胆管上皮细胞株抑制共培养的肝癌HepG2细胞株增殖

[摘要]目的 通过体外共培养肝内胆管上皮细胞株(mIBEC)与肝癌细胞株HepG2,探讨mIBEC对HepG2细胞株的可能作用。方法 体外共培养HepG2与mIBEC,采用CellTiter 96R○ AQueous One Solution Cell Proliferation Assay 分别测定并比较HepG2细胞单独培养时以及与mIBEC共培养后增殖的情况;实时定量PCR法分别测定HepG2细胞单独培养时以及与mIBEC共培养后其Ki67及caspase3 mRNA表达水平;蛋白质免疫印迹法分别测定HepG2细胞单独培养时以及与mIBEC共培养后其caspase3蛋白表达水平。结果 与mIBEC共培养后24~72 h,HepG2细胞增殖水平低于其单独培养时的水平(P<0.01),且伴有Ki67 mRNA表达的下调(P<0.05);与mIBEC共培养后,HepG2细胞caspase3 mRNA及蛋白表达水平较其单独培养时均上调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 mIBEC可抑制共培养的HepG2细胞增殖; caspase3激活表达上调可能是mIBEC抑制共培养的HepG2细胞增殖的机制之一。     

川木香煨制前后主要药效成分在人工胃、肠液及大鼠离体胃肠共孵液中的稳定性研究

目的:考察川木香煨制前后木香烃内酯(costunolide,COS)和去氢木香内酯(dehydrocostus lactone,DEH)在人工胃、肠液中的稳定性,及其在大鼠离体胃、小肠、结肠共孵液中的吸附、摄取或降解特征。方法:采用高效液相色谱法测定川木香煨制前后COS和DEH在人工胃、肠液及大鼠离体胃肠共孵液中的质量浓度,以大鼠离体胃、小肠、结肠与药物共孵的方法考察其物理吸附、摄取或降解参数。结果:川木香煨制前后COS在人工胃液稳定性较差,平均降解常数分别为0.758 0,0.531 1,煨制后稳定性有所提高,具统计学意义(P<0.01);川木香煨制前后COS和DEH在大鼠离体胃、小肠和结肠中的吸附、摄取或降解量(2 h)均较大,其中煨制前后COS和DEH在不同部位均有不同程度的差异。结论:川木香煨制前后COS在人工胃液中均不稳定,煨制后稳定性有所提高;大鼠离体胃、小肠、结肠对川木香煨制前后的COS和DEH均有明显的吸附、摄取或降解,并在不同部位有差异;为川木香煨制前后药效成分的吸收机制研究提供了参考。     

GC-MS分析藏香二十五味安神甘露挥发油化学成分

目的:用气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术对藏香二十五味安神甘露的挥发油成分进行分析。方法:水蒸气蒸馏法提取挥发油,用GC-MS法对其化学成分进行分离鉴定。结果:共分离鉴定出其中的32个化学成分,其中相对含量超过5%的成分主要有5种,含量从高到低依次为顺式-9-十六烯醛(15.13%)、异愈创木醇(11.25%)、丁香酚(11.81%)、雪松醇(9.82%)、愈创木醇(6.93%)。结论:可为二十五味安神甘露在卫生防御领域的推广提供一定的科学依据。     

四物汤不同提取工艺对血虚模型小鼠造血功能的影响

目的:探讨四物汤水提工艺、水提醇沉工艺及50％乙醇渗漉工艺对血虚模型小鼠造血功能的影响.方法:将小鼠随机分为6组,即空白对照组、模型组、阳性(复方阿胶浆)组、四物汤药物组1号(水提组)、2号(水提醇沉组)、3号(50％乙醇渗漉组).四物汤药物组每日ig给予四物汤1,2,3号(12 g生药·ks-1),阳性组给予复方阿胶浆(20 mL·kg-1),正常对照组与模型组给予等容量生理盐水,连续给药(生理盐水)8d.除空白对照组外,其余各组分别于第2,5日sc乙酰苯肼20,40 mg·kg-1,从第5日起,每日ip环磷酰胺40 mg·kg-1,连续4d.空白对照组同时注射等容量生理盐水.检测四物汤不同提取工艺药物组对血虚小鼠外周血象、脾脏和胸腺指数、骨髓有核细胞数的作用.结果:四物汤药物组1,2,3号均能升高血虚小鼠红细胞数、血红蛋白含量、白细胞数及骨髓有核细胞数,其中水提组和50％乙醇渗漉组差异性显著(P＜0.05);四物汤药物组1,2,3号均能显著增加血虚小鼠脾脏指数和胸腺指数(P＜0.01),其中水提组、50％乙醇渗漉组有强于水提醇沉组的趋势.结论:由3种提取工艺制得的四物汤对改善血虚模型小鼠的造血功能均有作用,以水提组和50％乙醇渗漉组较优.     

常规超声及超声新技术在周围型肺癌中的应用进展

近年来,随着超声技术的不断发展,常规超声及超声新技术在周围型肺癌中的作用,逐渐得到认可。本文就常规超声,以及超声造影、弹性成像、介入性超声及超声支气管镜等超声新技术,在周围型肺癌中的应用进展进行综述。     

超声及其新技术在周围型肺癌诊治中的应用进展

近年来,超声及其新技术不断发展,在周围型肺癌中的应用也得到了广大临床工作者的认可。本文就常规超声、超声造影、弹性成像、介入性超声及EBUS在周围型肺癌中的应用进展进行综述。     

厚朴酚与和厚朴酚HPLC含量测定方法及厚朴提取工艺研究

目的:比较不同提取溶媒对厚朴中厚朴酚与和厚朴酚含量的影响,研究其提取工艺参数。方法:采用HPLC法测定不同提取液中厚朴酚与和厚朴酚的含量。色谱柱DiamonsilTM C18(250×4.6 mm,5μm),甲醇-水(78:22);流速1.0mL.min-1;检测波长294 nm;柱温30℃;进样量5μL。结果:70%乙醇热回流提取效果最佳。结论:不同提取溶媒对厚朴中厚朴酚与和厚朴酚含量有影响,70%乙醇热回流提取法最好,为厚朴及其复方制剂提取工艺的规范化奠定基础。     

误诊为克罗恩病的原发性肠道 T 细胞淋巴瘤18例临床分析

目的分析误诊为 CD 的原发性肠道 T 细胞淋巴瘤（ITCL）的临床特点和预后,总结 ITCL及 CD 鉴别要点。方法回顾性分析2003年1月至2014年1月诊断为原发性 ITCL,同时在病程中曾误诊为 CD 者的病例资料,收集人口学、临床、病理及预后资料。收集177例在2012年1月至2014年1月确诊为 CD 的患者病史资料。分析对比两组的人口学、临床、病理及预后资料。连续变量采用 t 检验或Mann-WhitneyU 检验进行比较,分类变量则用卡方检验或 Fisher 确切概率法分析两组间是否有差异。结果共18例误诊为 CD 的 ITCL 患者纳入研究,其中男17例;中位确诊年龄为38．5岁（28．8岁,42．5岁）;中位确诊病程为6．00个月（3．75个月,13．25个月）;常见首发症状为腹痛（12／18）、腹泻（13／18）及贫血（13／18）,2例以急性肠穿孔为首发症状。16例患者病程中出现 B 组症状,其中发热13例、体质量下降16例、盗汗1例。12例患者在病程中出现1种或多种严重并发症,其中肠穿孔9例,消化道大出血7例,肠梗阻2例。而177例 CD 患者中,男104例,占58．8％,中位确诊年龄为22．0岁（18．0岁,29．0岁）;首发症状有腹痛（88．7％,157／177）、腹泻（55．9％,99／177）、贫血（63．8％,113／177）、发热（33．3％,59／177）及体质量下降（59．9％,106／177）等;病程中有30例（16．9％）患者出现肠穿孔（慢性为主）,12例（6．8％）出现肠梗阻,7例（4．0％）出现消化道大出血。与 CD 相比,确诊为 ITCL 的患者中男性多见（χ2＝8．837,P ＜0．01）,确诊年龄较大（U＝314．5,P ＜0．01）,病程较短（U＝385．0,P ＜0．01）,临床症状中体质量下降（χ2＝5．867,P ＜0．05）及发热较多见（χ2＝10．609,P ＜0．01）,并发症中肠穿孔和消化道大出血相对多见（χ2＝9．185、24．908,P 均＜0．01）。ITCL 的病变部位均为多发病灶,其中8例累及小肠,14例累及结肠,1例累及食管;内镜下均表现为溃疡性病变、大部分病灶呈节段性分布。与 CD 相比,在 ITCL 的肠道组织病理中淋巴细胞增生较常见[17／18比19．7％（35／177）,χ2＝42．844,P ＜0．01],肉芽肿罕见[0比42．8％（76／177）,χ2＝12．665,P ＜0．01]。18例 ITCL 患者中,仅9例接受化学疗法,中位生存时间为2个月。结论原发性 ITCL 症状缺乏特异性,易被误诊为 CD,临床工作中应提高警惕,注意鉴别。     

英夫利西单抗治疗克罗恩病黏膜愈合的血清差异蛋白质表达研究

目的:寻找与英夫利西单抗(infliximab,IFX)治疗克罗恩病(Crohn’s disease,CD)黏膜愈合(mucosal healing,MH)相关的血清蛋白质生物标志物。方法:采集7例经IFX治疗获得MH的CD患者治疗前(0周,A组)和治疗后(14周,B组)的血清,以及7例未获得MH的CD患者(0周为C组,14周为D组)的血清。采用荧光标记双向差异凝胶电泳的方法,比较A组与B组之间、C组与D组之间、A组与C组之间以及B组与D组之间的蛋白质组学差异,并对差异表达的蛋白质斑点进行基质辅助激光解吸/电离飞行时间串联质谱初步鉴定和生物信息学分析。结果:(1)A组与B组、C组与D组、A组与C组以及B组与D组之间比较分别存在36、3、10和31个差异表达的蛋白质斑点,共计存在44个显著差异表达的蛋白质斑点。(2)上述各组之间的差异斑点分别初步鉴定出17、2、2和15种蛋白质,共计存在19种差异表达的蛋白质,包括载脂蛋白E、载脂蛋白A-I、补体因子H等。(3)基于STRING数据库绘制了蛋白质网状功能图。结论:IFX治疗获得MH的CD患者治疗前后的血清蛋白质表达谱存在差异,获得MH和未获得MH的患者血清表达谱亦存在差异,其中19种蛋白质有可能成为预测CD患者使用IFX获得MH的生物标志物。