《刺法灸法学》实验教学改革体会

刺法灸法学是各种针灸技术的操作方法、临床应用及作用原理为主要内容的针灸分支学科,也是针灸理论和针灸临床之间的桥梁课程。通过对本课程多年的教学,在不断改革中体会到,掌握好本课程理论与实践课的结合是十分重要的,对指导针灸专业学生尽快提高动手能力,早日走上临床是关键的一步。特提出以下几点教改体会。     

针灸、穴位埋线治疗多囊卵巢综合征临床研究概况

多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)是青春期和育龄期妇女最常见的一种内分泌异常,以月经失调(月经稀发或闭经)、不孕、多毛、痤疮和肥胖为主症,是神经、内分泌系统及代谢调控失衡引起的疾病,是涉及神经内     

马利兰对贫血恒河猴珠蛋白肽链合成速率的影响

用马利兰治疗三只贫血恒河猴,使其β类珠蛋白肽链合成述率(γ/γ β)及搞碱血红蛋白(HbF)升高。珠蛋白肽链合成速率升高时间较HbF水平的升高提前10天左右。γ/γ β升高幅度与马利兰的剂量及疗程长短有关。     

棉酚对纯化LDH-X作用的分析

用纯化的大鼠LDH-X和LDH 1～5,以定量测定酶活性和凝胶电泳相配合的分析方法,发现棉酚对LDH-X的抑制作用显著大于LDH1～5,与在人体内的试验结果基本一致,再次证实了棉酚对LDH-X的抑制有特异性,进一步明确通过抑制精子特异的LDH-X酶,中断 精子的能量供给,损害线粒体功能,阻断生精过程是棉酚抗生育作用机理的一个重要方面。     

男性2型糖尿病患者骨密度与C肽水平的关系

目的探讨男性2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者骨密度(bone mineral density,BMD)的变化与C肽水平关系。方法采用双能X线骨密度仪对143例糖尿病患者和63例非糖尿病者(对照组)进行腰椎L1-4骨密度测量,记录年龄、体重指数(body mass index,BMI)、糖尿病病程。检测糖化血红蛋白(Hb A1c)、骨代谢指标及空腹、餐后2h血糖、C肽。采用C肽改良HOMA公式计算胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)和胰岛素抵抗指数(HOMA-CR)。糖尿病患者根据BMD水平分为2组:骨量正常组(DM-A组)和骨量减少/骨质疏松组(DM-B组)。结果糖尿病患者骨密度、空腹及餐后2h C肽均低于对照组(P0.05)。与DM-A组相比,DM-B组HOMA-CR、I型胶原羧基末端肽β特殊序列(βCTX)水平升高(P0.05),I型前胶原羧基末端肽(PICP)水平降低(P0.05)。多元逐步回归结果提示,BMI和空腹C肽是腰椎骨密度的主要影响因素。结论男性2型糖尿病患者骨密度与空腹C肽水平密切相关,C肽水平偏低的男性2型糖尿病患者更容易发生骨密度降低。     

2016-2019年杭州地区儿童临床病原菌检测及耐药性分析

摘 要：目的 了解杭州地区儿童临床病原菌流行病学分布情况,为儿童临床疾病的检验及诊疗提供科学依据。方法 收集杭州市儿童医院2016年01月至2019年12月所有就诊患儿临床病原菌检测标本,统计并分析不同种类细菌检出率、不同类型临床标本阳性率、及主要细菌检出率构成比,并对2016-2019年主要检出菌的常用抗生素耐药情况简单分析。结果 2016-2019年不同类型细菌检出率主要以G+、G- 菌为主;2016-2019年痰标本、咽拭子、脓液等标本阳性率相对稳定,尿液标本2018-2019较2016-2017增高,具有统计学差异;2016-2019年G+检出菌以金黄色葡萄球菌、A群化脓性链球菌、肺炎链球菌等为主、G- 菌主要以大肠埃希菌、沙门菌属、流感嗜血杆菌等为主;2016-2019年,金黄色葡萄球菌及A群化脓性链球菌、流感嗜血杆菌对主要抗菌药物耐药性变化有所不同。 结论 积极开展临床微生物检验能够实时监测临床疾病感染,通过分析其流行病学状态,不仅提升临床儿童疾病的诊疗也利于院感的控制。     

B超引导联合心房内心电图定位在新生儿PICC中的效果及学习曲线分析

目的探讨B超引导联合心房内心电图定位在新生儿经外周中心静脉置管（peripherallyinsertedcentralcatheter,PICC）中的效果,分析护士在新生儿PICC中的学习曲线。方法纳入昆明市儿童医院新生儿重症监护室（Neonatalintensivecareunit,NICU）收治的需要行PICC的患儿200例,按照随机数字表法分为观察组和对照组,各100例。观察组采用B超引导+心房内心电图技术对PICC头端进行定位;对照组采用盲穿+常规胸部X线对PICC头端进行定位。比较两组患儿的一次性置管成功率、置管时间、术后并发症情况;记录观察组护士在置管过程中所用时间、穿刺次数、操作评分及术后导管尖端位置等指标,计算累积和,绘制研究者个体学习曲线,分析掌握B超引导联合心房内心电图定位进行PICC所需要的最少操作例数。结果（1）观察组一次性置管成功率明显高于对照组（93.00%比83.00%）,差异有统计学意义（字2=4.735,P＜0.01）;观察组穿刺次数、置管时间均短于对照组,差异均有统计学意义（t=5.519、9.989,均P＜0.01）;观察组机械性静脉炎、静脉血栓、导管脱落堵塞、导管相关感染总发生率低于对照组（6.00%比15.00%）,差异有统计学意义（字2=4.309,P＜0.05）。（2）观察组5名护士按照时间顺序分别操作了20例连续病例,通过绘制学习曲线显示,5名护士总体学习曲线斜率K=0时对应的穿刺例数为13例。结论B超引导联合心房内心电图定位能够明显提高新生儿PICC成功率,减少导管相关并发症;护士学习掌握该项技术所需要的最少操作例数为13例。     

靶向肝癌的GPC3-CAR-T细胞的构建与功能鉴定

目的:构建靶向GPC3阳性肝癌细胞的嵌合抗原受体修饰T细胞[chimeric antigen receptor-modified T cell,CAR-T cell],并评估其对GPC3阳性肝癌细胞的杀伤效能.方法:选择偏爱密码子技术改造基因序列,以增强CAR分子表达效率,设计靶向GPC3抗原的CAR分子基因并构建携带GPC3-CAR基因的慢病毒表达载体pCDH-GPC3-CAR,感染T细胞;采用Western blotting、流式细胞术、实时细胞监测和ELISA技术分别检测GPC3-CAR分子在CAR-T细胞的表达、慢病毒感染T细胞效率、GPC3-CAR-T细胞对GPC3阳性肝癌细胞的杀伤活性和特异性.结果:双酶切pCDH-GPC3-CAR重组慢病毒质粒可见分子质量和GPC3-CAR分子一致的基因片段,成功构建pCDH-GPC3-CAR慢病毒质粒.约54.38％的GPC3-T细胞表达GPC3-CAR分子,称为GPC3-CAR-T细胞.GPC3-CAR-T细胞对GPC3阳性的肝癌细胞Huh-7比GPC3阴性的肝癌细胞SK-HEP-1具有更高效的杀伤能力[(78.96±4.76)％ vs (6.87±3.15)％,P＜0.01].与GPC3阳性Huh-7肝癌细胞共培养的肝癌GPC3-CAR-T细胞分泌IFN-γ水平比Mock组高效[(21 371.4±1 808.3) vs (152.8±12.5) pg/ml,P＜0.01],这可能是其高效杀伤肝癌细胞的机制之一.结论:靶向肝癌的GPC3-CAR-T细胞具有高效分泌IFN-γ细胞因子并特异高效杀伤GPC3阳性肝癌细胞的能力,为进一步推进GPC3-CAR-T临床前和临床研究奠定基础.     

连翘酯苷A对肝星状细胞增殖及凋亡的影响

目的 研究连翘酯苷A(FA)对肝星状细胞增殖活化及凋亡的影响。方法 以人肝星状细胞（LX-2）作为实验对象,采用血小板衍生生长因子（PDGF）-BB模拟肝纤维化微环境,实验分为对照组、PDGF-BB组、FA组、PDGF-BB+FA组。采用细胞计数试剂盒（CCK-8）检测LX-2细胞活力;采用油红O检测细胞内脂滴的情况;采用免疫荧光染色检测细胞内α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达;采用蛋白质印迹技术（Western Blot）检测纤维化相关标志蛋白[α-SMA、α1-I型胶原蛋白（COL1A1）]和凋亡相关蛋白[B淋巴细胞瘤-2蛋白（BCL-2）、剪切的-腺苷二磷酸核糖聚合酶（cleaved-PARP）、BCL-2相关X蛋白（BAX）、剪切的-半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cleaved-CASPASE-3)]的表达;采用流式细胞仪检测细胞凋亡。结果 FA处理后LX-2细胞活力明显下降,且呈剂量依赖性;油红O实验结果显示,与PDGF-BB组比较,FA组细胞内脂滴数量较多;免疫荧光染色结果显示,与PDGF-BB组相比,FA组细胞内α-SMA荧光斑点的数量减少;WesternBlot实验结果显...