和干重均明显增加（P<0.05或P<0.01）;与模型组比较,川芎组分②、③、⑤号组对血栓长度、湿重和干重均有不同程度的降低（P<0.05或P<0.01）。血管内皮因子和血小板聚集的结果表明,与假手术组比较,模型组内皮素-1水平明显上升（P<0.01）,NO水平有降低趋势;与模型组比较,川芎组分⑤、⑥、⑧和⑩号组对大鼠血浆内皮素-1水平具有显著降低作用（P<0.05或P<0.01）,对大鼠NO水平具有显著升高作用（P<0.05或P<0.01）;川芎组分①至⑩号组均有显著降低大鼠血小板聚集率的作用（P<0.01）。结论 通过HPLC和高速逆流色谱仪建立的川芎全组分指纹图谱具有良好的对应性,分离的川芎提取物的药理作用具有差异性且作用靶点不同,具有开发新产品的药效特征和研究的示范性。     

丹参-川芎水提取物有效组分配伍对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的影响

目的 观察丹参-川芎水提取物有效组分配伍的注射液对大鼠心肌缺血/再灌注(I/R)损伤的影响.方法 将SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、模型组、冠心宁组及丹参-川芎低、高剂量组,每组10只.采用结扎冠状动脉左前降支建立I/R损伤模型.于结扎成功后10 min股静脉注射给药,其中冠心宁组给予冠心宁注射液含生药2.88 g/kg,丹参-川芎低、高剂量组分别给予丹参-川芎水提取物有效组分注射液含生药2.43 g/kg和4.86 g/kg;假手术组和模型组给予等量生理盐水.于缺血40 min、再灌注120 min取血后处死动物,测定血中肌钙蛋白T(cTnT)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、6-酮-前列腺素F_(1a)(6-keto-PGF_(1a))、血栓素B_2(TXB_2)含量和血小板最大聚集率,并且测定心肌梗死程度.结果 丹参-川芎低、高剂量组心肌梗死面积((23.0±3.8)%、(20.8±4.7)%]较模型组[(29.1±3.2)%]显著降低(P＜0.05和P＜0.01);cTnT[(0.78±0.29)mg/L、(0.76±0.29)mg/L]和CK-MB[(891.5±252.5)U/L、(759.5±191.3)U/L]也较模型组[(1.04±0.14)mg/L,(1 268.2±256.5)U/L]显著降低(均P＜0.05),丹参-川芎高剂量组6-keto-PGF_(1a)较模型组升高[(206.7±35.6)ng/L比(138.6±28.9)ng/L,P＜0.05],血小板最大聚集率较模型组降低[(49.4±9.3)%比(77.1±16.7)%,P＜0.05].结论 丹参-川芎水提取物有效组分配伍可减小心肌梗死面积,降低I/R后cTnT、CK-MB含量,提高6-keto-PGF_(1a)/TXB_2比值,从而减轻心肌I/R损伤.     

AngⅡ/NLRP3炎性小体信号通路介导高血压大鼠血管老化的机制

目的 通过观察自发性高血压大鼠(SHR)与对照组大鼠血管紧张素(Ang)Ⅱ/核苷酸结合寡聚结构域样受体蛋白(NLRP)3炎性小体信号通路指标的不同表达，探讨高血压(HTN)对血管老化(VA)影响的可能机制。方法 实验分为Wistar对照组(4周龄)、SHR模型组(12周龄)和WKY对照组(12周龄),体质量180～200 g,正常饲料喂食，持续8 w。尾袖法记录血压；胸主动脉和主动脉弓取材，进行苏木素-伊红(HE)和Masson染色，光镜下观察主动脉病理形态和血管胶原纤维变化；取胸主动脉进行Ca²⁺/Mg²⁺ ATP、Na⁺/K⁺ ATP的酶活性检测；Western印迹检测各组血管组织AngⅡ、NLRP3、平滑肌(SM)22α、基质金属蛋白酶(MMP)-9、MMP抑制因子(TIMP)-1、质膜Ca²⁺-ATP酶(PMCA)3的蛋白表达。结果 HE和Masson染色显示，Wistar对照组胸主动脉及主动脉弓外膜结构清楚，中膜平滑肌细胞排列规整，内膜较薄；WKY对照组胸主动脉及主动...     

基于网络药理学和分子对接探讨苓桂剂治疗射血分数保留的心力衰竭的机制和优势

目的 运用网络药理学对苓桂术甘汤的加减方-苓桂气化方治疗射血分数保留的心力衰竭(heart failure with preserved ejection fraction, HFp EF)的作用机制进行探讨。方法 在中药系统药理学数据库及分析平台检索苓桂气化方内各味中药的有效成分和靶点信息,在Gene Card、OMIM、PharmGkb、TTD、DrugBank基因数据库中搜索HFp EF的相关基因,取药物和疾病的共同靶点构建“药物-成分-靶点”相互作用网络和蛋白质-蛋白质相互作用网络,同时,运用R语言进行基因本体论(gene ontology,GO)和京都基因和基因组百科全书(kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析。最后,对核心靶点和药物成分进行模拟分子对接,验证它们之间的紧密联系。结果 网络药理学分析结果表明苓桂气化方中包含58个有效成分,药物靶点与疾病靶点的交集有45个。GO和KEGG富集分析后得到苓桂气化方影响HFp EF主要涉及脂质和动脉粥样硬化、流体剪切应力和动脉粥样硬化、小细胞肺癌等途径。分子对接结果显示...     

参麻益智方对多发性脑梗塞致血管性认知障碍大鼠学习记忆和炎症因子及抗氧化作用的影响

目的观察参麻益智方(SMYZ)对多发性脑梗塞致血管性认知障碍(VCI)模型大鼠的学习记忆能力和血清炎症因子及氧化应激相关指标的影响。方法健康Wistar大鼠,采用微血栓栓塞法制备多发性脑梗塞模型,手术成功后筛选致认知障碍的大鼠随机分成5组:模型对照组,盐酸多奈哌齐组(0.45 mg·kg^-1),参麻益智方低、中、高剂量组(2.97、5.94、11.88 g·kg^-1)。另设空白对照组、假手术组,每组各10只。灌胃给药,模型对照组、空白对照组和假手术组给予等体积蒸馏水灌胃,连续灌胃8周后进行相关指标检测。采用Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力;HE染色法观察海马CA1区病理形态学改变;酶联免疫法测定大鼠血清炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;比色法检测谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量;非酶促免疫法检测谷胱甘肽过氧化物还原酶(GSH-PX)含量。结果与假手术组比较,模型对照组大鼠逃避潜伏期、总游泳路程、IL-1β、TNF-α含量、MDA含量均明显增加(P<0.01),穿越平台次数、目标象限路程占总路程百分比、目标象限时间占总时间百分比、GSH、SOD、GSH-PX含量均明显减少(P<0.05,P<0.01),海马CA1区发生明显病理形态学改变。与模型对照组比较,参麻益智方低、中、高剂量组大鼠逃避潜伏期、IL-1β含量均明显减少(P<0.05,P<0.01),SOD含量均明显增加(P<0.05,P<0.01),可改善海马CA1区的病理形态;参麻益智方中、高剂量组大鼠总游泳路程、TNF-α、MDA含量均明显减少(P<0.05,P<0.01),穿越平台次数、目标象限路程占总路程百分比、目标象限时间占总时间百分比、GSH、GSH-PX含量均明显增加(P<0.05,P<0.01)。结论参麻益智方对多发性脑梗塞致血管性认知障碍大鼠的学习记忆能力具有改善作用,并具有改善其海马组织的病理形态,抑制炎症反应,改善氧化应激状态的作用。     

苓桂气化方干预射血分数保留心力衰竭心肌纤维化的物质基础及分子机制

目的 探讨苓桂气化方干预射血分数保留心力衰竭（HFpEF）心肌纤维化的物质基础及分子机制。方法 采用液相色谱-质谱联用法（LC-MS）定性分析苓桂气化方的活性成分。使用AutoDock软件进行苓桂气化方的活性成分与目标蛋白α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、Ⅰ型胶原蛋白（ColⅠ）、Ⅲ型胶原蛋白（ColⅢ）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）及基质金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）之间的分子对接。进行体内实验：40只4周龄自发性高血压大鼠（SHR）平均分为HFpEF组、诺欣妥组（0.018 g·kg^-1）、苓桂低剂量组（3.87 g·kg^-1）及苓桂高剂量组（7.74 g·kg^-1），给予高脂、高盐及高糖饮食16周和腹腔注射链脲霉素溶液8周建立HFpEF大鼠模型。10只WKY大鼠和10只SHR大鼠作为空白组。造模成功后，WKY、SHR及HFpEF组给予等剂量生理盐水，其他3组按照预先规定的干预措施，每天灌胃1次，持续6周。干预结束后，行超声心动图测量左心室（LV）前壁厚度（LVAWd）、LV后壁厚度（LVPWd）、LV舒张末内径（LVIDd）、LV射血分数（LVEF）、等容舒张时间（IVRT）、LV舒张早期二尖瓣流入峰值速度（E）及LV舒张早期二尖瓣环运动速度（e''），并计算E/e''；采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清心房钠尿肽（ANP）、B型利钠肽（BNP）及半乳糖凝集素-3（Gal-3）；病理切片进行马松染色以观察心肌纤维化，并计算胶原体积分数（CVF）及血管周围纤维化比率（PFR）；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）及蛋白免疫印迹法（Western blot）检测LV心肌α-SMA、ColⅠ、ColⅢ、MMP-9、TIMP-1的mRNA及蛋白表达。结果 LC-MS鉴定出苓桂气化方含有13种活性成分。分子对接提示13种化合物能稳固地与5个靶蛋白结合。体内实验证实：与空白组比较，HFpEF组的LVAWd、LVPWd、LVIDd、IVRT、E/e''、ANP、BNP、Gal-3、CVF及PFR显著升高，LV心肌α-SMA、ColⅠ、ColⅢ mRNA表达及蛋白表达显著上调，MMP-9/TIMP-1 mRNA及蛋白比例明显下调（P<0.05，P<0.01）。与HFpEF组比较，苓桂气化方可能呈剂量依赖性减少LVAWd、LVPWd、LVIDd、IVRT、E/e''、ANP、BNP、Gal-3、CVF及PFR，下调心肌α-SMA、ColⅠ、ColⅢ mRNA表达及α-SMA和ColⅠ蛋白表达，并上调MMP-9/TIMP-1的mRNA及蛋白表达（P<0.05，P<0.01）。结论 苓桂气化方含有多种活性成分，可能抑制HFpEF大鼠的心肌纤维化，进一步减轻LV肥厚、扩大及舒张功能障碍，是治疗HFpEF的有效中药复方。