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目的:构建人HIF-1α基因的shRNA慢病毒载体、包装生产重组慢病毒颗粒,病毒途径高效感染胃癌细胞株BGC-823,并验证基因沉默效率。方法:在NCBI数据查找人HIF-1α基因序列,然后使用siRNA在线设计软件,设计针对基因CDS区的3条siRNA序列及Negative序列。根据设计好的siRNA序列设计双链互补的shRNA-Oligo DNA,退火形成双链后与线性化载体链接,构建shRNA重组表达载体。经由293TN细胞包装shRNA重组慢病毒颗粒,随后使用重组病毒感染BGC-823,通过荧光标记蛋白GFP确定感染效率后收集细胞样本,分别采用Real-time PCR和Western blot方法检测靶基因在mRNA和蛋白质水平的沉默效率。结果:shRNA重组表达载体测序结果与设计序列完全一致,包装病毒后滴度达到1×104 ifu/μL。慢病毒感染BGC-823细胞取得了极高的基因转导效率。mRNA检测结果显示,siRNA3对于对与目的基因的沉默效果最好,较阴性对照序列组相比较,mRNA的表达量下降了92%,Western blot检测的结果与mRNA检测结果完全相符合。结论:通过慢病毒途径,可以在BGC-823细胞中高效的进行HIF-1α基因的沉默。 相似文献
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电气工程自动化工程控制系统是发展现代工业的方向和标志,处于现代科技领域的中心地位。电气自动化工程在发展过程中可以推动社会的进步和经济全面发展,这就需要将电气自动化和科学技术紧密结合在一起。该文介绍电气工程自动化工程控制体系的发展现状,分析现阶段存在的问题,并研究解决问题、促进发展的对策,希望能够对行业进步和企业人才培养提供一些帮助。 相似文献
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在推广的手征SU(3)夸克模型下,研究了带有一个奇异夸克的双重子态Σ*Δ(ST=052)和Σ*Δ(ST=312)的结构.结果表明,尽管手征SU(3)夸克模型和推广手征SU(3)夸克模型短程力的机制完全不同,但两种模型下给出的定性结果是一样的,即这两个双重子态都是束缚态,能量在Σ*Δ道之下却在ΛπΔ道之上.在推广手征SU(3)夸克模型下,Σ*Δ(ST=312)态的结合能比Σ*Δ(ST=052)态的结合能大. 相似文献
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在中年知识分子中广泛开展太极拳运动的探析 总被引:1,自引:0,他引:1
随着现代社会生活节奏的加快导致生活压力增大,本文通过对在中年知识分子中广泛开展太极拳运动的必要性和可行性进行探析,希望太极拳运动能帮助中年知识分子减轻压力,拥有健康的身体和心理,为社会做出更多贡献. 相似文献
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为探讨食源性成分降低丙烯酰胺及主要致毒代谢物环氧丙酰胺对人体的危害作用,利用比色法、酶活性检测及免疫分析等方法,从细胞谷胱甘肽及其相关酶解毒的角度,研究了不同浓度的矢车菊素-3-葡萄糖苷对环氧丙酰胺引起的人类乳癌细胞MDA-MB-231毒性的影响. 结果表明,与环氧丙酰胺单独处理的细胞相比,矢车菊素-3-葡萄糖苷预处理后,能够显著降低细胞毒性及胞内活性氧水平,明显提高细胞内还原型谷胱甘肽含量,抑制谷胱甘肽过氧化物酶与谷胱甘肽S转移酶活性的升高,并且提高两种酶的蛋白表达量. 矢车菊素-3-葡萄糖苷对环氧丙酰胺引起的MDA-MB-231细胞毒性具有明显的抑制作用. 相似文献
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以某厂压力变送器的生产为应用研究背景,分析生产工序瓶颈,提出并实现了可优化变送器生产调度问题的分步分层遗传算法。首先构建了车间生产的数学模型,并根据传感器部件的量程分类分别进行种群初始化,然后采用哈希除去余数法进行插入整合,再基于工序和订单数量的标识编码方式进行分层分步遗传算法优化。仿真分析证明该算法不但降低了开放式车间的排产复杂度,而且相对于原先基于整体订单先交货先生产的排产策略,减少生产时间,提高了生产效率。 相似文献
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以教师为主导、学生为主体的教学思想受到越来越多的关注,教师支持性反馈语便是该理念指导下的一种有效的教学策略。本研究对教师支持性反馈语的主要类型进行了归纳,并分析了不同类型支持性反馈语对学生认知和情感等方面产生的作用。同时,本研究就如何有效地运用教师支持性反馈语策略展开了初步探讨。 相似文献
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运用伪三元相图法和星点设计效应面法筛选最佳载药微乳处方,将其制备噻吗洛尔微乳凝胶,方便血管瘤患儿的经皮给药.采用手工滴加法制备各处方微乳,根据伪三元相图各微乳区面积大小初步筛选处方.然后根据处方各相形成微乳时的用量范围设计星点实验,以油相、表面活性剂、Km为自变量,载药量为响应值,拟合非线性回归方程并建立效应面模型,经过数据分析得到最佳载药处方.随后将凝胶基质加入噻吗洛尔微乳中充分溶胀,即得噻吗洛尔微乳凝胶.最佳处方(质量百分数)为30%油酸,24%Span80/Tween80,无水乙醇:30%,水:15.5%,噻吗洛尔:0.5%,所需凝胶基质卡波姆940的最佳用量为8.3%.最优处方制得的噻吗洛尔微乳凝胶呈淡黄色透明半固体状,质地均匀细腻,黏度适中,便于婴幼儿血管瘤的局部给药. 相似文献
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无人值守的无线传感器网络在严酷环境中易大规模损坏,节点数据无法传输给 Sink节点,造成网络不可用。为解决该问题,借助移动数据收集器,设计了一种基于移动协助方式的网络连通性恢复方案。该方案将剩余可用节点通过 FCM聚类算法大致分为K个集群,在确保集群内部正常通信的情况下,运用 Dijkstra 算法最小化移动数据收集器的移动长度,从而实现移动路径最优条件下的网络连通性恢复。在含有100个节点的无线传感器网络上进行仿真验证,结果表明所设计的方案是有效的。 相似文献