细胞色素P450 2C19单碱基突变位点CYP2C19m1的分析

目的:CYP2C19ml是引起CYP2C19酶活性缺陷的主要等位基因,有83％左右的慢代谢者含有CYP2C19ml等位基因,本文试图建立一步PCR测定CYP2C19ml等位基因的方法。方法:根据等位基因特异扩增(ASA)原理设计两对分别特异扩增野生型等位基因和突变型等位基因的引物,建立了一步PCR测定CYP2C19ml等位基因的方法。结果:对39位随机受试者进行了基因分型研究,发现3位CYP2C19ml纯合子、18位CYP2C19ml杂合子,其余18位为野生型纯合子。结论:说明效法能够用于测定CYP2C19ml等住基因,并且证明该法具有简便、快速和污染少的优点。     

ASA法测定细胞色素P450 2D6酶缺陷等位基因CYP2D6E

目的 :建立细胞色素P4 50 2D6(CYP2D6)第 3 0 2 3位A→C突变造成CYP2D6酶活性缺陷的等位基因CYP2D6E的测定方法。方法 :利用等位基因特异扩增法 (ASA)为基本原理 ,设计两对引物分别扩增野生型等位基因和突变型等位基因。结果 :经 3 96例测定 ,发现 2例CYP2D6E与CYP2D6B的异突变型纯合子 ,其表现型均为慢代谢者。阳性对照说明本法重复性好 ,阴性对照显示本法无污染问题。结论 :本法比PCR -RFLP法更为快捷、更少污染。对CYP2D6E的测定有助于准确预测CYP2D6表现型     

细胞色素P450 2C19基因多态性与食管癌易感性的关系

肿瘤的发生和发展是由多种遗传改变累积造成的,遗传改变包括癌基因、抑癌基因和肿瘤易患基因的异常等。食管癌是常见的恶性肿瘤之一,占恶性肿瘤死亡率第4位[1],其发病率和病因学在世界范围内存在着很大的地区性差异,至今尚未探明。对食管癌的分子生物学机理已做了广泛深入的研究,迄今已证实肿瘤易患基因CYP1A1、2E1等基因多态性均与食管癌的发生有不同程度的相关[2,3]。我们通过对食管癌组及对照组CYP2C19等位基因进行基因分型,以阐明CYP2C19等位基因多态性与食管癌易感性的关系。1　材料与方法1.1　标本来源　50例食管癌患者来源于浙…     

轴前多指致病基因研究进展

轴前多指（PPD）是人类常见的肢体畸形。Shh在胚胎肢芽前部的异位表达可直接导致PPD的发生，而Lmbr1基因结构的变异与多指表型密切相关。PPD的候选基因定位于人染色体7q36上的450kb内。最近对多个家系的研究发现，Lmbr1作为顺式调控元件对Shh的远距离调控是引起PPD的关键分子机制。     

壳寡糖的制备及组分分析

目的 研究以壳六糖为主的壳寡糖制备工艺并对制备物组分进行分析。方法 用酶解法水解壳聚糖，有机溶剂法提取壳寡糖，色谱法分离纯化壳六糖，HPLC法分析检测壳寡糖组分。结果 壳寡糖粗提物中的主要成分为6-7聚壳寡糖，色谱分离得到较纯的壳六糖。结论 该制备工艺可以得到以6-7聚壳寡糖为主的壳寡糖制备物。     

壳寡糖激活巨噬细胞的机制

目的：探讨巨噬细胞结合、内吞壳寡糖以及壳寡糖激活巨噬细胞的机制。方法：利用荧光物质2-氨基吖啶酮标记壳寡糖，在激光共聚焦显微镜下观察巨噬细胞内吞壳寡糖的过程，流式细胞仪分析细胞的荧光强度，通过竞争性抑制实验及钙离子、胰蛋白酶、秋水仙碱对内吞的影响来确定巨噬细胞内吞壳寡糖的机制。通过RT—PCR方法检测TNF—α来反映结合及内吞过程对壳寡糖刺激巨噬细胞的影响。结果：巨噬细胞可结合内吞壳寡糖。内吞易受温度影响，37C较迅速（〈2min），4C只能结合不能内吞。EDTA可抑制巨噬细胞内吞壳寡糖；经胰蛋白酶预处理的巨噬细胞摄取壳寡糖的能力大大降低，终止胰蛋白酶后巨噬细胞摄取壳寡糖的能力得到恢复。秋水仙碱预处理可明显抑制巨噬细胞摄取壳寡糖，并呈剂量依赖性。0．1mol／L甘露糖可抑制壳寡糖对巨噬细胞的刺激作用。结论：甘露糖受体介导的吞饮是巨噬细胞内吞壳寡糖的一条重要途径，甘露糖受体在壳寡糖激活巨噬细胞中起重要作用。     

枸杞多糖对小鼠骨髓树突状细胞成熟的影响

目的：研究枸杞多糖对小鼠骨髓树突状细胞（DC）表型及功能成熟的影响。方法：小鼠骨髓细胞用GM-CSF和IL-4培养5d，然后用免疫磁珠法纯化DC细胞，实验组加入枸杞多糖（100μg／ml），空白对照组加等量RPMI1640，阳性对照组加LPS（100ng／ml），3组分别同时作用48h。流式细胞仪检测细胞表型和细胞摄取抗原的能力，ELISA检测产生的细胞因子IL-12，混合淋巴细胞反应检测细胞提呈抗原的能力。结果：用枸杞多糖刺激的小鼠骨髓DC表达I-A／I-E、CD11c和分泌IL-12能力比空白对照组增加，吞噬FITC-dextran的能力下降，并可促进同种异基因T细胞的增殖。结论：枸杞多糖可以促进体外培养的小鼠骨髓DC的成熟，促进DC诱导的免疫应答启动。     

植物多糖对巨噬细胞免疫功能的影响

植物多糖的作用机理与天然免疫调节,尤其是巨噬细胞的功能有关.总的来说,植物多糖首要作用是通过与巨噬细胞表面特异性受体的结合,进而增强和/或激活巨噬细胞免疫应答反应,从而起到免疫调节、抗肿瘤、促进创伤愈合及其它治疗作用.因此,研究植物多糖对巨噬细胞的免疫调节机制对于植物多糖功能的研究具有重要的参考价值.     

细胞色素P4502C19基因多态性与肺癌易感性的关系

研究证明致癌物代谢酶的遗传多态性在决定环境致癌物的效应时起着关键性的作用,ＣＹＰ酶体系中许多酶参与致癌物的代谢,其基因的多态性与肿瘤的易感性有关,如ＣＹＰ２Ｄ６、ＣＹＰ１Ａ１、ＣＹＰ２Ｅ１等。１９９４年,ｄｅＭｏｒａｉｓ等发现细胞色素Ｐ４５０２Ｃ１９（ＣＹＰ２Ｃ１９）等位基因的两个突变位点：ＣＹＰ２Ｃ１９ｍ１和ＣＹＰ２Ｃ１９ｍ２,并证明ＣＹＰ２Ｃ１９基因的多态性与ＣＹＰ２Ｃ１９酶活性的多态性有关［１］。我们应用等位基因特异扩增法（ＡＳＡ）原理,建立了ＣＹＰ２Ｃ１９等位基因分型法［２,３］,并对７…