不同类别抗瘤中药制剂下调结直肠癌免疫功能抑制的比较研究

目的比较研究不同类型抗瘤中药制剂对结直肠癌NK、T细胞免疫功能抑制的影响。方法分别制备三氧化二砷（As2O3）、川芎嗪（LHC）、黄芪（AMB）、氧化苦参碱（MOX）、猪苓多糖（PUPS）、蒿甲醚（ART）等6种中药制剂作用后的结直肠癌细胞Colon26再培养上清,以不经中药制剂作用的相应上清为对照;MTT法检测不同中药制剂作用后对Colon26所致小鼠脾细胞NK杀伤活性、ConA诱导转化抑制的影响,直接免疫荧光FCM法检测对小鼠脾细胞IL-2Rα、CD3ε＋ζ＋及CD3ε-ζ＋表达抑制的影响。结果As2O3、PUPS及ART对NK杀伤抑制的下调约50%左右,LHC及AMB可下调约75%左右;AMB的下调作用最强。LHC和PUPS作用后对CD3ε-ζ＋表达抑制的初始下调幅度约80%~90%,AMB和ART作用后初始下调幅度约40%~50%,MOX可完全消除抑制并明显促进表达;LHC的下调作用最强。AMB、PUPS及ART对T细胞诱导转化抑制的下调程度较强（下调约50%）,维持时间较长;ART对IL-2Rα表达抑制的下调作用最强（下调约50%）,维持时间较长;AMB对CD3ε＋ζ＋表达抑制的下调作用最强,不但可完全消除表达抑制,还可进一步促进表达,维持时间亦较持久。结论不同类型抗瘤中药制剂下调结直肠癌免疫抑制的类别、程度、出现和维持的时间不尽相同;下调肿瘤细胞产生的NK、T细胞免疫功能抑制是中药制剂抗瘤效应机制之一。     

miR-155参与缺氧诱导的乳腺癌化疗耐药

摘 要：［目的］ 探讨miR-155在缺氧诱导的乳腺癌化疗耐药中的作用。［方法］ 以0、50、100、150、200μmol/L不同浓度CoCl2处理4T1细胞,建立缺氧模型。实时定量PCR检测缺氧条件下miR-155的表达与耐药基因BCRP的表达。通过慢病毒载体转染使miR-155过表达,通过caspase 3/9分光光度法探讨miR-155在缺氧环境下乳腺癌化疗耐药中的作用。［结果］ 随缺氧程度的增加,miR-155及BCRP基因表达增加,过表达miR-155可抑制阿霉素诱导的4T1细胞的凋亡。［结论］ 随着乳腺癌缺氧程度加重,miR-155表达逐渐增加,miR-155表达与乳腺癌化疗耐药相关。     

黄芪制剂逆转结直肠癌免疫抑制及其作用靶分子的体外研究

目的:体外研究黄芪制剂对结直肠癌免疫抑制的逆转,初步分析其作用靶分子。方法:获取体外经黄芪作用后再传代的结直肠癌细胞(Colon26)培养上清,以不经黄芪作用的同步培养上清作对照,定量ELISA法测定上清中TGFβ-1、VEGF、IL-4、IL-6、IL-10、PGE2等六种免疫抑制分子的含量,分析其对MTT法测定的小鼠脾细胞NK杀伤和诱导转化以及流式细胞计数分析的IL-2Rα、CD3ε+ζ+和CD3ε-ζ+表达5项免疫功能的影响,多元相关分析黄芪下调Colon26分泌免疫抑制分子与免疫抑制逆转作用之间的关系。结果:结直肠癌细胞培养上清中可检测到免疫抑制分子,以TGFβ-1含量最高;对5项免疫功能指标均有显著抑制作用。黄芪作用后,其第一次再培养上清中TGFβ-1和IL-10含量及对除IL-2Rα以外的4项免疫功能指标的抑制均明显降低,IL-6、PGE2含量显著升高;与第一次再培养上清相比,第二次再培养上清中TGFβ-1含量及对CD3ε+ζ+表达的抑制继续降低,IL-6含量降低至无中药处理的对照水平,对IL-2Rα表达的抑制开始降低,IL-10含量显著回升。相关分析显示,诱导转化、CD3ε+ζ+、CD3ε-ζ+表达及NK杀伤功能抑制率与TGFβ-1含量呈正相关,与PGE2含量呈负相关;VEGF、IL-4、IL-6和IL-10与5项免疫功能抑制不相关。结论:黄芪可通过下调结直肠癌细胞分泌TGFβ-1等免疫抑制分子,影响其免疫抑制效应的发挥,这可能是黄芪的抗瘤新机制之一。     

川芎嗪下调Colon26肿瘤细胞免疫抑制的体外研究

目的:体外研究川芎嗪对Colon26肿瘤细胞产生免疫抑制的影响.方法:获取经川芎嗪作用后再培养的Colon26及上清,以不经川芎嗪作用的同步培养细胞及上清作对照;分析川芎嗪作用后是否可下调Colon26肿瘤免疫抑制(MTT法检测NK活性和诱导转化,直接免疫荧光FACS法检测IL-2Rα、CD3ε+ζ+和CD3ε-ζ+表达),定量ELISA法测定上清中TGF-β1、VEGF、IL-4、IL-6和IL-10五种免疫抑制分子含量的变化,多元相关分析川芎嗪下调肿瘤免疫抑制与免疫抑制分子分泌变化之间的关系.结果:单纯Colon26培养上清中5种免疫抑制分子均可被测到,以TGF-β1含量最高,可显著抑制所测5项免疫功能.川芎嗪作用后,第一次传代再培养上清中TGF-β1、IL-6和IL-10含量,及5项免疫功能抑制均明显降低;第二次传代再培养上清中TGF-β1和IL-6含量,及转化抑制、CD3+ζ+和CD3-ζ+表达抑制均显著回升.相关分析显示,TGF-β1与除转化抑制以外的其他4项免疫功能抑制呈正相关,IL-6与转化抑制及CD3-ζ+表达抑制正相关;IL-10与NK杀伤抑制、IL-2Rα及CD3+ζ+表达抑制正相关.结论:川芎嗪作用Colon26肿瘤细胞后可明显下调其免疫抑制分子的分泌,影响其免疫抑制效应的发挥.通过下调肿瘤细胞分泌免疫抑制分子而阻碍肿瘤细胞产生免疫抑制,可能是川芎嗪的抗瘤效应机制之一.     

医学院校医学免疫学课程教学状况的调查分析

为了进一步具有针对性地改进医学免疫学教学方法,提高教学效果,本研究针对学生学习兴趣、课程难度等系列问题进行了问卷调查。结果表明各层次学生均认为医学免疫学是一门较为难学的课程,教师在教学过程中应根据学生的不同水平因材施教,同时还需注重反复强化概念,加强师生互动,适量使用幻灯片。     

青蒿琥酯逆转L929肿瘤细胞的免疫抑制作用

目的：体外研究青蒿琥酯（ART）逆转L929肿瘤细胞（L929）的免疫抑制作用。方法：获取经ART作用后再培养的L929培养上清和不经ART作用同步对照培养的L929培养上清,检测上清对小鼠脾细胞4项免疫功能的影响（包括NK杀伤和ConA诱导转化：MTT法;细胞表面CD4^＋和CD8^＋表达水平：流式细胞术法）和上清中4种免疫抑制分子的浓度（包括TGF-β1、PGE2、VEGF和IL-10：定量ELISA法）。分析青蒿琥酯逆转L929的免疫抑制作用与其下调L929免疫抑制分子分泌之间的关系。结果：同步对照培养的L929的上清,可稳定地检测到所测4种免疫抑制分子（TGF-β1和PGE2浓度最高）和对所测小鼠脾细胞4项免疫功能的显著抑制作用（C-S1与C-S2相比,P〉0.05）。对ART作用后的L929：其第一次再培养上清（ART-S1）与相应对照上清（C-S1）相比,4种免疫抑制分子的浓度及对小鼠脾细胞NK杀伤、ConA诱导转化和CD4^＋ CD8^-表达的抑制作用显著降低（P〈0.01）;其第二次再培养上清（ART-S2）与ART-S1相比,除IL-10浓度轻度上升（P〈0.05）和对小鼠脾细胞CD4-CD8^＋表达的抑制作用轻度降低（P〈0.05）外,余无显著变化（P〉0.05）。相关分析显示,ART逆转L929对小鼠脾细胞NK杀伤、ConA诱导转化及CD4^＋ CD8^-表达的抑制,与其下调L929分泌TGF-β1（r=0.971、r=0.984、r=0.990,P〈0.05）、PGE2（r=0.960、r=0.981、r=0.982,P〈0.05）及VEGF（r=0.970、r=0.992、r=0.982,P〈0.05）显著正相关。ART逆转L929对小鼠脾细胞CD4^- CD8^＋表达的抑制,可能与其下调L929其它免疫抑制分子分泌有关。结论：ART可通过下调L929免疫抑制分子分泌而逆转其免疫抑制作用,逆转肿瘤免疫抑制应是ART抗瘤新机制之一。     

抗肿瘤中药制剂逆转结直肠癌NK细胞免疫抑制的靶分子探讨

目的探讨抗瘤中药制剂逆转结直肠癌所致自然杀伤(NK)细胞免疫抑制的作用靶分子机制。方法分别制备三氧化二砷(As2O3)、川芎嗪(LHC)、黄芪(AMB)、氧化苦参碱(MOX)、猪苓多糖(PUPS)、青蒿琥酯(ART)6种中药制剂作用后的小鼠结直肠癌细胞Colon26再培养上清液,MTT法检测中药制剂对Colon26所致小鼠脾细胞NK杀伤抑制的影响,流式细胞仪直接免疫荧光法检测对小鼠脾细胞CD3ε-ζ+表达抑制的影响;ELISA测定上清液中转化生长因子(TGF)β1、血管内皮生长因子(VEGF)、白细胞介素(IL)4、IL-6、IL-10和前列腺素(PG)E2含量;多元相关分析中药制剂逆转结直肠癌NK细胞免疫抑制的相应靶分子。结果 AMB对NK杀伤抑制的逆转作用最强;LHC对CD3ε-ζ+表达抑制的逆转作用最强。对NK杀伤抑制的逆转,As2O3、AMB、PUPS和ART的靶分子为TGF-β1,LHC的靶分子为TGF-β1和IL-10;对CD3ε-ζ+表达抑制的逆转,AMB和MOX的靶分子为IL-10。结论通过抑制免疫抑制分子分泌逆转肿瘤细胞产生的NK免疫抑制,应是中药制剂抗瘤效应机制之一。临床可考虑联合使用不同...     

医学免疫学实验教学内容的改革

为适应科技发展对人才的要求,提高医学免疫学实验教学效果,以培养学生实验兴趣、能力为出发点,对现有免疫学实验教学内容进行了改革：在优化必不可少的经典验证性实验的基础上,设计开设综合性实验,大力开展设计性实验。实践证明,改革激发了学生的学习热情,培养了学生的创造性思维,锻炼了学生的创新能力、实践能力和解决实际问题的能力,提高了免疫学实验教学的效果。     

急性脑梗死患者血清MMP-9与C-反应蛋白水平的变化

目的观察急性脑梗死(ACI)患者血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、C-反应蛋白(CRP)水平变化。方法选择ACI患者70例作为脑梗死组,根据梗死灶体积分为大、中、小3个亚组;另选30例体检者作为健康对照组。比较各组血清MMP-9、CRP水平。结果ACI组血清MMP-9、CRP水平均显著高于健康对照组(P<0.05),不同梗死体积患者血清MMP-9、CRP水平比较差异亦有统计学意义(P<0.05),直线相关分析表明二者之间存在正相关(r=0.276,P<0.05)。结论急性脑梗死患者血清MMP-9、CRP水平明显升高,并与脑梗死体积密切相关。     

不同类别抗瘤中药制剂逆转结直肠癌NK免疫功能抑制的比较研究

目的比较研究不同类型抗瘤中药制剂对结直肠癌所致NK免疫功能抑制的影响。方法分别制备三氧化二砷（As2O3）、川芎嗪（LHC）、黄芪（AMB）、氧化苦参碱（MOX）、猪苓多糖（PUPS）、蒿甲醚（ART）等6种中药制剂作用后的结直肠癌细胞Colon 26再培养上清,以不经中药制剂作用的相应上清为对照;MTT法检测不同中药制剂作用后再培养上清对小鼠脾细胞NK杀伤活性的影响,直接免疫荧光FCM法检测对小鼠脾细胞CD 3ε^-ζ^＋表达的影响。结果对NK杀伤抑制的下调,As2O3、PUPS及ART之间未见显著差异（均P〉0．05,下调49．65％±8．86％）,LHC及AMB之间未见显著差异（P〉0．05,下调78．15％±9．81％）;AMB的下调作用最强。对CD 3ε^-ζ^＋表达抑制的下调,LHC和PUPS的初始下调幅度未见差异（P〉0．05,下调88．04％±7．57％）,AMB和ART的初始下调幅度未见差异（P〉0．05,下调50．00％±8．24％）,MOX与其他中药制剂的作用之间均有差异（均P〈0．01,完全消除抑制并明显促进表达）;LHC的下调作用最强。结论逆转结直肠癌细胞产生的NK免疫功能抑制是中药制剂发挥抗瘤效应的机制之一。临床可考虑联合使用扶正祛邪类及活血化瘀类抗瘤药物组方,以调整患者不利于临床治疗的NK免疫抑制状态。