循环miR-152在多发性骨髓瘤中的表达与临床意义

目的检测mi R-152在多发性骨髓瘤(MM)患者血清中的表达水平,探讨其作为MM肿瘤标志物的潜在价值。方法以30例缺铁性贫血患者为相关疾病对照组,30例体检健康者为健康人对照组,40例初诊MM患者为MM组,提取各组血清RNA样本;实时荧光定量PCR检测各组血清mi R-152的表达水平;PCR扩增产物进行基因测序;ROC曲线分析其诊断MM的临床效能;Beckman Immage特种蛋白分析仪检测MM组血清Ig A、Ig G和Ig M浓度;采用Kaplan-Meier法分析mi R-152的表达水平与MM患者预后的关系。结果 MM组血清mi R-152的表达水平[1.40(0.90,2.24)]高于相关疾病对照组[1.07(0.60,1.63)]和健康人对照组[0.20(0.07,0.54)],差异有统计学意义(U分别为424.50和85.50,P均0.05);而MM患者治疗后[0.97(0.41,1.88)]较治疗前[1.66(1.15,2.42)]血清mi R-152表达水平明显降低(U=63.00,P=0.027);基因测序结果证实其为成熟mi R-152序列;血清mi R-152诊断MM的ROC曲线下面积(AUCROC)为0.79(95%CI:0.70~0.87,P0.05),当cut-off值为0.62时,其敏感性和特异性分别为90.00%、56.67%;血清mi R-152的表达与MM患者总体生存率有关(HR=4.36,95%CI:1.23~15.43,P=0.022);mi R-152的相对表达量与Ig A、Ig G和Ig M浓度总和呈正相关(r=0.39,P=0.012),而与Ig A、Ig G或Ig M浓度无明显相关性(r分别为0.30,-0.005和-0.18,P均0.05)。结论血清mi R-152在MM患者血清中的表达水平升高,可能会作为MM的鉴别诊断和预后的标志物。     

重组人BAFF对多发性骨髓瘤细胞BAFF-R表达调控的初步研究

目的 :研究多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)中重组人B淋巴细胞刺激因子(recombinant human B lymphocyte stimulator,rh BAFF)对其特异性受体(B lymphocyte stimulator receptor,BAFF-R)基因、蛋白水平表达的影响;并进一步研究重组人BAFF与JNK信号通路之间的作用与BAFF-R之间的关系。方法:应用RT-PCR、酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)、细胞免疫荧光技术检测BAFF-R在MM细胞KM3中的表达、功能及调节;Western Blot分析BAFF/BAFF-R对NF-κB信号通路的激活情况。结果:细胞免疫荧光结果显示BAFF-R定位在KM3细胞的细胞膜上;重组人BAFF(50 ng/m L)能够促进BAFF-R m RNA和蛋白的表达;可溶性BAFF(50 ng/m L)促进p-JNK表达的上调,且随作用时间的延长而增加。结论 :重组人BAFF对BAFF-R表达有重要的影响,JNK信号通路可能参与了MM的发生发展过程。     

结直肠癌患者血清游离DNA的表达及意义

目的:建立基于ALU序列的实时荧光定量PCR(ALU-q PCR)检测游离DNA浓度的方法,并探讨结直肠癌患者血清游离DNA定量检测的临床意义。方法:随机采集结直肠癌104例、结直肠息肉63例和正常人110例血清标本,采用ALU-q PCR方法定量检测血清ALU115表达水平;用化学发光方法检测肿瘤标志物CEA的水平。结果:(1)结直肠癌患者血清ALU115浓度中位数为1046.0 ng/m L,显著高于结直肠息肉组423.3 ng/m L和对照组385.4 ng/m L,差异有统计学意义(P均<0.001),结直肠息肉组和对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。(2)结直肠癌血清ALU115和CEA联合检测灵敏度、特异性、准确度、阳性预测值和阴性预测值分别是82.69%、99.09%、91.12%、98.85%和85.82%,两者联合检测提高结直肠癌诊断率。结论:基于ALU序列的实时荧光定量PCR是一种快速简便、灵敏度高及特异性好的检测方法。血清cf-DNA浓度对结直肠癌辅助诊断有一定的价值。     

利用虚拟实验室进行分子诊断实验教学的研究

根据目前分子诊断学实验教学中存在的问题,在传统实验教学中引入虚拟实验,利用其沉浸性、交互性和构想性的特点来营造仿真实验环境,感官综合刺激学生,使学生获得视听摸等多种直观而自然的实时感知。在实践中能够弥补现有实验教学条件的不足且多角度呈现教学内容,突破时空限制模拟真实世界中难以观察和控制的过程和现象。在虚拟实验室中通过选择合适的教学素材,虚实结合地安排实验内容,在提高学生的学习积极性和实验教学质量方面取得显著效果。     

长链非编码RNA在肝癌中的研究进展

长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是一类转录本长度超过200个核苷酸、少有或无蛋白质编码功能的RNA分子。lncRNA在表观遗传学水平、转录水平和转录后水平调控基因表达,广泛参与机体的生理和病理过程;并与物种进化、胚胎发育、代谢调节以及肿瘤发生、发展密切相关。本文对lncRNA在肝癌中的最新研究进展作一综述,以期为肝癌临床诊断与治疗提供新的思路。     

多发性骨髓瘤中BAFF-R表达及其对细胞存活影响的研究

目的 研究多发性骨髓瘤（MM）中B淋巴细胞刺激因子受体（BAFF-R）基因、蛋白表达水平;并进一步研究BAFFR对MM细胞生长存活的影响.方法 应用RT-PCR,ELISA,Western Blot等技术检测BAFF-R在MM细胞中的表达;WST-1,TUNEL凋亡实验,Western Blot检测BAFF-R对MM细胞增殖、凋亡的影响.结果 BAFF-R mRNA和蛋白表达于MM细胞中;与对照组相比,BAFF-R阻断性抗体（1,5,15 μg/ml）可抑制KM3细胞增殖,t值分别为79.78,72.21,76.88;P值均为0.000,即BAFF-R促进KM3细胞增殖;同时,BAFF-R阻断性抗体组（15 μg/ml）细胞凋亡明显高于对照IgG组;BAFF-R阻断性抗体组抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低18％,促凋亡蛋白Bax表达增加43％,说明BAFF-R能够抑制MM细胞凋亡.结论 BAFF-R对MM细胞生长存活有一定影响,BAFF-R对多发性骨髓瘤的发生发展发挥一定作用.     

血清胱抑素C的浓度在评价肾小球滤过功能中的价值

目的探讨血清胱抑素C(CystatinC,CysC)的浓度在判断肾小球滤过功能中的价值。方法对117例患者分别用免疫透射比浊法测定血清CysC的浓度及用酶法测定血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)浓度,根据CockCroft-Gault公式计算内生肌酐清除率(Ccr);依据Ccr分组比较。结果随着Ccr下降,血清CysC、BUN、Scr均值逐渐升高(P<0.01),血清CysC与Ccr之间呈负相关(r=-0.486,P<0.01),血清CysC与Scr之间呈正相关(r=0.857,P<0.01)。A组25例患者中血清CysC的浓度异常者占24%,Scr的浓度异常者为0;B组56例患者中血清CysC的浓度异常者占60.7%,Scr的浓度异常者14.2%;C组28例患者血清CysC的浓度异常者占78.5%,Scr的浓度异常者46.4%;D组二者的浓度异常者均为100%。结论测定血清胱抑素C的浓度用来评价肾小球滤过功能是一种可行、可靠、敏感的指标,对预测早期肾损害迅速准确,值得临床推广应用。     

不同检测系统测定血糖的方法学对比及偏差评估

目的通过对不同检测系统进行方法学比对分析，探讨各系统之间检测血糖结果是否具有可比性。方法依据美国国家临床实验室标准委员会（NCCLS）EP9-A文件要求，每天随机从临床样本中抽取8份不同浓度的血清样本，分别用两种检测系统进行血糖的测定，共测定5d，记录检测结果，对两种检测系统进行偏倚估计。结果相关系数r=0．998，截距a=0.081，斜率b=0.968，无方法间、内的离群点，测定结果的偏差在允许误差范围内。结论两种检测系统对血糖的测定能得到一致的检测结果。