应用基因芯片技术对一近亲婚配耳聋家系致聋机制的分析

目的:在DNA水平上对一个非综合征型耳聋家系进行耳聋易感基因的突变筛查,确定家系成员的致病基因及分型。方法:收集家系成员外周血,提取DNA进行等位基因多重PCR,基因芯片杂交筛查GJB2、GJB3、PDS和mtDNA 12SRNA基因突变,DNA测序验证基因芯片结果。结果:先证者为GJB2基因235delC和299-300delAT复合杂合,其父母分别为GJB2基因235delC和299-300delAT纯合突变基因型,父系亲属中耳聋者均为299-300delAT纯合突变基因型,听力正常成员为杂合基因型,该致病基因来源于近亲婚配祖父母。结论:GJB2基因突变是导致该家系发生耳聋的致病因素,耳聋基因芯片检测是确定遗传性聋病因的必要手段。     

喉鳞状细胞癌伴甲状腺乳头状癌1例

患者,男,55岁。因发现颈部肿物2年,声音嘶哑2个月,呼吸困难1个月于2009年10月22日入院。吸烟、饮酒史20年。否认放射物质接触史及甲状腺癌家族史。入院体检:颈前偏右可触及一大小约3cm×3cm×2cm的肿物,无压痛,质韧,表面光滑,可移动。甲状腺右叶可触及一肿物,大小     

喉黏液表皮样癌1例

腺癌、腺样囊性癌和黏液表皮样癌是最常见的喉的源发于腺体的恶性肿瘤[1].最常见的部位是室带、喉室和前连合.黏液表皮样癌是1924年由Masson等在形容腮腺恶性肿瘤时第1次提出的.一般这种肿瘤由3种细胞构成:鳞状细胞、黏液细胞和间质细胞.黏液表皮样癌最常见的发生部位是大的涎腺,而发生于喉部的很少见.     

应用微阵列芯片分析喉鳞状细胞癌miRNA与正常黏膜表达差异的初步研究

目的:运用微阵列芯片技术研究喉鳞状细胞癌及癌旁正常黏膜中miRNA表达谱差异,探讨miRNA与喉癌发病的关系.方法:提取8例喉癌患者的癌组织及其对应癌旁正常黏膜中的miRNA,分别与哺乳动物miRNA芯片V3.0杂交,扫描荧光信号,对癌组织、正常黏膜进行差异基因筛选和聚类分析;采用实时定量RT-PCR法验证部分差异表达的miRNA.结果:共筛选出47个喉癌相关的差异表达miRNAs基因:24个在喉癌组织中表达下调,23个表达上调.其中下调5倍以上的有miR-1,miR-486-5p,miR-206, miR-487a, miR-375, miR-422a, miR-144, miR-384, miR-378, miR-133a;表达上调3倍以上的是miR-93,miR-31和miR-20b.在喉癌差异表达的miRNA中有13个成5簇共表达,分别位于8,13,14,18和X染色体上.荧光定量RT-PCR结果与miRNAs芯片的结果较符合.结论:一些miRNA可能参与喉癌的发生的调控.     

Toll样受体4信号途径在大鼠中耳积液中的表达

目的探讨Toll样受体4（Toll like receptor 4,TLR4）信号途径在中耳积液大鼠的作用机制。方法采用听泡内注入纤维蛋白封闭剂和脂多糖制作大鼠中耳积液模型。分别于3、5、7、9、11、13天处死大鼠,每次5只。取中耳黏膜检测TLR4、诱生型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）、白细胞介素8（interleukin-8,IL-8）mRNA的表达;免疫组化检测核因子κB（nuclear factor kappa B,NF-κB）表达情况。结果对照组中耳黏膜内有少量的TLR4、iNOS和IL-8mRNA的表达,中耳积液时表达量明显增高（P〈0.05）。免疫组化检测显示大鼠中耳黏膜内NF-κBp65的表达在中耳积液时明显提高。结论中耳积液时TLR4表达明显升高,并伴有NF-κB活化,促进下游IL-8等的表达,可能是引发大鼠分泌性中耳炎的机制之一。     

26例喉鳞状细胞癌微卫星不稳定性及杂合性丢失研究

[目的]在喉癌易感染色体区域8p23.2、9p21.1、3p24.3筛查肿瘤相关基因,探讨CSMD1基因与喉鳞癌的相关性.[方法]在8p23.2、9p21.1、3p24.3区域选择D8S518、D8S264、D9S251、D3S2303四个微卫星多态性标记,应用聚合酶链反应(PCR)-变性聚丙烯酰胺凝胶电泳-银染法对26例喉鳞癌进行微卫星不稳定性及杂合性丢失分析.[结果]4个多态性标记中的3个有不同程度的微卫星不稳定性及杂合性丢失.其中D9S251位点MSI检出率为19%.D8S518位点LOH发生率为5%,MSI的发生率为10%,总的突变率为15%.D8S264位点MSI发生率为9.5%.[结论]8p23.2、9p21.1区域可能存在与喉鳞癌发生有关的基因,CSMD1基因可能是一个与喉鳞癌有关的抑癌基因.     

中耳胆脂瘤基质金属蛋白酶抑制剂表达

中耳胆脂瘤对颞骨的溶骨性破坏是胆脂瘤型中耳炎最重要的临床特征和病理生理学过程。尽管胆脂瘤骨质破坏的确切机理尚未完全清楚,但基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases,MMPs）及其抑制剂（tissue inhibitor of metalloproteinases,TIMPs）在胆脂瘤型中耳炎骨质破坏机制中所起的重要作用日益受到人们的关注。     

正常青年人听力学检查的参考值范围

目的：确定听力室各项听力学检查的参考值范围。 方法：选100名正常青年受试者,计200耳进行纯音测听、高频测听、声导抗及ABR检查。 结果：纯音听阈（dB HL）0.5、1.0、2.0和4.0 kHz 95%参考值范围分别为9.22~23.68、8.01~20.25、7.76~20.94和6.55~21.17;高频听阈（dB SPL）8.0、10.0、12.5和16.0 kHz 95%参考值范围分别为5.92~14.08、15.06~26.94、28.03~40.97和47.25~62.25;刺激声Click 100 dB nHL时ABRⅠ、Ⅲ、Ⅴ波及Ⅰ-Ⅴ潜伏期均值（ms）95%参考值范围分别为1.39~1.59、3.41~3.91、5.28~5.62和3.81~4.09;声导抗反射阈值（dB HL）0.5、1.0、2.0和4.0 kHz同侧反射阈95%参考值范围分别为95.36~107.64、93.18~105.82、101.41~110.59和91.21~105.79,对侧反射阈95%参考值范围分别为88.18~102.82、87.24~94.76、86.66~92.34和80.25~93.75。 结论：正常青年人听力学检查参考范围可作为临床听力学检查判定正常与异常的参考标准。     

抑癌基因PTEN单核苷酸多态性与喉癌的关系

目的：探讨抑癌基因PTEN单核苷酸多态性与中国北方汉族人群喉癌的关系。方法：采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）方法,检测149例喉癌患者（病例组）和104名健康者（对照组）的PTEN基因rs1903858和rs701848位点的基因型,应用SPSS 10.0分析PTEN的基因多态性与喉癌的关系。结果：PTEN基因rs1903858和rs701848位点的基因型频数分布在病例组和对照组均符合Hardy-Weinberg平衡定律(P>0.05);病例组rs1903858和rs701848两个SNPs等位基因及基因型的频数分布与对照组比较差异均无显著性（P>0.05）。结论：PTEN基因的rs2735343和rs701848基因多态性可能与中国北方汉族人群喉癌的发生无关。     

基质金属蛋白酶-2及其抑制剂和白细胞介素-6在中耳胆脂瘤的表达及意义

目的研究基质金属蛋白酶-2（matrix metalloproteinase-2,MMP-2）及其抑制剂（tissue inhibitor of metalloproteinase, TIMP-2）和白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）在中耳胆脂瘤中的表达,探讨其表达在胆脂瘤溶骨机制中的作用.方法应用免疫组化技术检测32例患者中耳胆脂瘤组织和10例正常人外耳道皮肤组织中MMP-2、 TIMP-2和IL-6的表达.结果 MMP-2在胆脂瘤上皮各层细胞中均有表达,基底层表达最强,棘层次之,颗粒层及角质层细胞表达较弱;TIMP-2在基底细胞层和棘细胞层有少量表达;IL-6的表达分布于胆脂瘤上皮全层,但在基底层细胞表达最弱,棘细胞层、颗粒层和角质层依次递增,染色最强的部位是颗粒层和角质层,而正常外耳道皮肤未见MMP-2、 TIMP-2、IL-6的表达.结论在胆脂瘤组织中存在MMP-2与TIMP-2的表达失衡,导致胆脂瘤的骨质破坏.同时胆脂瘤上皮高表达IL-6可能是MMPs过表达的原因.