小鼠多向祖细胞的体外培养

本文介绍小鼠多向祖细胞(CFU-mix)的测定方法,培养体系包括IM-DM,2-ME,转铁蛋白-铁,牛血清白蛋白V,PWM-SCM及EPO。在36.5℃,7%CO_2,饱和湿度下培养10～14天。本文用实验数据表明培养体系中EPO量不能少于0.5U/皿,PWM-SCM占10%为宜,转铁蛋白则应加300μg,植入的骨髓细胞量与CFU-mix集落数有线性正比关系。     

树突状细胞与系统性红斑狼疮

树突状细胞 (dendriticcell,DC)是目前所知功能最强的专职性抗原呈递细胞 (antigenpresentingcell,APC) ,其体外抗原呈递能力是巨噬细胞的 10～ 10 0倍[1] 。DC不仅是机体免疫应答的始动者 ,而且在诱导免疫耐受 ,调节T细胞介导的免疫应答方面 ,均起着重要的作用。近来已有文献报道 ,DC在自身免疫性疾病的发生发展中起一定的促进作用 ,本文就DC的分化和功能及其与系统性红斑狼疮发病机制的研究作一简要综述。1　DC的分化、发育及其表面分子根据DC的来源 ,可将DC分为髓系来源的DC及淋巴系来源的DC两大类 ,两者均起源于体内的多能造血…     

胎肌条件培养液抗损伤效应的观察

胎肌条件培养液（ＦＭＣＭ）可在ＣＦＵ－ＧＭ体外培养中提供集落刺激活性。研究发现它还能在体外培养中保护ＣＦＵ－ＧＭ，减轻理化损伤因素对其生长的抑制效应。所用化学损伤因素为５×１０－７Ｍ的阿糖胞苷与９×１０－９Ｍ的三尖杉酯碱，物理损伤因素为放射（３．５Ｇｙ），热（４４℃，６０分钟）与冷（—２０℃，１６分钟）。在损伤因素作用下，ＣＦＵ－ＧＭ的集落产率受到明显抑制，用２０％ＦＭＣＭ处理后，抑制现象可以减轻。ＦＭＣＭ可以对抗多种因素对ＣＦＵ－ＧＭ的抑制作用，没有特异性。用胰蛋白酶或热（８５℃，３０分钟）处理后的ＦＭＣＭ不具上述保护效应，用酸（ＰＨ＝２），碱（ＰＨ＝１０），ＤＮＡ酶与透析处理则无明显影响。提示ＦＭＣＭ中起保护作用的活性物质可能为分子量大于１００００的蛋白质。     

4℃保存外周血造血干细胞动态观察

本文对4℃条件下不同时间保存后的外周血造血干细胞(peripheral bloodhematopoietic stem cells,PBHSC)数进行了动态观察。在本实验中以定向造血祖细胞(CFU-GM)作为观察PBHSC的指标。结果表明:随着保存时间的延长,PBHSC集落数逐渐下降;0小时与24小时保存后的干细胞数无显著差异;24小时与48、72、96、120小时保存后的干细胞数有高度显著差异;48小时与72、96、120小时保存后的干细胞数无显著差异。同时发现,红细胞的存在有利于PBHSC的4℃保存。     

人脐血中血管内皮祖细胞体外扩增和鉴定的实验研究

目的：探讨从人脐血中分离、培养、体外扩增血管内皮祖细胞(EPC)的方法及体外进行EPC的鉴定。方法：采用密度梯度离心法从脐血中分离EPC，体外分别培养在包被有FN和不包被FN的培养皿中，采用免疫组织化学技术(SABC法)鉴定培养贴壁细胞表面标志CD31、CD34及KDR的表达；流式细胞仪检测细胞表面标志CD133及表达CD133细胞比例。结果：包被FN的培养皿中细胞贴壁及增殖均比未包被的多，免疫组化染色CD31、CD34及KDR均呈阳性，培养第4天流式细胞仪检测CD133^ 占21．3％。结论：密度梯度离心法可用于体外分离脐血中EPC进行实验研究，FN对于体外培养EPC有非常重要的作用。     

重症肌无力患者造血干/祖细胞及其亚群富集纯化的研究

目的:获得高纯度造血干/祖细胞及其亚群,用于重症肌无力(MG)造血干细胞移植治疗和生物学特性的研究。方法:用免疫磁珠法(MiniMACS)从MG骨髓中富集CD34+细胞后再用荧光激活细胞分选(Fluorescent activatedcell sorter,FACS)纯化CD34+/CD38+和CD34+/CD38-细胞亚群。结果:MiniMACS分选的CD34+细胞群纯度达90％,FACS分选的CD34+/CD38-和CD34+/CD38+两细胞亚群纯度可达95％以上。结论:联合使用MiniMACS和FACS可迅速大量纯化HSC/HPC及其重要细胞亚群,可用于临床造血于细胞移植、基因治疗和研究HSC/HPC及其亚群生物学特性。     

内皮祖细胞与冠心病的研究进展

1997年Asahara等首次证明循环外周血中存在能分化为血管内皮细胞的前体细胞，并将其命名为血管内皮祖细胞（Endothelial progenitor cells，EPCs）。内皮祖细胞（EPC）是一类能增殖并分化为血管内皮细胞，但尚未表达成熟的血管内皮细胞表型，也未形成血管的前体细胞。研究发现，EPC不仅参与人胚胎血管生成，同时也参与出生后血管新生和内皮损伤后的修复过程。近年来，临床上通过EPCs移植治疗缺血性疾病获得成功。EPC为临床上治疗缺血性疾病展现了美好的未来，本文对内皮祖细胞的研究予以综述。     

造血和血管发育

血细胞的产生和血管的发育必须同步 ,才能满足机体的需要。研究表明 ,无论是在胚胎时期还是出生后 ,造血系统和血管的发育都是密不可分的统一整体 ,它们不仅具有共同的祖先细胞 ,而且胚胎期和出生后的血管发育机制也很相似[1 ] 。本文就有关研究进展做一综述。1.胚胎期的造血和     

脐血CD34^＋／CD19^—细胞与体外培养集落的相关性分析

用两种单克隆抗体（单抗）标记脐血造血祖细胞表面抗原（ＨＰＣＡ，ＣＤ３４）用流式细胞仪分析，并比较两种单抗标记的ＣＤ３４＾＋细胞与体外培养的粒单细胞集落形成单位（ＣＦＵ－ＧＭ），红系爆式集落形成单位（ＢＦＵ－Ｅ）和混合集落形成单位的相关性，结果表明脐血有核细胞中，抗ＨＰＣＡ－２ＦＩＴＣ阳性的细胞占１．０５±０．７２％，Ｔｕｋ３（纯抗体）阳性细胞占２．０６±１．２５％，差别显（Ｐ＜０．０５），每μｌ