真核表达载体pIRES2-EGFP-p93的构建及在卵巢癌细胞HO-8910中的表达

目的 :构建肿瘤抑制基因DOC - 2的真核表达载体pIRES2 -EGFP -p93,将其转入人源性卵巢癌细胞株HO - 8910中 ,并得到稳定表达。方法 :利用XhoI酶切含有p93cDNA的质粒得到p93cDNA基因片段 ,将其正向连接入真核表达载体pIRES2 -EGFP ,并通过酶切鉴定。用脂质体介导的方法 ,将真核表达载体pIRES2 -EGFP -p93转染人卵巢癌细胞系HO - 8910 ,通过G4 18筛选稳定表达克隆 ;分别在荧光显微镜下及用免疫组化法观察人DOC - 2蛋白在卵巢癌细胞系HO - 8910中的表达。结果 :构建了DOC - 2的真核表达载体pIRES2 -EGFP -p93,并通过酶切鉴定。在荧光显微镜下 ,转染了pIRES2 -EGFP -p93的人卵巢癌细胞HO - 8910发出绿色荧光 ,荧光全部集中于胞浆内。免疫细胞化学染色结果显示转染了pIRES2 -EGFP -p93的人卵巢癌细胞HO - 8910胞浆呈棕黄色 ,而转染空载体的细胞呈阴性染色。结论 :成功构建了真核表达载体转染了pIRES2 -EGFP -p93,并在人卵巢癌细胞系HO - 8910中稳定表达 ,为研究DOC - 2蛋白对卵巢癌细胞的作用奠定了基础     

羌归膝舒丸的质量标准研究

羌归膝舒丸是由羌活、独活、牛膝、血竭、当归、赤芍、红花等10余味中药组成的复方制剂,具有舒筋活络,疏肝健脾之功效.适用于骨性关节炎病中期,关节屈伸不利受限,膝部疼痛,行走跛行等症.为了有效控制产品质量,我们采用薄层色谱法对独活、血竭、当归、赤芍进行了定性鉴别.现将结果报告如下.     

苏拉明对体外培养瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖的影响

目的：探讨苏拉明对瘢痕疙瘩成纤维细胞生长及代谢的作用。方法：利用细胞培养技术将成纤维细胞从瘢痕疙瘩组织中分离出来进行培养,分别利用绘制细胞生长曲线,测定细胞ＤＮＡ合成代谢等手段来观察ｓｕｒａｍｉｎ以细胞生长及代谢的影响。结果：ｓｕｒａｍｉｎ对体外培养条件下的瘢痕疙瘩成纤维细胞的生长及ＤＮＡ的合成均有明显的抑制作用,但对细胞的形态没有明显影响。结论：在体外培养条件下ｓｕｒａｍｉｎ可以抑制瘢痕疙瘩成纤     

抑癌基因MTS1对卵巢癌细胞增殖的影响

目的：探讨多肿瘤抑制基因１（ＭＴＳ１）对卵巢癌细胞系增殖的影响。方法;绘制细胞生长曲线图,比较卵巢癌细胞系ＨＯ－８９１０（无ｐ１６基因的表达）与８９１０－ｐ１６（转染ｐ１６基因）,８９１０－ｐｃＤＮＡ３（转染空载体ｐｃＤＮＡ３）的生长特性;采用＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入实验比较３种细胞的ＤＮＡ合成情况。结果：８９１０－ｐ１６细胞在转染ｐ１６基因后其增殖特性受到抑制,ＤＮＡ８９１０－ｐ１６细胞在转染ｐ１６基     

经吻合支跨区供血的腹部轴型皮瓣分期转移修复前臂环形毁损性电烧伤

目的：探讨毁损性上肢高压电烧伤的修复方法。方法：共8例8个肢体，前臂环形毁损性电烧伤，烧伤部位全层皮肤及部分深部组织坏死。应用患肢同侧腹部轴型皮瓣携带经吻合支跨区供血的皮瓣分期转移修复前臂毁损性电烧伤创面。结果：本组全部病例，未发生皮瓣坏死，修复后上肢外形良好。结论：腹部轴型皮瓣，经过一次延迟术后分期转移，通过血管细小吻合支反流供血，能够以一期皮瓣内重建的循环系统形成跨区供血的反流皮瓣，可以获得两组以上的皮动脉供血范围的皮瓣面积。其手术技术相对简单，皮瓣血运可靠，能提供满足腕部、前臂皮肤软组织广泛缺损所需的组织量，皮瓣厚薄适中，修复后外形良好。     

上肢深度烧伤的美容整复治疗方法初探

目的:探讨中小面积烧伤患者合并上肢深度烧伤时的手术方案,在最大限度地恢复上肢功能的同时,保持受伤肢体外形的美观。方法:对有上肢深度烧伤且皮源较充足的患者进行早期切削痂,对已形成肉芽创面者则彻底切除或削除创面及其基底板,之后取中厚皮片进行大张皮完整移植,术后10天左右更换敷料并拆线,愈后辅以弹性绷带及功能锻炼等治疗措施巩固疗效。结果:本组共10个病例,13个上肢,最大单侧肢体植皮面积9%,皮片移植的成活率均在95%以上,术后随访2～18个月,患者对功能及外形均表示满意,尚无一例行二次手术矫正。结论:对有上肢深度烧伤但皮源较充足的患者,应提倡进行大张中厚皮完整移植,在保证植皮成功率的基础上,加以术后正确的功能锻炼及弹性绷带等辅助措施,不仅可以最大限度地恢复上肢的功能,同时还可保持肢体外形的美观。     

20 MHz高频超声在瘢痕评估中的应用

目的探讨20 MHz高频超声在瘢痕厚度及形态学评估中的作用。方法对2019年4月至2020年12月空军军医大学第一附属医院烧伤与皮肤外科诊治的烧创伤后瘢痕形成初期(<1个月)、增生期(1～6个月)和消退期(>6个月)患者的临床资料进行回顾性分析。全部纳入患者均进行了20 MHz高频超声、温哥华瘢痕量表(VSS)及病理组织学3种方式的评估。超声检查时在瘢痕处选择3个点进行瘢痕厚度测量, 记录平均值;在超声测量部位的瘢痕组织取标本, 进行HE染色和Masson染色, 观察并测量瘢痕厚度;由2名医生采用VSS对瘢痕的厚度进行评估, 记录平均值。分别比较瘢痕形成初期、增生期、消退期采用上述3种方式测评的瘢痕厚度的差异;同时, 对比高频超声声像图特征与病理组织形态学的关系。正态分布计量资料以±s表示, 3组间比较采用单因素方差分析, 组间两两比较采用SNK-q检验;计数资料采用卡方检验进行分析。结果共纳入224例患者, 男91例, 女133例, 年龄1～34岁, 平均25.7岁;瘢痕形成初期患者79例、增生期102例、消退期43例。(1)在瘢痕形成初期, 20 MHz超声测量的瘢痕厚...     

儿童手烧伤后瘢痕挛缩家庭康复治疗模式的探索

目的探索儿童手烧伤后瘢痕挛缩的家庭康复治疗模式并观察其疗效。方法采用回顾性非随机对照研究方法。2020年3月—2021年3月, 空军军医大学第一附属医院全军烧伤中心收治30例符合入选标准的手深Ⅱ或Ⅲ度烧伤后瘢痕挛缩患儿。根据采取的康复治疗模式, 将18例患儿(23只患手)纳入家庭康复治疗为主组(以下简称家庭康复组)、12例患儿(15只患手)纳入医院康复治疗为主组(以下简称医院康复组), 前组患儿中男11例、女7例, 年龄(4.8±2.1)岁, 创面愈合后(3.1±0.8)d开始康复治疗;后组患儿中男7例、女5例, 年龄(4.6±2.1)岁, 创面愈合后(2.8±0.7)d开始康复治疗。医院康复组患儿以在院主被动康复训练为主, 辅以回家后自主康复训练;家庭康复组患儿接受在院主被动康复训练1～2周后, 在家通过微信平台接受康复治疗师指导进行主被动康复训练。2组患儿均治疗6个月, 治疗期间均佩戴压力手套并联合使用手屈曲训练带和分指支具。治疗前及治疗6个月后, 分别采用改良温哥华瘢痕量表、手总主动活动度法和Carroll上肢功能评定法对患手瘢痕(计算治疗前后瘢痕评分差值)、关节活动度(计算优良...     

人真皮微血管内皮细胞的体外分离和原代培养

目的：建立体外分离及培养人真皮微血管内皮细胞的方法，为进一步开展创面愈合及相关领域的细胞和分子生物学研究提供物质基础和实验模型。方法：健康成人中厚皮组织经中性蛋白酶消化后去除表皮；然后，采取薄片真皮组织胰蛋白酶低湿慢速灌注法消化微血管内皮细胞；将获取的微血管内皮细胞于不同条件的培养基内连续培养５～１５ ｄ，观察其基本生物学生长特征，并采用免疫细胞化学方法行Ⅷ因子相关抗原染色鉴定。结果：①采用中性蛋白酶及胰蛋白酶分步消化法，所分离获得的细胞体外具有很强的增殖能力；该细胞呈现Ⅷ因子相关抗原阳性，说明为真皮微血管内皮细胞；②细胞单层培养时显示活跃的形成类管腔状结构的生物学特征；③真皮微血管内皮细胞在不同培养基内生长状态不同，含８％ 胎牛血清、２ ％ 人分娩前母体血清及适量ｃＡＭＰ等添加物的ＩＭＤＭ 为其较理想的培养基。结论：经体外分离及培养获得了生长性良好的人真皮微血管内皮细胞。     

p27基因转染对增生性瘢痕成纤维细胞-胶原网收缩的影响

目的：研究p27对增生性瘢痕成纤维细胞-胶原网收缩的影响差异，探讨p27在瘢痕形成中的作用。方法：取体外培养的人增生性瘢痕成纤维细胞（HTsFb），p27基因转染HTsFb，建立成纤维细胞-胶原网模型，观察p27基因转染对p27基因转染HTsFb-胶原网收缩的影响差异。结果：p27能抑制HTsFb-胶原网收缩。结论：p27可能通过抑制瘢痕收缩来抑制瘢痕形成。