肾上腺素能β受体在人膀胱逼尿肌中作用的年龄相关性研究

目的研究肾上腺素能β受体膀胱逼尿肌反应性的年龄相关性改变及其可能机制.方法采用细胞功能试验来检测10位老年患者逼尿肌细胞对异丙肾上腺素(肾上腺素能β受体激动剂)、BRL37344(选择性β3受体激动剂)、forskolin(腺苷酸环化酶激活剂)和DBcAMP(二丁基环腺苷酸)的反应性.同样用非选择性肾上腺素能β受体配基[3H]-双氢心得舒来进行放射性配基结合测定.并以青年人的膀胱逼尿肌标本作为对照.结果对照组和老年组之间KCl诱导的逼尿肌收缩程度无显著性差异;与对照组相比,老年组对异丙肾上腺素、BRL37344和forskolin的反应性分别下降了15.0%、17.6%和12.6%(P＜0.001),异丙肾上腺素和BRL37344的pD2(-IgEC50)值也显著降低;两组间对DBcAMP的反应性并无差别;随年龄增加逼尿肌细胞的肾上腺素能β受体的最大结合部位显著下降,但平衡解离常数却无明显差别.结论老年人膀胱平滑肌存在对肾上腺素能β受体的反应性下降,这可能是造成老年人膀胱顺应性减退的原因.受体密度的降低和腺苷酸环化酶活性的下降导致的cAMP合成减少可能是造成肾上腺素能β受体反应性下降的分子基础.     

实验性肺纤维化细胞凋亡及Fas/FasL基因变化

目的　检测肺纤维化时细胞凋亡及Fas/FasL基因的变化,探讨细胞凋亡和基因变化在肺间质纤维化中的意义。方法　将 40只大鼠分为肺纤维化组及正常对照组,每组 20只,应用末端原位杂交(TUNEL)、原位杂交、免疫组化技术检测博莱霉素致肺间质纤维化大鼠肺组织细胞凋亡、Fas/FasLmRNA水平及蛋白表达的变化。结果　肺纤维化组大鼠肺组织中细胞凋亡指数为 55.3±12.2,对照组为 4 7±1 0,两组比较差异有统计学意义(t=13.06,P<0 .01),Fas及FasLmRNA肺纤维化组为(175.8±21.6, 5.2±1.6),正常对照组为 (26.6±1.9, 0.5±0.4),两组比较差异有统计学意义 (t分别为 21.7, 8.79;P均<0.01),肺纤维化组Fas、FasL蛋白表达分别为 956±96, 285±76,正常对照组分别为 491±96, 100±18,两组比较差异有统计学意义 (t=5.03, 12.81;P<0.01)。结论　肺间质纤维化时肺组织细胞凋亡上调,Fas/FasL基因上调蛋白表达增强,在肺纤维化发生、发展中起到重要的作用。     

碱性裂解液提取DNA法在环氧化酶亚型基因敲除小鼠基因型鉴定中的应用

目的:应用碱性裂解液法提取的DNA鉴定环氧化酶(COX)亚型基因敲除小鼠,为鉴定纯合子小鼠提供一种方便快捷、低成本、可靠的实验方法。方法:取子代小鼠耳缘组织于EP管中,用碱性裂解液提取基因组DNA,PCR扩增COX-1和COX-2基因片段,通过琼脂糖凝胶电泳对小鼠基因型作出鉴定。结果:碱性裂解液法提取的DNA能应用于子代小鼠的不同基因型的鉴定,即野生型(COX-1+/+;COX-2+/+)、杂合子(COX-1+/-;COX-2+/-)和纯合子(COX-1-/-;COX-2-/-)。结论:建立了碱性裂解液提取DNA法,并将该法成功应用于环氧化酶亚型基因敲除小鼠基因型鉴定中。     

两种尾套测压法测量不同体质量小鼠血压的应用

目的：探讨两种尾套测压法测量不同体质量小鼠BP的应用。方法：C57BL/6小鼠按体质量分为低体质量（〈28.5 g）和高体质量（≥28.5 g）组。用脉搏式和容量压力记录式血压计连续监测两组BP 5 d左右,当小鼠BP值趋于稳定后,开始记录BP值。结果：两种血压计测出的BP值在〈28.5 g组有统计学意义（P〈0.05）,在≥28.5 g组无统计学意义。结论：小鼠体质量〈28.5 g时,建议用脉搏式血压计,≥28.5 g时,两种仪器均可用。     

氧化应激在低压缺氧性肺动脉高压形成中的作用

目的观察低氧对血清中活性氧(ROS)水平的影响,探讨氧化应激在低压缺氧性肺动脉高压形成中的作用。方法将24只Wistar大鼠随机分为平原对照组(C组),缺氧组(H组),N-乙酰半胱氨酸组(N组),缺氧+N-乙酰半胱氨酸组(H+N组)。建立低压缺氧模型21 d后,测定其右心室收缩压(RVSP)和平均肺动脉压(mPAP);HE染色观察各组大鼠的肺动脉壁厚度;比色法测定血清中ROS的含量。结果与C组相比,H组RVSP、mPAP明显升高(均P<0.05),HE染色示H组肺动脉壁增厚,且血清中ROS水平明显升高(P<0.05);给予ROS清除剂NAC后,RVSP及mPAP降低,肺血管重塑减弱。结论低氧时氧化应激参与了低压缺氧性肺动脉高压的形成。     

特发性肺纤维化患者辅助性T细胞1/辅助性T细胞2的研究

目的 对特发性肺纤维化(IPF)患者辅助性T细胞1(Th1)/辅助性T细胞2(Th2)进行研究,探讨Th1/Th2能否反映疾病的严重性,能否预测疾病的进展.方法 入选83例IPF患者,应用酶联免疫吸附测定法检测所有受试者血清、支气管肺泡灌洗液(BALF)中γ干扰素(IFNγ)、白细胞介素-4(IL-4)水平,并进行相关性分析.结果 (1)基线资料:IPF患者血清、BALF中IFNγ/IL-4比值(0.8±0.3;0.8±0.3)较对照组(1.4±0.2;1.4±0.2)显著降低;血清、BALF中IFNγ/IL-4比值与病程、呼吸困难评分、第1秒用力呼气容积(FEV1)占预计值百分比、用力肺活量(FVC)占预计值百分比、肺总量(TLC)占预计值百分比、最大去氧饱和度、6分钟步行距离(6MWD)、CT间质纤维化评分显著相关(血清:r值分别为-0.426、-0.623、0.487、0.455、0.517、-0.491、0.263、-0.569,P值均＜0.05;BALF:r值分别为-0.434、-0.637、0.480、0.456、0.501、-0.507、0.253、-0.605,P值均＜0.05);血清中IFNγ/IL-4比值与CT磨玻璃影评分呈正相关(r=0.340,P＜0.01).(2)随访:IPF患者血清中IFNγ、IL-4、IFNγ/IL-4在糖皮质激素治疗者与非糖皮质激素治疗者间差异无统计学意义.随访6个月后的呼吸困难评分、FEV1占预计值百分比、TLC占预计值百分比、CT磨玻璃影评分、CT间质纤维化评分、IFNγ和IL-4较基线值显著恶化.血清中IFNγ/IL-4比值变化与呼吸困难评分、FVC占预计值百分比、TLC占预计值百分比、肺一氧化碳弥散量占预计值百分比、6MWD、CT间质纤维化评分的变化显著相关(r值分别为-0.297、0.462、0.315、0.353、0.420、-0.307,P值均＜0.05).结论 IPF患者血清和BALF中Th1/Th2存在失衡,Th1/Th2可能反映IPF的严重性,随访时血清中Th1/Th2的变化可能会预测IPF的疾病进展.     

多基因甲基化检测在尿路上皮癌中作用的研究

目的 探讨多基因甲基化检测在尿路上皮癌诊断中的价值.方法 应用甲基化特异性聚合酶链式反应检测36例膀胱尿路上皮癌和24例上尿路尿路上皮癌组织中GSTP1、APC、DKK-3、RASSF1A、DAPK、EDNRB、TNFRSF25、P16和MGMT共9种基因的甲基化状态.结果 在尿路上皮癌组织中RASSF1A、DAPK、EDNRB、TNFRSF25和P16基因异常甲基化的程度相对比较高,分别是83.3％、75.0％、85.0％、70.0％和55.0％,而APC、DKK-3、GSTP1和MGMT基因异常甲基化的程度相对较低,分别是3.3％、25.0％、23.3％和5.0％.甲基化程度与病理分级和分期没有显著关系(P＞0.05).在上尿路尿路上皮癌中,RASSF1A、DAPK、EDNRB、TNFRSF25和P16基因的甲基化率分别是91.7％、95.8％、83.3％、70.8％和33.3％,而在膀胱尿路上皮癌中,RASSF1A、DAPK、EDNRB、TNFRSF25和P16基因的甲基化率分别是77.8％、61.1％、91.7％、69.4％和69.4％.结论 在尿路上皮癌中RASSF1A、DAPK、EDNRB、TNFRSF25和P16基因甲基化过表达.DAPK和P16基因的甲基化检测可能有助于上尿路尿路上皮癌和膀胱尿路上皮癌的定位鉴别诊断.     

红毛五加水溶成分初报——甘露醇的分离与鉴定

刺五加[Acanthopanax]Senticosus(Rupr.et Maxim)Harms)为中国药典1985年版收载的药材。近十多年来,由于其具有与人参相类似的适应原样作用,应用日广。为开发新药源,我省有关单位曾发掘出其同属植物倒卵叶五加(A.obovatusHoo)并已正式用于临床。我们则对其另一同属植物红毛五加(A.giraldii Harms)进行系统的化学、药理研究。查红毛五加在我省分     

神经酰胺对人膀胱癌细胞凋亡诱导作用及其机制

目的 探讨神经酰胺（cer）对人膀胱癌细胞的凋亡诱导作用及其机制。方法 不同浓度C2-神经酰胺（C2-cer）作用于膀胱癌T24细胞，噻唑蓝（MTT）比色法检测细胞存活率，吖啶橙（AO）荧光染色、流式细胞术（FCM）检测细胞凋亡，并对半胱天冬酶（Caspase）-3活性、bcl-2蛋白含量和细胞色素C在细胞内的分布变化进行检测。结果 T24细胞存活率与C2-cer浓度呈负相关（r=-0．973，P＜0．01）。对照组和5、10、20、40μmol／L的C2-cer处理组凋亡率分别为2．95％、9．18％、14．23％、29．12％、48．46％，C2-cer处理组凋亡率显著高于对照组（P＜0．01）。Caspase-3活性随C2-cer浓度增加而增加，与对照组比较差异有统计学意义（P＜0．05）。在C2-cer作用下，T24细胞内bcl-2蛋白含量下降，细胞色素C向细胞质释放。结论 降低bcl-2蛋白表达水平，从而促进线粒体细胞色素C释放和Caspase-3激活可能是C2-cer诱导膀胱癌细胞凋亡的重要机制。     

微创内视镜下肾癌根治性切除术

目的 探讨微创内视镜技术治疗肾癌的临床价值。方法 回顾性分析2003年5月至2005年6月采用微创内视镜技术行47例根治性肾癌切除术患者资料。评价手术方法的优缺点。结果 47例手术时间75～135min，术中失血量120～220ml。术后镇痛药用量5～35mg（相当于硫酸吗啡量），术后引流管留置时间2～3d，术后进食时间6～18h，术后住院天数5～7d，随访1～24个月均健在，未见肿瘤复发。结论 微创内视镜根治性肾癌切除术将传统开放手术与腹腔镜技术相结合，可能成为一种比较理想的治疗肾癌的手术方法。