转马铃薯Y病毒复制酶基因烟草的获得及抗病性分析

重组克隆ＤＮＡ用ＫｐｎＩ／ＢａｍＨＩ双酶切得到马铃薯Ｙ病毒ＮＩｂ基因，将其插入质粒ｐＲＯＫ２相应切点中构成植物表达载体。用重组质粒ｐＲＯＫ２转化农杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｔｕｍｅｆａ－ｃｉｅｎｓ）ＬＢＡ４４０４菌株，叶盘法将ＮＩｂ基因转入烤烟品种ＮＣ８９的染色体，获得抗卡那霉素的转化再生植株。经抗性筛选、ＰＣＲ检测、无性扩繁和大量重复抗病鉴定，结果表明，转化烟草植株ＤＮＡ中整合了外源目的基因，且表现抵抗２０μｇ／ｍｌＰＶＹＮ的侵染，ＥＬＩＳＡ分析认为抗性植株无病毒累积，初步筛选出对ＰＶＹＮ侵染具有较高抗性的转基因烟草植株。     

大豆磷脂酶水解技术研究

为获取制备酶水解磷脂的最佳条件 ,以浓缩磷脂为底物 ,磷脂酶A2 为水解酶 ,采用静止反应方式 ,进行了大豆磷脂酶水解改性研究。最佳反应条件为 :磷脂酶A2 0 .14 % ,氯化钙 0 .0 3% ,时间 7h ,温度 70℃。在最佳条件下 ,FFA的生成量可以达到 2 2 .3mL ,转化率可达到 36 .36 %。FFA的生成量与溶血磷脂的生成量有显著的相关与回归关系 (P <0 .0 1) ,回归方程为 :Y =0 .15 2X +13.6 77。     

伯克霍尔德氏菌胞外酯酶催化己酸乙酯合成的研究

从变质的食用油中分离得到1株具有产己酸乙酯酯化酶能力的伯克霍尔德氏菌(Burkholderia sp.)X10,并对其发酵条件和酯化条件进行了优化。结果表明,该菌株最佳发酵条件为:淀粉4%,酵母膏3%,橄榄油4%,发酵液初始p H值6.5,培养温度30℃,转速180 r/min。最佳酯化条件为:己酸添加量2%,酯化温度35℃,酯化液初始p H4.6,振荡方式为连续振荡。优化条件下酯化酶活力由1.79 U/m L提高到3.53 U/m L,较优化前增加了97.21%。     

鲽鱼下脚料酶解产物的功能特性

为全面了解水解度对鲽鱼下脚料(鱼头、皮、骨)酶解产物功能特性(溶解性、热稳定性和乳化性)的影响,采用碱性蛋白酶在其最适条件下进行酶解,得到水解度为9.0%～23.4%的酶解产物,并对其功能特性进行分析。结果显示:相同pH值条件下当水解度大于15%时,酶解产物的溶解性随水解度的升高而增大;水解度为11.3%、17.2%、21.7%、23.4%的酶解产物经93℃、10min处理后溶解性仍可保持在90%以上;在pH4和pH7条件下,酶解产物的乳化指数均在水解度为23.4%时达到最高。鲽鱼下脚料碱性蛋白酶酶解产物的功能特性受水解度及pH值的影响。     

皱胃酶提取工艺的研究

研究了小牛皱胃酶的提取工艺，分析了不同提取液、提取温度、时间、提取液量及换液频率对提取效果的影响。结果表明，4－10℃下，采用10％CaCl2和1％乙醇为提取取液，首次用800mL，每两天换液1次，后两次用量减半。     

秋刀鱼蛋白酶解物的制备及氨基酸评价

采用正交实验法优化制备秋刀鱼蛋白酶解物的最适工艺条件，探讨了影响秋刀鱼蛋白酶水解的主要因素。实验表明，最适的酶解条件为：复合酶与风味酶之比为1：3，复合酶量为0．100g／25g鱼肉，酶解温度为50℃，酶解时间为7h。在此条件下，秋刀鱼蛋白水解度为45．5％，总游离氨基酸含量为1800．53mg／100mL。经高效液相色谱分析，在水解产物中约50％的氨基酸为具有较高营养价值的抗氧化活性氨基酸和支链氨基酸。     

一株产海藻糖合成酶嗜中温芽孢杆菌的鉴定及其酶学性质

由长白山温泉附近土壤中筛选得到产海藻糖舍酶菌株，为革兰氏阳性菌，具有芽孢和鞭毛，其最适生长温度为55℃，对这一菌株进行生理生化指标测定。进一步对该菌株所产海藻糖合酶的酶学性质进行研究，酶反应最适作用pH值为7．0，在pH6．6～7．4时该酶稳定，最适作用温度为35℃，在25-45℃时该酶可稳定保存。     

超滤膜分离鲍鱼内脏酶解物及其体外抗氧化活性的研究

利用超滤膜对鲍鱼内脏酶解物进行分离,考察了各分子量段酶解物的成分组成和抗氧化活性。利用截留分子量为10000 u、3000 u、500 u的超滤膜分离得到FA、FB、FC和FD等四个组分中,FA组分的总糖和蛋白含量分别为34.06%和17.20%,而FB、FC和FD等组分主要是由蛋白组成,其游离氨基酸含量分别高达23.20、25.4、28.68 g/100g。根据Tricine-SDS-PAGE和β-消除反应的分析结果,表明FA中位于间隔胶的高分子组分(HMWF)含有N-糖苷键结合的糖蛋白,而分子量为25 ku的成分主要是蛋白。凝胶渗透色谱数据表明FB、FC和FD的分子量主要分布在300 u左右。另一方面,体外抗氧化结果表明,在低浓度下FA组分具有较强的DPPH自由基清除活性和还原力;当质量浓度高于5 mg/m L时,各超滤组分的DPPH自由基清除活性无明显差异,但FB、FC和FD组分的还原力明显高于FA组分;不管是低浓度还是高浓度,FB、FC和FD组分的羟自由基清除活性都明显高于FA组分。     

芦荟制品的酶促褐变及其控制措施

分析了芦荟制品酶促褐变机理，研究了加工过程，pH、温度、贮存时间等因素对芦荟制品酶促褐变的影响，总结了控制芦荟制品酶促褐变的主要方法，如热处理、酸处理、亚硫酸盐或其它化学试剂处理、隔绝或除去氧气等。     

青霉P-1007酸性蛋白酶酶学性质及其固体发酵条件的初步研究

青霉P-1007产胞外酸性蛋白酶，其酶活可达1500u／g。该酶的最适温度为50℃，最适pH值为5．5；酶的pH稳定性和耐温性较好，在pH5．5，：50℃条件下保温8h，其相对酶活仍在83％以上；在pH值为5．5，60℃条件下水浴2h后，相对酶活为60％。不同金属盐对该酶酶活及不同氮源、碳源、温度、pH、含水量以及发酵时间对菌株产酶的影响试验结果表明：MnCl2，CuSO4均对该酶有激活作用，其他金属盐类对该酶有不同程度的抑制作用；添加黄豆粉（1％）和葡萄糖（1％）可使菌株产酶酶活分别提高71％和31％；培养温度为40℃以及培养基起始pH为7．0时产酶最高；含水量和发酵时间对产酶也有不同程度的影响。