水通道蛋白AqpZ在大肠杆菌中的表达及纯化

利用麦芽糖结合蛋白(Maltose binding protein,MBP)/多聚组氨酸和肠激酶组成的强亲水性双标签表达系统用于水通道蛋白Aquaporin Z(AqpZ)在大肠杆菌中的表达。通过PCR方法人工在AqpZ的3’端添加8个组氨酸标签后,定向克隆到载体pMAL-c5e中成功构建了双标签融合表达载体pMAL-c5e-AqpZ-HIS。通过IPTG诱导,融合蛋白MBP-AqpZ-HIS在Rosetta(DE3)宿主中以可溶形式表达,其上清表达量约为160 mg/L。表达产物在肠激酶作用下,融合蛋白的MBP标签被完全切除,经过一步的亲和层析获得高纯度的AqpZ-HIS。每升培养液可以获得约10 mg AqpZ-HIS纯蛋白。纯化得到的AqpZ-HIS在SDS-PAGE上的行为表明了AqpZ-HIS以4聚体形式存在。通过对色氨酸荧光光谱的研究推断出AqpZ-HIS也形成了正确的3级结构。因此,该表达系统为在大肠杆菌中表达水通道蛋白开辟了新的途径。     

酶法测定血清胆固醇的研究进展

流行病学和临床证明 ,血清中低密度脂蛋白胆固醇(ＬＤＬ Ｃ)浓度和冠心病的发病率呈正比关系 ,因而测定血清中胆固醇的含量就成了临床诊断中一个重要的参考指标。测定方法有多种 ,如化学法 ,酶法 ,同位素稀释 质谱分析法等等。酶法测定具有操作简便 ,特异性好 ,结果稳定等扰点 ,因而成为临床检测常规方法。从七十年代到现在 ,随着新方法和新技术的不断应用 ,酶法分析技术得以不断提高和改进 ,现已将酶法与电极技术与自动控制技术等结合在一起制成分析仪器 ,使分析时所用试剂量更少 ,测量速度更快 ,结果更准确。电子化、自动化、微型化已成…     

热休克蛋白60的研究进展

The family of HSP60 belongs to heat shock proteins with highly species conservatism and some important biologic functions. It can help other proteins for their assembling, folding and translocating, and plays a role in protecting cells against injuries and other types of stress. In addition, HSP60 is frequently recognized by the immune system as predominant antigens during infections and the progression of certain autoimmune diseases and might provide a novel strategy for the development of immunotherapeutics. This review focuses on distribution, molecular chaperone mechanism, function and gene expression regulation of HSP60.     

慢性胃炎患者家庭中儿童幽门螺杆菌感染的调查

幽门螺杆菌(HP)感染是慢性胃炎的主要病因之一,并与消化性溃疡、胃癌发病有关。但HP的传染源和传播途径目前尚不明确,笔者试图以纤维胃镜检查的高校教职工为线索,对其子女进行HP感染调查,以期从家庭角度探讨HP的可能传播途径。