抗人CD25嵌合抗体基因的构建及其瞬时表达研究

目的:构建抗人CD25嵌合抗体基因并在哺乳动物细胞中进行瞬时表达和初步鉴定。方法:采用RLM-RACE法克隆WuTac抗体可变区和信号肽序列,并利用基因拼接法构建嵌合抗体基因。用脂质体法瞬时转染三种哺乳动物细胞,并使用ELISA、FCM、WB、Dot blot和免疫荧光法进行检测。结果:成功克隆WuTac抗体可变区和信号肽序列,并构建了抗人CD25嵌合抗体表达质粒。瞬时转染结果表明所表达的嵌合抗体保留了亲本抗体WuTac的抗原结合力。结论:成功构建了抗人CD25嵌合抗体基因,为其进一步研究打下基础。     

H2O2诱导的肝星状细胞凋亡后胶原的变化

目的 观察Ⅰ型胶原(COL Ⅰ)和Ⅲ型胶原(COLⅢ)在H2O2诱导的肝星状细胞(HSC)凋亡后的变化.方法 用流式细胞术检测100 nmol/L的H2O2诱导HSC不同程度的凋亡;应用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞内COL Ⅰ、COLⅢ mRNA的表达及变化.结果 用100 nmol/L H2O2诱导HSC凋亡(凋亡率分别5.86%、58.55%、71.98%),COL Ⅰ、COL Ⅲ在活化的HSC-T6细胞内均高表达,且伴随凋亡的增加,表达急剧下降,COL Ⅰ的变化更明显.结论 诱导HSC凋亡可减少胶原基因的表达.     

登革热病原学及疫苗研究进展

随着气温的升高,登革热发病率大幅度增加,在亚洲一些国家登革出血热成为儿童住院和死亡的原因之一.登革热是一种蚊媒传染病,已成为热带及业热带地区重要的公共卫生问题,目前还没有疫苗和有效的治疗方法.各国非常需要有效、价格合适、可提供长期免疫保护的4价登革热疫苗来控制该病的流行,但目前仅靠控制蚊媒的传播米预防登革热的流行,安全有效的登革疫苗仍处于实验阶段.     

多靶点蛋白酪氨酸激酶抑制剂的研究进展

肿瘤的发生与发展涉及多种受体或信号通路网络。多项研究结果表明,多靶点药物的治疗效果优于单靶点药物,多靶点抑制肿瘤信号转导是肿瘤防治药物重要的研究方向。本文根据化学结构分类,对多靶点蛋白酪氨酸激酶抑制剂及其发展前景做简要综述。     

Tpr-Met转化的Ba/F3稳定株的构建

目的:建立一种可用于高通量筛选c-Met抑制剂的细胞模型.方法:采用电转染将Tpr-Met表达载体导入Ba/F3细胞中并筛选出能够稳定表达Tpr-Met的细胞株.而后对这种稳定株的白细胞介素3(IL-3)非依赖性增殖、Tpr-Met的表达及下游通路的活化、c-Met抑制剂SUl1274对细胞增殖和信号通路的抑制作用进行全面评价.通过酶标仪检测细胞MTS吸光度值判断细胞的增殖水平,通过Western blot法检测Tpr-Met的表达及下游通路的活化、c-Met抑制剂SU11274对细胞信号通路的抑制作用.结果:获得稳定表达Tpr-Met的Ba/F3细胞株,该细胞株呈现IL-3非依赖性生长；能够表达持续活化的Tpr-Met；下游信号通路中关键分子Erk的磷酸化水平显著提升；c-Met特异性抑制剂SU11274通过抑制Tpr-Met磷酸化抑制下游信号通路的活化并抑制稳定株细胞增殖.结论:成功构建了Tpr-Met转化的Ba/F3细胞株.     

图书资料室读者服务工作浅议

当今世界 ,各国经济的发展主要有赖于科学技术的发展水平 ,而图书资料是交流科学技术的一条重要渠道 ,图书资料室是各级科研技术人员获得情报信息 ,学习业务 ,知识更新的知识库和前沿阵地 ,作为一个图书情报工作者 ,主动的、有效的做好读者服务工作是应尽的责任 ,尽管这是浅显的道理 ,又是经常讨论的问题 ,但名符其实做到也并非那么容易 ,根据几年的工作实践 ,做好读者服务工作有以下几点看法和体会。1　明确读者服务工作的意义读者服务工作是以书刊直接为读者服务的工作 ,这是图书室工作的核心 ,也是衡量图书工作的标志 ,建立藏书 ,制作目…     

不同压力的PEEP和CPAP在电视辅助胸腔镜手术下行单肺通气时对氧合作用及分流的影响

目的评价呼气末正压通气(PEEP)和连续气道正压通气(CPAP)在电视辅助胸腔镜手术(VATS)行单肺通气麻醉时对患者血氧合作用的影响.方法选择30例在VATS下行肺叶切除的单纯肺癌患者,随机分为A、B两组.A组于手术开始后15 min(A1)、单肺通气后15 min(A2)、术肺0 CPAP健肺5 cm H2O PEEP后15 min(A3)、术肺5 cm H2O CPAP健肺0 PEEP后15 min(A4)、术肺5 cm H2O CPAP健肺5 cm H2O PEEP后15 min(A5)分别监测平均肺动脉压(PAP)、平均动脉压(MAP)、心率(HR)、动脉血氧分压(PaO2)、动脉血氧饱和度(SaO2)、混和静脉血氧饱和度(SvO2)并计算分流(Qs/Qt)值.B组用10 cm H2O PEEP和10 cm H2O CPAP重复上述过程.结果A组间PAP、MAP、HR、PvO2、SaO2以及SvO2无显著性差异(P＞0.05);与A2(PaO2119.5±28.7,Qs/Qt35.7±6.3)时相比,A3时的PaO2(200.8±30.6)显著增加,Qs/Qt值(23.8土6.5)显著降低;A4时的PaO2(221.4±16.6)显著增加,Qs/Qt值(24.8±5.9)显著降低;A5时的PaO2(240.2±46.3)显著增加,Qs/Qt值(23.5±6.4)显著降低(P＜0.05),A3,A4,A5间相比较无显著差异(P＞0.05).B组间PAP、MAP、HR、PvO2、SaO2以及SvO2无显著性差异(P＞0.05);与B2相比,B3、B4、B5 PaO2显著增加、Qs/Qt值显著降低(P＜0.05).但与A组相比无显著差异(P＞0.05).结论在VATS行单肺通气麻醉时,健肺使用PEEP、患肺使用CPAP或联合使用PEEP和CPAP能提高患者手术中的氧合作用,降低Qs/Qt值;与5 cm H2O PEEP和CPAP比较,10 cm H2O PEEP和CPAP不能进一步改善PaO2和Qs/Qt.