抗体库优化策略对特异性抗肝癌单链抗体的人源化

目的:对特异性抗肝癌单链抗体(single chain variable fragment,scFv)DM同步进行人源化和优化,以获得亲和力高和免疫原性低的人源化抗肝癌单链抗体.方法:通过分子结构和序列分析,确定对抗原结合位点的构象有重要影响的骨架区(FR)残基,把难以判断回复突变残基的人、鼠源副本同时编入人源化抗体序列中;通过重叠延伸PCR技术合成人源化抗体全基因,利用噬茵体展示技术构建人源化组合抗体库;通过肝癌细胞筛选阳性克隆,ELISA方法测定各个克隆抗原结合活性;用硫氰酸盐洗脱法测定并比较亲本抗体和人源化scFv的相对亲和力.结果:成功构建人源化组合抗体库,实际库容4.77×10 5,包含由2 5不同重链和2 2不同轻链组成的128种人源化DM;经过筛淘及ELISA鉴定,获得HDM1、HDM2和HDM3 3个阳性克隆,相对亲和力指数分别为HDM1 1.6 mol/L、HDM2 1.2 mol/L和HDM3 2.2 mol/L.结论:抗体库优化法是一个高效、简便的人源化方法;获得的3株阳性克隆HDM1、HDM2、HDM3与亲本抗体DM同样具有良好的抗原结合特异性和较高的亲和力.     

PercuSurge经皮血栓吸除术治疗急性心肌梗死

急诊经皮冠状动脉介入治疗（PCI）能早期开通梗死相关动脉（IRA），在急性心肌梗死（AMI）治疗中占主导地位。然而PCI后无复流的发生严重影响患者预后。经皮血栓吸除术能否改善PCI后AMI患者预后仍有争议。本研究通过实时心肌声学造影（real-time myocardial contrast echocardiography，RT-MCE）观察PercuSurge经皮血栓吸除术后心肌微循环变化，评价其治疗AMI的疗效。     

日本血吸虫(中国大陆株)表达基因的分离和EST序列测定

目的 运用表达标签技术（ＥＳＴ方法）,从ＳｊｃＤＮＡ文库中分离、鉴定血吸虫表达基因序列。方法 应用ＥＳＴ方法,人ＳｊｃＤＮＡ文库中随机挑出单个重组克陲 ＰＣＲ直接序列分析,通过互联网将获得的ＥＳＴ序列送入ＮＣＢＩＧｅｎＢａｎｋ进行同源性检素,并将发现的未知基因ＥＳＴ序列送入ＮＣＢＩｄｂＥＳＴ以获得ＧｅｎＢａｎｋ进入号。结果 分离了１００个ＳｊＧｅｎＢａｎｋ中已知的血吸虫基因序列,１９个为未知基因序     

男性各腰椎骨密度变化规律的研究

目的探讨健康成年男性L1～4各椎体骨密度随增龄的变化规律。方法选取35～89岁健康男性168例,按5岁一个年龄段分组,共11组,用QCT及标准软件测量腰椎骨密度,采用方差分析和SPSS10.0软件进行统计学处理。结果L1～4椎体骨密度随年龄增长而缓慢降低;65～69岁年龄段骨密度下降速率有所加快,70～89岁年龄段骨密度随年龄增长下降速率减缓;60～64岁与65～69岁L1～44个椎体骨密度均存在显著性差异(P<0.05)。结论男性L1～4椎体骨密度随增龄而缓慢降低,以65～69岁年龄段骨密度下降较明显,之后下降速率趋于减缓,但同年龄段L14各椎体间骨密度无明显变化。     

舍格林综合征与IL-1β的关系

细胞因子可以调节自身免疫性损害。舍格林综合征（SjSgren’s Syndrome，SS）是一种自身免疫性疾病，本文拟定性、定量研究细胞因子——白介素1β（IL-1β）在SS患者唇腺中的表达，以完善SSs患者淋巴细胞过度浸润与激活的调节机制。     

老年2型糖尿病合并高甘油三脂血症患者脂蛋白酯酶基因HindⅢ多态性研究

老年 2型糖尿病 (ＤＭ)患者常并发高甘油三酯血症(ＨＴＧ)和低高密度脂蛋白胆固醇 (ＨＤＬ Ｃ)血症 ,是ＤＭ患者伴发大血管病变的独立危险因子 ,其发生机制尚未完全阐明〔1,2〕。Ａｈｎ等〔3〕报道脂蛋白脂酶 (ＬＰＬ)基因第 8内含子内切酶ＨｉｎｄⅢ的限制性片段长度多态性 (ＲＦＬＰ)与ＨＴＧ、低ＨＤＬ Ｃ血症有关。我们探讨ＬＰＬ基因ＨｉｎｄⅢ多态性与ＤＭ伴ＨＴＧ的关系。　　一、对象和方法　　 1.对象 :1996年 6月至 2 0 0 0年 4月在我院选择符合1985年ＷＨＯ糖尿病诊断标准的ＤＭ患者 144例。其中男74例 ,女 70例 ,年龄 60～ 83岁…     

大肠癌组织中talin mRNA的表达及意义

目的探讨踝蛋白（talin）mRNA在大肠癌组织中的表达变化及其在大肠癌发生、发展中的作用。方法采用荧光定量逆转录PCR（FQ-RT-PCR）方法检测41例大肠癌及癌旁正常组织中talin mRNA的表达。结果talin mRNA在大肠癌组织中的表达量为126535copy／μg RNA，而在癌旁正常组织中为22689376copy／μg RNA，两者相比，P〈0．01；有淋巴结转移的大肠癌较无转移者talin mRNA表达低，P〈0．01；癌组织浸润越深，talin mRNA表达越低，P〈0．01。结论talin mRNA在大肠癌中表达降低；talin与大肠癌的浸润、转移有关，可作为大肠癌发生、发展的预测指标之一。     

定量组织速度成像检测早期高血压左室舒张功能

目的研究一级高血压对心脏早期损害表现.方法应用定量组织速度成像技术,分析二尖瓣瓣环和左心室12个节段心肌舒张早期左心室充盈Em波、舒张晚期Am波和Em/Am比值.结果一级高血压患者Em波速度降低,Am波速度增加,共349个心肌节段Em/Am＜1,以室间隔、前壁和后壁多见,同时30%患者二尖瓣瓣环Em/Am＜1.结论一级高血压患者存在左室舒张功能减退.     

河南省首次从人体内分离出E.coli O26:H11

目的 研究一株从腹泻病人体内分离出的Ecoli O26：H11。方法 血清凝集采用玻片法，生化鉴定采用VITEK32全自动细菌分析系统GNI 卡进行鉴定，并对该株E．coli O26：H11进行多重PCR鉴定、Vero细胞毒性试验、ESBL试验和21种抗生素的药敏试验，并结合NCCLS标准进行判定。结果 血清凝集反应中O26抗原和H11抗原都呈强凝集，且不自凝；生化反应呈现大肠杆菌的典型反应；rfp O157基因、stx1基因和stx2基因均为阴性，hlyA基因和meA基因为阳性；Vero细胞毒性试验阴性；ESBL，试验阳性；对多种抗生素具有耐药性。结论 该株E．coli O26：H11为一不产类志贺氏菌毒素的菌株，但ESBL阳性，具有多重耐药性。     

慢性乙肝外周血单个核细胞APOBEC3G mRNA水平与HBV病毒及IFN-γ关系的研究

目的 探讨慢性乙肝患者外周血单个核细胞(PBMC)APOBEC3G mRNA的水平,以及其与IFN-γ mRNA、血清HBV病毒载量及ALT的关系.方法 用实时荧光定量RT-PCR的方法检测27例慢性乙肝患者以及16名健康人PMBC中APOBEC3G和IFN-γmRNA的水平,并分别检测每个乙肝患者血清HBV病毒载量及肝功能ALT.结果 慢性乙肝患者PBMC中APOBEC3G mRNA的表达水平高于健康对照组,差异具有显著性(P＜0.01),IFN-γmRNA无明显增高,A3G还与患者血清中的病毒载量呈正相关(r=0.73,P＜0.01),但与IFN-γ及ALT水平无关(P＞0.05).结论 表达增高的APOBEC3G蛋白可能只是HBV慢性感染的伴随表现,APOBEC3G蛋白是否具有抗HBV临床应用价值,还需要更加深入的研究探讨.