超声辐照联合微泡转染短发卡状重组质粒诱导裸鼠宫颈癌移植瘤凋亡的研究

目的探讨超声辐照联合微泡对靶向存活素的短发卡状重组质粒（survivin—shRNA）的转染增效作用及其安全性,分析其凋亡诱导效应和增殖抑制作用。方法将荷人宫颈癌（Hela）裸鼠18只随机分为3组,每组6只。1组：质粒＋超声辐照组,注入质粒溶液后予以超声辐照;2组：质粒＋微泡＋超声辐照组,注入质粒及微泡复合物后辐照;对照组：不予任何处理。对组织样本行冰冻切片、组织学检查、转染率检测。采用免疫组化SABC法检测移植瘤增殖细胞核抗原（PCNA）及survivin蛋白在各组肿瘤标本中的表达,测定凋亡指数（AI）和增殖指数（PI）。结果2组的移植瘤内荧光表达率显著高于对照组、1组（P〈0．01）;裸鼠其他器官组织中未观察到基因表达,且未观察到明显的组织损伤;PCNA及survivin蛋白表达下降,AI明显升高,PI明显减少,与对照组及1组比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论超声辐照联合微泡能显著增强基因转染效率,无明显副作用,联合Survivin—shRNA能明显诱导裸鼠体内肿瘤凋亡,抑制细胞增殖。     

TPGS修饰的青蒿琥酯脂质体及其代谢产物在大鼠体内组织分布研究

青蒿琥酯作为一种抗疟药物被广泛使用,制成脂质体可以改变其生物利用度差的特点,同时其在体内的组织分布可能改变,因此需对TPGS修饰的青蒿琥酯脂质体(ARS-TPGS-Lipo)在大鼠体内的组织分布进行研究。采用薄膜水化法制备ARS-TPGS-Lipo和青蒿琥酯脂质体(ARS-Lipo),同时建立LC-MS/MS检测大鼠组织中青蒿琥酯(ARS)和双氢青蒿素(DHA)含量的方法,并测定大鼠尾静脉注射ARS-TPGS-Lipo,ARS-Lipo和ARS注射液(5 mg·kg~(-1))后不同时间点的组织药物浓度。实验结果显示该方法适用于分析生物样品中的ARS和DHA的含量。ARS-TPGS-Lipo,ARS-Lipo和ARS组中的ARS及其代谢产物DHA在大鼠的组织中分布差异较大,使用TPGS修饰后的青蒿琥酯脂质体中的药物浓度在肝脏中浓度最高,且有显著性差异。ARS经注射给药后1 h内快速消除;ARS-Lipo组测得的ARS和DHA在肝、脾中的浓度较高;而ARS-TPGS-Lipo组中测得的ARS和DHA仅在肝脏中的浓度显著提高(P0.05)。     

超声靶向微泡破裂法介导RNA干扰沉默survivin基因对宫颈癌HeLa细胞凋亡的影响

目的:通过超声靶向微泡破裂(ultrasound targeted microbubble destruction ,UTMD)法介导基因转染,观察RNA干扰对宫颈癌HeLa细胞survivin基因的沉默效应和诱导细胞凋亡的作用.方法:构建靶向survivin基因的短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)表达质粒,将其和微泡共同处理后加入HeLa细胞并予以超声辐照,以空白细胞、单纯质粒、单纯超声辐照、质粒+超声辐照和质粒+Lipofectamine转染作为对照;采用荧光显微镜和FCM法评估基因转染效率,同时对超声辐照参数进行优化;应用FCM法和Hoechst染色及DNA ladder分析法检测细胞凋亡,应用RT-PCR检测survivin mRNA水平的变化.结果:经酶切鉴定及测序分析证实重组质粒构建成功.HeLa细胞采用UTMD处理后,基因转染率显著增加(P＜0.01),并在超声强度为1.0 W/cm2、辐照3 min的条件下最为显著(P＜0.01).PT-PCR检测结果显示,质粒与微泡共同作用加超声辐照组的survivin mRNA抑制率为(83.33±2.73)%,均显著高于各对照组(P＜0.01);FCM法检测结果显示,该组细胞的凋亡率同样显著高于各对照组(P＜0.01);Hoechst染色及DNA ladder检测结果显示,只有经脂质体或UTMD转染处理后的细胞中可检测到明显的细胞凋亡形态及凋亡梯带,其余各组均未检测到明显凋亡.结论:UTMD可有效增强表达质粒的转染效率,是一种新的、有应用前景的非病毒基因转移体系.UTMD介导RNA干扰沉默survivin基因可诱导明显的细胞凋亡,为肿瘤基因治疗及研究提供了新的方法.     

门诊首发首诊精神分裂症患者首次用药情况分析

本文按就诊顺序,统计了1998.2-1998.9到我院门诊的首发首诊精神分裂症105例病人(包括分裂样精神病10例)的首次用药情况,其中男56例,女49例,男女之比为1.14:1;年龄平均24.7±6.8岁;职业、学历、婚否不限.     

如何上好儿科实践技能课

为了探讨如何上好儿科实践技能课,认为应教会学生掌握问诊内容、技巧和方法,做好病史采集;注重儿科体检特点,反复进行训练;通过临床病例分析,培养临床思维方法。通过儿科实践技能培训,学生进入临床后能够较快地适应临床工作,具备了一定的病史采集、儿童体检、临床病例分析的能力,能更好地完成儿科的生产实习任务。     

经阴道超声引导下未成熟卵泡介入术治疗多囊卵巢综合征

目的评价经阴道超声引导下未成熟卵泡介入术（TUG-IFI）对多囊卵巢综合征（PCOS）的疗效。方法对接受辅助生殖技术治疗中低反应的PCOS患者行TUG-IFI，比较术前、后内分泌水平、排卵率、妊娠率以及相关超声参数的差异。结果87．50％患者在术后发生自发排卵，术后累积妊娠率为57．14％。术后血清睾酮（T）、黄体生成素（LH）及黄体生成素与卵泡刺激素的比值（LH／FSH）均显著低于术前（P〈0.01）。雌二醇（E2）、FSH和催乳素（PRL）的术前、后比较，差异均无显著性意义（P〉0．05）。HCG注射日，优势卵泡（〉18mm）和A型内膜明显增多，内膜明显增厚（P〈0．01），小卵泡数目较术前减少，卵巢体积缩小（P〈0．05）。结论TUC-IFI是治疗PCOS患者有效、创伤小的方法，能有效改善患者卵巢功能，有利于排卵和妊娠。     

改革儿科教学方法,提高儿科教学质量

<正>教学是一门科学,也是一门特殊的艺术。教学的过程是教学信息的传递过程,它包括了老师的备课和授课,备课就是要解决教学信息的变换问题,这就要求教师在备课中,在掌握教材内容的基础上,主     

女人不适口难开,我们来帮你

没什么不好意思的,有顾虑就大胆说出来!大笑居然笑出尿液、生理期下阴总有些难闻的气味、炎热天气外阴长出些小疙瘩、经常清洗阴部但偶尔还是有点瘙痒……这些常见的妇科小问题往往让女性觉得难堪而羞于对人启齿。有些人觉得为了这些小麻烦特意看医生过于小事化大,也有人面对医生扭扭捏捏半天依旧不好意思说出口。但这些不好启齿的小秘密如果一直得不到答案,就不免让女性们担忧——这不会是什么疾病的预兆吧?     

戒酒致震颤谵妄13例临床分析

本文对戒酒致震颤谵妄13例患者临床资料进行分析,发现患者初饮年龄偏小,持续饮酒时间长,饮酒量大,家庭饮酒史阳性率高,突然戒酒均出现程度不同的意识障碍,并在此基础上产生各种精神症状,以动物性幻视多见,形象逼真。躯体并发症多,多系统、多器官受损,尤以神经系统、消化系统受损严重,营养不良多见。说明长期大量饮酒严重影响人们的身体健康,戒酒势在必行。     

稳心颗粒治疗急性冠脉综合征并发心律失常疗效分析

目的 观察稳心颗粒与胺碘酮联合治疗急性冠脉综合征并发心律失常的疗效.方法 选取符合入选标准患者100例,随机分为两组.对照组50例,采用抗凝、抗聚、抗栓、降压、调脂等治疗.并应用胺碘酮抗心律失常,第一周胺碘酮每次0.2g.每日3次;第2周每次0.2g,每日两次;第3周开始每日0.2g至观察结束.观察组50例,在对照组治疗基础上加用稳心颗粒9 g,每日3次(无糖型).两组进入入选标准时均行肝肾功能,甲状腺功能,胸部X线片,常规心电图、动态心电图,以后每周进行复诊,进行2min查体听诊心脏,观察心律失常的频次及心电图缺血改善情况.第4周包括测肝肾功能,甲状腺功能,胸部X线片,常规心电图、动态心电图检查,同时监测药物不良反应.结果 观察组心肌缺血改善总有效率为92％,对照组为80％,两组有统计学意义(P＜0.05).观察组心律失常改善总有效率为94％,对照组78％ (P＜0.05).不良反应两组无统计学意义.结论 稳心颗粒可以改善急性冠脉综合征患者心肌缺血、心律失常等.