蛭蛇通络胶囊抗炎及舒张血管的有效组分辨识

目的 研究蛭蛇通络胶囊及其拆方组分肠吸收液对炎症和血管舒张的影响,并通过网络药理学方法探究拆方的有效性。方法 通过脂多糖（LPS）刺激小鼠巨噬细胞株RAW264.7产生炎症因子观察抗炎作用,离体血管活性实验观察舒张作用。通过数据库检索蛭蛇通络胶囊的化学成分及成分靶点,并将蛭蛇通络胶囊和水蛭、乌梢蛇、红花组分分别与炎症和血管舒张相交集,构建蛋白相互作用网络并富集分析。结果 按照蛭蛇通络胶囊的制备工艺路线进行拆方,制备各组分和全方的肠吸收液。均以含水蛭、乌梢蛇和红花组分效果最佳,能有效抑制炎症因子的表达及调节血管舒张的活性。获得蛭蛇通络胶囊抑制炎症共778个靶点,舒张血管共181个靶点,水蛭、乌梢蛇和红花组分抑制炎症共312个靶点,舒张血管共82个靶点。蛭蛇通络胶囊和水蛭、乌梢蛇、红花组分抑制炎症的基因本体（GO）生物学过程分析主要与调节激素水平和有机羟基化合物代谢过程有关,舒张血管主要涉及血液循环和分泌调节;抑制炎症与舒张血管的京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析都涉及环磷酸腺苷（cAMP）信号通路。结论 蛭蛇通络胶囊可通过抗炎和舒张血管发挥治疗脑卒中的作用,其中水蛭、乌梢蛇和红花是抗炎和舒张血管的主要有效药味组分。     

心舒宝片活血化瘀功效的有效物质辨识研究

目的:以含药肠吸收液-体外药理活性相结合的方法,初步辨识研究心舒宝片体现活血化瘀功效的有效物质。方法:制备心舒宝片全方及各单味药的肠吸收液,以抗凝血和抗氧化为反映活血化瘀的药理活性作用,寻找药效最强的单味药。抗凝血作用选择凝血4项和腺苷二磷酸(ADP)诱导血小板凝集实验,抗氧化作用选择1,1-二苯-2-三硝苯肼（DPPH)自由基清除实验。结果:抗凝血研究结果表明与空白对照组比较,山楂可延长凝血酶原时间(PT,P<0.01)和凝血酶时间(TT,P<0.05),且有较强的抗ADP诱导血小板凝集作用(P<0.01)。抗氧化研究结果表明与空白对照组比较,以丹参的DPPH自由基清除作用最强(P<0.01),其次分别为山楂、刺五加、白芍和郁金。结论:丹参和山楂可能是心舒宝片体现活血化瘀功效的重要组分,但尚不能代表全方的整体效应。     

基于网络药理学研究心舒宝片抗炎、血管舒张和心肌保护作用机制

通过实验研究心舒宝片全方及其单味药肠吸收液对抗炎、血管舒张和心肌保护的影响,并结合网络药理学阐明其潜在作用机制,Western blot进一步验证潜在核心靶点的表达情况。脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)刺激RAW264.7细胞产生炎症因子观察抗炎作用,离体微血管活性实验观察血管舒张作用,氧糖剥夺(oxygen-glucose deprivation, OGD)损伤H9c2细胞实验观察心肌保护作用。使用Herb数据库结合心舒宝片肠吸收液成分信息,获得心舒宝片化学成分,SwissTargetPrediction数据库查找成分作用靶点;GeneCards数据库查询抗炎、血管舒张和心肌保护相关的靶点。药物靶点分别与各疾病靶点以及疾病总靶点取交集后,进行蛋白-蛋白互作(protein-protein interaction, PPI)分析,得到核心靶点,最后将四者交集核心靶点导入Cytoscape 3.9.1进行基因本体论(Gene Ontology, GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes, KE...     

藏药十二味翼首散治疗“年仍奈”潜在机制的网络药理学研究＊

目的 通过网络药理学技术预测十二味翼首散治疗“年仍奈”的作用靶点及通路，分析其抗细胞因子风暴的多功效-多靶点-多通路的协同作用机制。方法 利用文献挖掘、TCMSP和化学专业数据库预测十二味翼首散化合物及候选靶点，通过STRING 11.0数据库富集十二味翼首散靶点的GO和KEGG通路，运用GeneCards数据库预测新型冠状病毒肺炎的候选靶点，取十二味翼首散靶点与新冠肺炎靶点交集结果生成VENN图，通过STRING 11.0数据库和Cytoscape 3.6.0软件构建交集成分靶点蛋白互作网络，富集其GO功能注释和KEGG通路。采用Cytoscape 3.6.0软件构建十二味翼首散治疗“年仍奈”的“药物-活性成分-靶点-通路-功效”网络结构图。结果 十二味翼首散通过作用于TNF、IL6、GAPDH、TP53、MAPK3、ALB、EGFR等核心靶点，调节免疫应答功能和炎症反应、病毒感染和血管通透及内皮细胞功能等信号通路，发挥了集热平稳、散热驱邪，抑制传播、安抚身心，调养身体的重要作用。结论 本研究探讨了十二味翼首散抗细胞因子风暴的潜在机制及防治“年仍奈”的不同阶段，为十二味翼首散的临床应用提供科学依据。     

脑心通胶囊肠吸收液保护过氧化氢致H9c2心肌细胞损伤的作用机制及有效药味筛选

目的:以肠吸收液为药物载体,利用拆方重组法筛选脑心通胶囊组方中发挥体外心肌保护作用的单味或多味中药,并丰富脑心通胶囊心肌保护作用的分子机制。方法:应用外翻肠囊法制备肠吸收液,体外构建过氧化氢(H2O2)损伤大鼠胚胎心肌细胞株(H9c2)模型,分为正常组、模型组、脑心通胶囊肠吸收液低、中、高剂量组(15.63,31.25,62.50 mg·L-1),每组3个复孔,实验重复3次。噻唑蓝(MTT)比色法检测心肌细胞的存活率,AnnexinⅤ-FITC/PI双染结合流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测水通道蛋白1(AQP1)蛋白的表达;同时拆方或构建重组方,MTT比色法定位脑心通胶囊组方中发挥心肌保护作用的单味或多味中药。结果:与正常组比较,模型组AQP1的表达升高(P0.01),心肌细胞凋亡数量增多(P0.05)。与模型组比较,脑心通胶囊肠吸收液中、高剂量组均可下调AQP1的表达(P0.05),脑心通胶囊肠吸收液高剂量组可抑制心肌细胞凋亡(P0.05)。与脑心通全方组比较,丹参、地龙和全蝎这3种单味药心肌保护作用与脑心通全方组相当,此3味药重组方高剂量组心肌保护作用强于脑心通全方组(P0.05),去3味药重组方心肌保护作用弱于脑心通全方组(P0.05)。结论:脑心通胶囊通过抑制AQP1表达和细胞凋亡,发挥心肌保护作用;丹参、地龙和全蝎是组方中发挥心肌保护作用的主要药味。     

疏风解毒胶囊肠吸收液对LPS诱导巨噬细胞释放细胞因子的影响

目的:研究疏风解毒胶囊肠吸收液对LPS诱导巨噬细胞释放细胞因子的影响。方法:采用外翻肠囊法制备不同浓度的疏风解毒胶囊肠吸收液,1μg·m L-1脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7制备炎症模型,液相蛋白芯片技术检测细胞因子在正常组、模型组、给药组表达的具体水平。结果:含疏风解毒胶囊肠吸收液能降低IL-1α、IL-1β、IL-2、IL-4、IL-10、IL-12(p70)、IL-13、IL-17、G-CSF、GM-CSF、IFN-γ、KC、TNF-α13种细胞因子的表达水平,且与雷公藤内酯醇组效果相当。结论:疏风解毒胶囊抗炎作用的机制与抑制上述炎症因子的释放有关。     

基于“肠外翻-心肌细胞”联用模型的益气活血方药效学作用评价及机制探讨

该研究首先建立过氧化氢(H2O2)诱导大鼠胚胎心肌细胞株(H9c2)氧化损伤模型,并筛选出益气活血方肠吸收液体外心肌保护作用的浓度范围,优选出4个剂量进行实验;通过考察益气活血方肠吸收液对H9c2的保护作用,从而为临床防治与氧化应激损伤相关心脏疾病提供参考;并通过对H9c2心肌细胞活力、细胞形态、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)等指标进行考察,对益气活血方肠吸收液作用机制进行初步评价探讨。结果显示,益气活血方肠吸收液对H2O2诱导H9c2心肌细胞损伤具有较好的保护作用,且呈现出一定的浓度依赖性,可提高SOD的活性,减少MDA的释放,从而降低异常细胞的形成,增强心肌细胞抗氧化能力,提高细胞活力,具有一定的保护作用。     

辣椒素减肥调血脂活性及其机制的研究进展

肥胖、高脂血症和糖尿病发病率呈逐年上升趋势,发病人群也趋于年轻化。而血脂、血糖代谢异常是导致肥胖、高脂血症和糖尿病的主要因素之一。目前,临床应用的调血脂化学药主要有他汀类、贝特类、胆酸螯合剂类等,但长期用药可能引起肝肾功能损害、肌肉损害及停药后血脂反弹等不良反应。因此,需要寻找和开发新的调血脂药物以弥补化学药的不足。辣椒素类成分是中药辣椒中的一类辣味成分,研究表明,这类成分可减轻体质量、减少体脂,并对血脂、血糖和血压的调节也有积极的作用。可通过与辣椒素受体1（TRPV1）结合,调节脂肪组织和脂肪细胞因子,刺激迷走神经,作用于肌肉组织及改变肠道菌群等多途径、多功能靶器官作用调节机体的糖脂代谢。梳理辣椒素调血脂活性及其机制的相关研究,并对其中共有的问题及如何更好地发挥辣椒素的调血脂作用给出了方向,以期为辣椒素后续的开发利用提供参考。