LC-MS/MS法检测猪内脏和肌肉中N-乙酰神经氨酸、N-羟乙酰氨酸和脱氨神经氨酸浓度的研究

目的:建立液相色谱-三重四级杆质谱联用法(LC-MS/MS)测定猪内脏和肌肉组织中唾液酸N-乙酰神经氨酸(Neu5Ac)、N-羟乙酰神经氨酸(Neu5Gc)和脱氨神经氨酸(KDN)浓度的分析方法。方法:将内脏肉组织匀浆后,利用三氟乙酸(TFA)将结合态的唾液酸从糖脂或糖蛋白链上解离下来后进样分析。色谱条件:色谱柱为ZORBAX Eclipse Plus C18(5μm,4.6×250 mm,Waters),流动相为0.1%醋酸铵-100%乙腈(9:1),柱温:25℃,流速800μL·min~(-1),进样量20μL。质谱条件:离子源为电喷雾化离子源(ESI),扫描方式为多重反应监测(MRM),监测离子对:Neu5Ac:307.7→87.0,Neu5Gc:323.3→116.0,KDN:266.7→87.0,13C3Neu5Ac内标品:310.9→90.0。结果:Neu5Ac、Neu5Gc和KDN分别在0.1~20.0、0.05~10.00和0.005~1.000μmol·L~(-1)的浓度范围内和对照品与内标峰面积比值线性关系良好,重复性平均RSD为1.2%,稳定性平均RSD为1.9%,日间和日内精密度试验RSD均小于6.7%,平均回收率为92.9~106.4%。结论:本方法简便、快速、灵敏度高,可广泛运用于组织和体液中唾液酸的测定。     

氯雷他定联合布地奈德鼻喷剂治疗过敏性鼻炎的疗效及对Th1/Th2细胞因子的影响

目的:探究氯雷他定联合布地奈德鼻喷剂治疗过敏性鼻炎的临床疗效及对Th1/Th2细胞因子的影响。方法:选取我院2016年1月至2017年1月收治的过敏性鼻炎患者110例,按随机数字法分为实验组与对照组,两组均为55例。对照组的治疗方法为采用氯雷他定,实验组治疗则在对照组的基础上联合布地奈德鼻喷剂,30 d为一个疗程。对比两组患者治疗30d后的临床疗效、症状缓解时间和不良反应情况,以及治疗前、治疗30 d后Th1/Th2细胞因子白介素-4(IL-4)、γ-干扰素(IFN-γ)的表达水平。结果:治疗30 d后的总有效率,实验组显著高于对照组(P0.05),实验组喷嚏、流涕、鼻痒症状缓解时间显著短于对照组(P0.05),两组疲劳感、肠胃不适、头痛、皮疹发生率比较无统计学差异(P0.05);治疗30d后两组IL-4表达水平显著低于治疗前(P0.05),IFN-γ表达水平显著高于治疗前(P0.05),实验组IL-4表达水平显著低于对照组(P0.05),IFN-γ表达水平显著高于对照组(P0.05)。结论:氯雷他定联合布地奈德鼻喷剂治疗过敏性鼻炎疗效较好,可显著改善患者临床症状,增强患者免疫功能,安全性较好,值得临床推广。     

饲料中维生素和无机rBmNPV-Bm表达系统植酸酶基因表达活性的影响

【目的】为查明宿主的营养对重组家蚕杆状病毒家蚕表达系统（rBmNPV-Bm）外源基因表达活性的影响,探寻提高家蚕Bombyx mori生物反应器产率的新途径。【方法】以家蚕BmNPV病毒为表达载体,以人工饲料饲养的5龄家蚕为宿主,以植酸酶基因为报告基因,探讨了家蚕人工饲料中维生素和无机盐对外源基因表达产物活性的影响。【结果】家蚕血淋巴中外源植酸酶的活性随着饲料中维生素和无机盐添加量的不同而发生显著变化。在本试验设区范围内,当维生素C的含量为饲料干物质量的1％,B族维生素混合物为0.25％,无机盐混合物为1％,维生素B₆为100 g饲料干物中含2 mg时,血淋巴中植酸酶活性达到最大值。【结论】通过改变家蚕饲料中微量营养成分的含量是提高rBmNPV-Bm表达系统外源基因表达活性的有效途径。     

随机RNA库筛选技术的发展与展望

随着分子生物学的发展，人们对体外分子进化有了进一步认识，把组合化学策略与模拟进化思想结合起来，构建了由各种各样合成分子组成的数目庞大的组合库（包括多肽、氨基酸、蛋白质、寡核苷酸），这些组合库的构建及筛选不仅适合于筛选药物先导化合物，而且适用于研究、诊...