人BLys 78-285的高效表达、纯化及功能鉴定

目的 克隆人B淋巴细胞刺激因子(B-lymphocyte stimulator,BLyS)胞外区cDNA,并行高效表达、纯化及功能鉴定。方法 提取 HL-60细胞总RNA,经RT-PCR扩增编码人 BLyS胞外区 78-285氨基酸 cDNA,行序列测定后,构建高效原核表达载体pQE-80L,经 IPTG诱导表达及 Ni-NTA层析纯化,SDS-PAGE和 Wester blot检测活性。结果 RT-PCR扩增得到627bp的DNA片段,序列分析与CenBank中报道的编码BLyS 78-285的cDNA序列一致,并在大肠杆菌中得到高效表达,纯化后纯度可达95％,并能刺激B淋巴细胞增殖。结论 成功克隆人 BLyS胞外区cD-NA,并获得了高效表达,纯化产物具有生物学活性,为进一步研究奠定了基础。     

浅谈化工滴定分析教学

化工分析的主要任务是定量分析,滴定分析又是定量分析的基础和重点。化工专业的学生今后要从事化工生产的原料分析、中间控制、质量检     

美国现代化进程中对传统价值观念的反叛和回归

起源于英国的清教主义（Puritanism）在北美殖民地得以实践和发展,并对美国产生了巨大影响。清教的天职思想（theidea of calling）、山巅之城（a city upon a hill）、因信称义（justification by gmcetllrough faith）等核心理念在美国人的工作观、成功观及个人主义取向上表现得淋漓尽致。随着美国现代化进程的推进,传统的清教价值观念在20世纪受到不同程度的挑战：20年代“迷惘的一代”,50、60年代“反叛的一代”以各种方式挑衅着美国传统的清教价值观念。但在貌似反叛的背后其实是一种对传统价值观念艰难的守卫与奋力的回归。这样的努力集中体现在70年代节制的生活方式及80、90年代“回归的一代”身上。不论美国现代化进程对美国传统价值观念有多大的冲击,都不会动摇其在美国历史发展中的重要地位,也不会消弭其在美国人心中的深远影响,因为美国传统价值观念是美国立国的基础,铸就了美国的民族特性,成就了美国的现代化。     

重庆市主城区大型公共体育设施布局存在的问题及原因分析

运用实地调研和专家访谈法,对重庆九大主城区的大型公共体育设施的布局进行分析。分析指出主城区场馆缺失,布局不符合赛事和项目要求,空间布局不均衡等问题乃体制影响,政府宏观规划不周和城市建设部门要求不严,相关法律法规不完善,土地不足等原因所致。     

空调风机单相永磁同步电动机起动过程仿真研究

针对空调室外机风机叶片惯量导致单相永磁同步电动机起动困难的问题,在建立永磁单相同步电动机数学模型和仿真模型的基础上进行仿真分析,研究了不同参数对单相永磁同步电动机起动过程的影响,为空调风机单相永磁同步电动机电磁设计提供了依据.     

基于“U”形转子空调风机单相永磁同步电动机

研究一种"U"形转子的空调风机单相永磁同步电动机,通过合理设计,使得单相永磁同步电动机与同容量的单相异步电动机的材料成本基本相同,效率大幅提高,实现了电机的高性价比.     

水平井分段均衡开采工艺管柱的研制

针对水平井开采过程中水平段动用不均衡的问题,开展水平井分段均衡开采工艺技术研究。详述水平井分段均衡开采工艺技术的设计思路、结构原理,以及技术的核心配套工具——分流装置的工作原理、室内实验等。该技术通过分采泵配合分流器shunt、插封分流开关、双向皮碗封隔器等组合成水平井分段均衡开采工艺管柱,通过选用不同型号分采泵、控制进泵前不同水平段油流通道,实现了对上下两水平段的均衡开采,充分发挥各水平段的潜力。     

基于改进的AdaBoost和支持向量机的行人检测

针对AdaBoost算法在训练样本和特征较多时训练时间过长的问题,提出了一种改进的AdaBoot算法与支持向量机组合的分类器.对多重分类器的输出结果以非线性的方式组合,采用交替的方式轮流对不同的特征进行学习,将多重分类器处理完后的结果作为另一种输入样本,再以一个分类器做一次分类.实验表明该算法用于行人检测可行、性能稳定.     

基于灰度标准差的光流模型的步态识别算法

步态识别主要是通过人体走路的姿势来识别人的身份.提出了一种改进的光流法和隐马可夫模型相结合的技术,使用背景减除和阈值化为目标和背景图像建立模型,由使用灰度标准差筛选的光流法模型提取每一个运动目标的特征,取得时间序列的特征向量,把特征量化和状态分类的结果交给隐马可夫模型来判断运动目标的姿态.仿真实验表明,本算法识别率高,速度快.     

人sΔBAFF的高效原核表达及纯化

目的克隆TNF家族B细胞激活因子(BcellactivatingfactortotheTNFfamily,BAFF)胞外区134~285(sBAFF134-285)氨基酸残基段缺失突变体(sΔBAFF)的cDNA,并进行表达及纯化。方法以构建的重组质粒pUC19/sBAFF为模板,采用一步反向PCR法,扩增缺失编码sBAFF的142~160位氨基酸的核苷酸序列。经测序证实后,克隆入原核表达载体pQE-80L。经IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Westernblot检测表达产物,Ni2+-NTA柱层析纯化目的蛋白。结果经一步反向PCR扩增后得到401bp的DNA片段,该片段序列与GenBank报道的编码人ΔBAFF的胞外区(sΔBAFF)cDNA序列一致。含sΔBAFF的表达载体在大肠杆菌中可表达出相对分子质量为18000的蛋白质并以包涵体的形式存在,经Ni2+-NTA柱层析纯化后得到高纯度的目的蛋白。结论已成功地制备出人sΔBAFF蛋白,为其功能的研究创造了条件。