应用抑制性消减杂交技术筛选丙型肝炎病毒非结构蛋白2反式调节基因

目的:构建丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白2(NS2)反式调节基因cDNA消减文库,研究HCV NS2蛋白的反式调节基因.方法:应用抑制性消减杂交(SSH)技术筛选转染pcDNA3.1(-)-NS2和空载体pcDNA3.1(-)的HepG2细胞差异性表达基因,并进行生物信息学分析.结果:获得12个差异表达的已知蛋白基因和3个未知功能基因序列,包括:磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(glypican 3, GPC3)、酸性核糖体磷蛋白PO、核糖体蛋白L13a、整合素β1、天冬酰胺合成酶、信号肽酶、α-2-HS-糖蛋白、小核糖体蛋白多肽G、蛋白酶样亚单位、黄体酮受体、SDR家族脱氢酶8、Ras家族RAB4A、具有BTB/POZ结构的新蛋白、具有coiled-coil-helix结构的新蛋白、未知功能基因.结论:成功构建HCV NS2反式调节的相关基因cDNA消减文库,为今后进一步分析、研究病毒蛋白的致病机制提供了线索.     

医学科学技术与人类健康

生产力是生产要素中最活跃 ,最革命的因素 ,是社会进步和发展的最终决定力量 ,作为第一生产力的科学技术更集中体现了生产力要素中进取和创新的特质 ,科学技术是生产力的观点是在人类社会发展中发挥了巨大作用并经实践反复证明了的真理。世界生产力快速发展的一个根本原因 ,就在于科学技术的突飞猛进 ,正是基于科学技术在社会生产力发展中的地位越来越重要并起着决定性作用的实际 ,我国改革开放的总设计师邓小平提出了“科学技术是第一生产力”的著名论断 ,高度重视科技在现代化社会中的作用。邓小平高瞻远瞩 ,认定下世纪是高科技发展的世纪 ,高科技在改革着人们的生活质量和世界格局 ,从军事到经济 ,从克隆技术的突破到人造月亮的应用 ,无不证明了这一点 ,要加入世界先进大国行列 ,只有靠科技制胜。2 1世纪是科学技术激烈竞争和经济快速发展的时代 ,突出表现为能源、人口、环境、生态和健康四大问题。未来医学的首要任务将是与环境中一切有害因子作斗争 ,以保证人类正常生存与繁衍并要求医学科学不仅要逐步做到使人类无痛 ,无重病 ,无久病 ,还要求医学科学尽快地解决人类面临的各类难题 (如遗传疾病 ,癌症 ,器官移植 ,衰老等 ) ,为人类提供高质...     

bFGF在氟中毒大鼠切牙牙髓中的表达和意义

目的研究过量氟对大鼠牙髓细胞表达bFGF的影响。方法选择20只Wistar大鼠,随机分为2组I组(对照组)和II组(实验组)。8周后处死动物,利用磨片、HE染色、免疫组化染色技术观察过量氟对大鼠切牙形态及bFGF表达的影响。结果实验组大鼠切牙釉质、牙本质生长线明显,牙本质可见钙质小球,牙髓细胞及髓腔内侧牙本质bFGF表达明显弱于对照组,差异有显著性(P<0.01)。结论过量氟可抑制牙髓细胞表达bFGF,影响牙体硬组织的结构。     

患者对于捐赠多余冷冻胚胎用于治疗和研究的态度

约1／3行辅助生殖治疗的夫妇有多余的好的胚胎．一般多冷冻保存用于以后的移植。但仍有一部分胚胎被弃置。许多国家法律规定胚胎冷冻超过一定期限必须销毁．丹麦的胚胎冷冻最大期限是24个月，超过期限的胚胎或用于不孕症研究或销毁或用于干细胞研究，但供胚是被法律禁止的。丹麦每年约有2500个胚胎被销毁。而多余胚胎用于供胚或干细胞研究会遇到许多伦理、情感和法律上的问题。     

四妙散调节软骨细胞凋亡与自噬治疗膝骨关节炎大鼠的实验研究

目的:通过膝骨关节炎大鼠模型研究四妙散调节软骨细胞凋亡与自噬治疗膝骨关节炎(KOA)大鼠的作用机制。方法:8周龄SD大鼠27只,随机分为正常对照组、KOA模型组、四妙散组,KOA模型组和四妙散组采用前交叉韧带切除法制作KOA模型,手术6周后四妙散组以四妙散药液灌胃,正常对照组和KOA模型组以生理盐水灌胃。连续灌胃4周后取膝关节软骨组织,采用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术测定凋亡细胞所占比例,采用荧光定量PCR检测关节软骨组织中凋亡和自噬相关基因表达水平。结果:与正常对照组比较,KOA模型组大鼠关节软骨细胞凋亡率显著升高,关节软骨细胞中凋亡相关蛋白Fadd、Casp3的表达显著升高,自噬相关蛋白LC3的表达显著降低,差异均有统计学意义(P0.05)。与KOA模型组比较,四妙散组大鼠关节软骨细胞凋亡率显著降低,关节软骨细胞中凋亡相关蛋白Fadd、Casp3的表达显著降低,自噬相关蛋白LC3的表达显著升高,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:软骨细胞凋亡是KOA发病中的重要因素,该凋亡可能通过FADD-CASP3途径发挥作用。软骨细胞自噬作用的激活可抑制细胞凋亡,可能是延缓及控制KOA进展的一个新机制,四妙散可能通过该机制发挥治疗作用。     

不明原因反复自然流产患者种植窗期子宫内膜胞饮小泡的密度及黏蛋白-1的表达

目的 分析不明原因反复自然流产(URM)患者种植窗期子宫内膜上皮细胞表面胞饮小泡及种植因子黏蛋白-1(MUC-1)表达,探讨URM与子宫内膜接受性异常的相关性.方法 应用扫描电镜观察及免疫组化染色,分析URM患者(n=24)及正常生育妇女(n=22)种植窗期子宫内膜胞饮小泡形态和密度的改变及MUC-1的表达.结果 URM患者种植窗期子宫内膜上皮细胞表面胞饮小泡的密度明显低于正常生育妇女(P<0.01);URM患者成熟期胞饮小泡所占比例明显减少;MUC-1在URM患者子宫内膜腺上皮细胞和腔上皮细胞的表达也明显低于正常生育妇女(P<0.05).结论 URM患者种植窗期子宫内膜成熟期胞饮小泡数量减少,胞饮小泡总量下降,MUC-1表达下降,提示URM患者种植窗期子宫内膜接受性下降.     

Cohort Study on the Effect of a Combined Treatment of Traditional Chinese Medicine and Western Medicine on the Relapse and Metastasis of 222 Patients with Stage Ⅱ and Ⅲ Colorectal Cancer after Radical Operation

Objective： To evaluate the effectiveness of a comprehensive therapy of traditional Chinese medicine （TCM） in reducing the relapse and metastasis of stage Ⅱ and Ⅲ colorectal cancer based on conventional Western medicine （WM） therapy. Methods： Two hundred and twenty-two patients in total, diagnosed as stage Ⅱ and Ⅲ colorectal cancer from February 2000 to March 2006, were recruited from Xiyuan Hospital, China Academy of Chinese Medical Sciences and the General Hospital of Beijing Military Area. They were followed-up once every 3-6 months. Twenty cases dropped out from the cohort. The remaining 202 patients were all treated with routine WM treatment [including R0 radical operation, or chemotherapy or/and radiotherapy according to national comprehensive cancer network （NCCN） clinical guidelines]. These patients were assigned to two groups based on whether or not they were additionally treated with TCM comprehensive therapy （orally administered with a decoction according to syndrome differentiation, combined with a traditional patent drug over one year）. Ninety-eight patients from Xiyuan Hospital were treated with WM and TCM （combined group）, and 104 patients from the General Hospital of Beijing Military Area were treated with WM alone （WM group）. The demographic data at baseline were comparable, including the operation times, age, sex, TNM staging, and pathological types. The patients were followed-up for one to five years. Up to now, there are 98, 98, 77, 64, and 47 patients with 1, 2, 3, 4, and 5 years of follow-up in the combined group, respectively; and 104, 104, 97, 81, and 55 patients in the WM group, respectively. The results of the 5-year follow-up of all the patients will be available in 2011. Results： The relapse/metastasis rate of 1-, 2-, 3-, 4-, and 5-year were 0 （0/98）, 2.04% （2/98）, 11.69% （9/77）, 14.06% （9/64）, and 21.28% （10/47） in the combined group, and were 4.80%（5/104）, 16.35% （17/104）, 21.65% （21/97）, 25.93% （21/81）, and 38.     

单纯中医辨证治疗中晚期原发性肝癌的疗效及生存分析

目的观察单纯中医辨证治疗中晚期原发性肝癌的疗效,并根据中医证型、中药疗程、瘤体近期疗效等因素进行亚组分析,总结生存获益的相关因素。方法共收集122例中晚期原发性肝癌患者,剔除4例,脱落11例,共观察107例,辨证分为肝郁血瘀证、脾虚痰凝证、肝肾阴虚证,均采用单纯中医辨证治疗,观察总体生存期(OS)及生存率,并对中医证型、中药疗程、实体瘤近期疗效等因素进行亚组分析,统计分析其与OS的关系。结果在可评价的98例患者中,瘤体客观缓解率为11.22%,疾病控制率为60.20%。对所有病例进行生存分析显示中位OS为7.4个月,半年生存率为47%,1年生存率35%,2年生存率35%,3年生存率10%。脾虚痰凝证型组与肝郁血瘀证型组OS无明显差异。中药不同疗程亚组间OS比较差异有统计学意义(P0.05),且两两之间比较差异均有统计学意义(P0.05)。CR+PR组、SD组、PD组之间OS比较差异有统计学意义(P0.05),且两两之间比较差异均有统计学意义(P0.05)。结论单纯中医辨证治疗可以起到缩小肿瘤、稳定瘤体的作用,可以改善中晚期原发性肝癌患者的OS,但其生存获益可能与用药疗程、瘤体客观缓解等因素相关,尚未发现中医证型对生存疗效产生明显影响。     

中医干预化疗失败后晚期结直肠癌ctDNA状态及预后相关性研究

目的:通过对中医干预的化疗失败后晚期结直肠癌患者行ctDNA检测,探索ctDNA与预后的关系。方法:采用高通量二代基因测序(NGS)技术对血样进行检测。结果:在所有接受中医治疗的患者中,ctDNA低突变组较高突变组生存期较长(P=0.015)。KRAS突变者较KRAS野生型预后更差(P=0.015)。TP53基因突变,在左右半结肠中有显著差异(P=0.045),在是否合并肝转移方面具有显著差异(P=0.022),转移器官数目≥2的患者突变更多(P=0.049),脾肾两虚型TP53突变明显多于非脾肾两虚型(P=0.017)。APC基因在是否合并肝转移方面具有显著差异(P=0.025)。KRAS基因突变,有肝转移者更高(P=0.048),器官转移数目≥2的患者突变发生比例更高(P=0.006)。结论:ctDNA突变频率及KRAS基因状态可以预测中医治疗化疗失败后晚期肠癌的生存预后。     

中医药综合疗效标准在晚期肺癌中的应用

Tumorobjectiveremissionratecan＇tembodytraditionalChinesemedicinetreatmentsurviveassociatedwithtumorandtheeffectcharactersofhighlivingquality，buttomaketheassess－mentoftraditionalChinesemedicinetreatmenteffectmoreobjec－tive，qualitative，standardizationwillhelptoresolvethequestionoftraditionalChinesemedicineeffect犤１犦．Webroughtforwardtheconceptofsynthetictreatmentcriteriawiththehelpofsomeex－pertsonwesternandtraditionalChinesemedicine犤２犦．Followingisthesummaryofitsutilizationinlatesta…