CIK联合DDP对卵巢癌细胞株SKOV-3的杀伤效应

目的探讨多种细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)联合DDP对卵巢癌细胞株SKOV-3的杀伤效应。方法用健康人外周血单核细胞(PBMC)在体外用多种细胞因子诱导成CIK细胞,于培养14天收获CIK细胞作为效应细胞,流式细胞术分析其表型特征。将CIK细胞培养液上清作用于SKOV-3细胞,于培养24及48 h用流式细胞仪检测SKOV-3细胞的凋亡情况。杀伤实验共分为A1~4CIK作用组;B1~7DDP作用组;C1~2CIK联合DDP作用组;采用MTT法检测CIK和DDP对SKOV-3的生长抑制效应。结果 CIK细胞体外培养14 d时CD3+CD56+双阳性细胞数量达38.7%;SKOV-3与CIK细胞培养液上清共培养24 h及48 h后凋亡率分别为(12.30±1.47)%和(27.13±2.03)%;CIK及DDP对SKOV-3细胞的抑制率随着效靶比和药物浓度的提高及作用时间的延长而提高。而两者联合对SKOV-3的杀伤作用明显高于单一因素。结论 CIK细胞可通过诱导卵巢癌SKOV-3细胞凋亡发挥较强的杀伤作用。联合CIK治疗可明显增强DDP对卵巢癌SKOV-3细胞的杀伤作用。     

肿瘤射频消融裂解物负载的DC—CIK细胞体外抗肿瘤活性实验研究

目的研究负载射频消融肿瘤原位裂解物的树突状细胞（Dc）联合细胞因子诱导杀伤活性细胞（CIK）体外抗肿瘤活性。方法制备BALB／C小鼠脾脏来源的CIK细胞及骨髓来源的Dc。建立射频消融灭活小鼠皮下结肠癌的实验模型,将其原位裂解的肿瘤组织反复冻融后取上清,lowry蛋白定量法定量,以终浓度5μg／ml载培养第5天的Dc（即Ag-Dc）,2d后再与培养第7天的CIK细胞共培养48h,流式细胞术分析其表面共刺激分子的表达,细胞增殖与毒性检测试剂盒（CCK-8试剂盒）检测其体外杀伤活性。结果DC表面分子表达共刺激分子CD86＋ CD11c＋、MHCⅡ＋ CD11c＋、MHCⅡ＋ CD80＋双阳性细胞百分含量分别为9．50％、42．4％、53．4％;Ag-DC表面分子表达共刺激分子双阳性细胞百分含量明显提高,分别为19．2％、74．2％、61．1％。CIK细胞培养第1天,CD3＋ NK1．1＋双阳性的百分含量为1．45％,第7天CD3＋ NK1．1＋双阳性表达明显提高为36．9％。Ag—DC—CIK细胞对结肠癌细胞C26的杀伤活性明显高于DC-CIK、CIK细胞,且相同效靶比下前者的杀伤活性明显高于后者。效靶比为5：1时,Ag-DC-CIK细胞杀伤率为（74．9±3．5）％,DC-CIK细胞杀伤率为（71．2±2．1）％,CIK细胞杀伤率为（68．7±2．9）％,差异有统计学意义（F=7．007,P=0．007）;效靶比为10：1时,Ag—DC-CIK细胞杀伤率为（82．3±4．5）％,DC-CIK细胞杀伤率为（77．1±5．1）％,CIK细胞杀伤率为（72．7±2．8）％,差异有统计学意义（F=7．727,P=0．005）;效靶比为20：1时,Ag-DC-CIK细胞杀伤率为（83．2±1．9）％,DC-CIK细胞杀伤率为（77．2±4．2）％,CIK细胞杀伤率为（73．0±2．6）％,差异有统计学意义（F=16．594,P=0．000）。结论负载肿瘤射频消融原位裂解产物的DC联合CIK细胞可以提高体外细胞毒活性,为肿瘤综合治疗提供新策略。     

虫草素及其代谢物3′-脱氧肌苷在大鼠体内的药动学

目的 建立血浆虫草素及代谢物3’-脱氧肌苷(3′-Deo)的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)测定方法,研究其在大鼠体内的药动学。方法 以2-氯腺苷(2-Chl)为内标,甲醇沉淀蛋白,色谱柱为Kinetex C₁₈(3 mm×100 mm, 2.6μm),流动相为水(5 mmol·L^-1乙酸铵)-甲醇溶液,梯度洗脱。电喷雾离子源,正离子多反应监测。研究大鼠灌胃虫草素(10 mg·kg^-1)后血浆虫草素及3′-Deo药动学。结果 虫草素和3′-Deo分别在0.5～100和1～200 ng·mL^-1范围内线性关系良好,定量下限分别为0.5和1 ng·mL^-1。大鼠灌胃虫草素后,血浆虫草素浓度较低,主要转化为3′-Deo。虫草素和3′-Deo的峰浓度(C_max)分别为(5.4±3.4)和(142.0±50.0) ng·mL^-1,血药浓度-时间曲线下面积(AUC_{0-360 min})分别为(658.4±459.3)和(...     

BTLA在肿瘤免疫中的作用及其临床意义

继程序死亡分子（PD-1）与细胞毒性T细胞相关抗原-4（CTLA-4）之后,CD28家族的新成员B、T淋巴细胞弱化因子（BTLA）已成为新的研究热点。BTLA表达谱介于PD-1和CTLA-4之间,它不仅表达于T细胞,在B细胞、NK细胞、巨噬细胞和树突状细胞中也有表达。BTLA与其配体结合传递共抑制信号,在机体抗肿瘤免疫应答中发挥负性调节作用,并与肿瘤的免疫逃逸机制相关,可能成为肿瘤生物治疗潜在的靶点。     

细胞因子诱导的杀伤细胞治疗老年人胃癌的次数对其生存期的影响

Objective To investigate the relevance between the times of cytokine-induced killer cell (CIK cell) adoptive immunotherapy and the survival of the elderly patients with gastric cancer.Methods Lymphocyte separation medium was used to isolate mononuclear cells, and then the cultured CIK cells were infused back into the patients with gastric cancer. A retrospective cohort study was adopted by using Kaplan-Meier to estimate median survival time and survival rate, using Log-rank test to analyze the impact of clinical factors on survival rate, and using RR and 95% CI to estimate the contact intensity of death outcome, survival time and CIK cell treatment. Results There were nostatistically significant differences in gender,age, tumor site, histological type, invasion depth, lymph node metastasis, pathological grade, tumor size or tumor distribution between chemotherapy group and CIK treatment group (all P＞0.05). The median survival time of patients with gastric cancer was significantly longer in CIK treatment group than in chemotherapy group (61 vs. 21, χ2=10.215, P=0.001). Compared with the patients treated by chemotherapy alone, the increased times of CIK treatment induced more survival rate and 2-5 years life spans (χ2=12. 461, P=0.006). Conclusions With the treatment that CIK cells are infused back into the elderly patients with gastric cancer, the risk of death is reduced, and the lifespan is prolonged, which is associated with the CIK cell treatment times.     

胃癌患者血清白细胞介素6、肿瘤坏死因子α的测定及其临床意义

背景与目的:胃癌的发生、发展与宿主抗肿瘤免疫功能状态密切相关.当宿主免疫功能低下时,免疫监视作用下降,胃癌发生率升高.无论是定位生长还是远处转移,肿瘤细胞始终受机体免疫系统的监视.肿瘤坏死因子α (tumour necrosis factor-alpha,TNF-α)和白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)分别是Th1型和Th2型免疫反应的关键分子.本研究通过测定胃癌患者血清TNF-α、IL-6水平,阐明其与胃癌患者免疫状况及进展、预后的关系.方法:应用酶联免疫法(ELISA)测定73例胃癌患者和59名正常对照者血清中IL-6、TNF-α水平,并对手术前1天和手术后10天以及不同分期的胃癌患者血清IL-6、TNF-α水平进行比较.结果:胃癌患者术前血清IL-6、TNF-α水平与术后及正常对照组相比差异具有统计学意义,术后血清TNF-α水平与正常对照组相比差异具有统计学意义(P＜0.05),术后血清IL-6水平与正常对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05).Ⅲ期、Ⅳ期胃癌患者血清IL-6、TNF-α水平高于Ⅰ- Ⅱ期患者(P＜0.05),Ⅲ期与Ⅳ期相比,血清IL-6、TNF-α水平差异无统计学意义(P＞0.05).结论:提示IL-6、TNF-α可能是反映胃癌进展及预后的新的标志物.     

CMTM家族的生物学功能及其作用机制

[摘要] CMTM家族作为一个新的基因家族,在免疫、生殖等系统以及多种肿瘤的发病机制中起到重要作用。CMTM家族中,CMTM1 可影响细胞增殖,导致肿瘤发生;与非小细胞肺癌（NSCLC）患者的化疗耐药和预后有关。CMTM2 通过AP-1、CREB通路一定程度上影响HIV-1 转录,同时在男性生殖系统中起重要作用。CMTM3 等位基因失活或甲基化使其丧失对细胞增殖的负性调控能力,是胃癌独立的预后指标。CMTM4 调控细胞周期影响肿瘤细胞增殖,通过对PD-L1 的协同保护参与免疫逃逸。CMTM5 在许多肿瘤中沉默表达,参与肿瘤发生发展相关的信号通路。CMTM6 协同PD-L1 参与免疫逃逸,是潜在的免疫治疗靶点。CMTM7 在NSCLC中通过Rab5 控制EGFR-AKT信号影响肿瘤发展,且与胃癌发展相关。CMTM8 通过MARVEL区域影响EGFR和相关信号通路,调控细胞增殖、分化和凋亡等。上述重要发现,为研究肿瘤的发生发展及肿瘤基因治疗提供了新思路。     

食管癌放疗患者血清TSGF水平动态变化及临床价值

目的探讨食管癌患者放疗前后血清TSGF水平变化的临床价值。方法用TSGF诊断试剂盒检测并动态观察食管癌患者放疗前后TSGF水平变化。结果57例食管鳞癌患者放疗前血清TSGF平均值为67.7±1.6U/ml,显著高于健康对照组(t=6.822P=0.000);22例有纵隔或(和)颈淋巴结转移的患者与无淋巴结转移者35例比较,血清TSGF均值分别为77.2±2.3U/ml和62.4±1.6U/ml,t=5.399,P=0.000;放疗前后血清TSGF值持续阳性者或血清TSGF值由阴性转为阳性者1年内复发转移率明显增高(P<0.05)。结论食管癌放疗前后血清TSGF水平的动态变化是监测肿瘤复发转移的重要指标。