以Apo A-Ⅰ为靶点的基因表达上调剂筛选模型的建立

目的 建立靶向人Apo A-Ⅰ转录调控序列的高通量药物筛选模型,用于筛选Apo A-Ⅰ基因表达上调剂.方法 以人基因组DNA为模板,PCR扩增Apo A-Ⅰ上游的启动子序列,克隆至荧光素酶报告基因质粒pGL4.17上游,采用脂质体介导的方法将重组质粒转染人肝癌细胞HepG2,在G418抗性存在的条件下,通过有限稀释法筛选稳定转染细胞株.对溶剂浓度和药物作用时间进行条件优化,应用阳性化合物染料木素评价模型有效性,通过检测荧光素酶的表达活性变化来筛选人Apo A-Ⅰ基因表达上调剂.结果 通过PCR成功扩增了人Apo A-Ⅰ基因上游的启动予序列,构建了相应的重组荧光素酶报告基因质粒pGL4-ApoP,并建立稳定转染细胞株ApoP-Luc HepG2.对筛选条件优化后,应用阳性化合物进行评价,筛选窗相关系数Z'因子为0.68,大于0.5,适于进行高通量筛选.应用该筛选模型对5000余种化合物进行筛选,4个黄酮类化合物和白藜芦醇显示出较好的活性,半数有效浓度均小于10μg/ml.结论 成功建立了人Apo A-Ⅰ基因表达上调剂筛选模型,并利用该模型筛选到5个活性化合物.     

基于微生物基因组的新型天然产物发现策略

微生物天然产物的生物合成是一个从基因到化合物的过程。微生物基因组内未被发掘的孤儿或沉默途径所编码的新型次级代谢产物的合成潜力远远超过现已发现的代谢产物数量。微生物基因组大规模测序的广泛开展,为天然产物的发现和研究提供了新的研究领域和契机。本文主要介绍基于微生物基因组序列的新型天然产物的发现策略及其研究进展。可以预计,随着实验技术的不断发展,采用基于基因的药物发现模式可以充分发掘微生物产生天然产物的潜力,微生物基因组内的孤儿或沉默途径编码的未知代谢产物将成为新药开发的重要源泉。     

尿苷肽类抗生素生物合成研究进展

尿苷肽类抗生素是一类具有相同母核结构的化合物,其化学结构独特、作用机制新颖、抗菌谱窄,是寻找新型低毒、窄谱抗菌药物的先导化合物或候选药物的最佳选择之一。本文介绍了尿苷肽类抗生素的化学结构特征以及构效关系,着重介绍了其生物合成机制的最新研究进展。尿苷肽类抗生素肽链的合成由非核糖体肽合成酶（non-ribosomal peptide synthetase, NRPS）以非线性机制催化完成,肽链的组装始于中心模块2,3-二氨基丁酸（2,3-diaminobutyric acid, DABA),其后的延伸包括N端氨基酸或二肽与DABA β-氨基间的缩合,以及C端的脲二肽与DABA α-氨基间的缩合。3′-脱氧-4′,5′-烯酰胺尿苷由尿苷经过3步反应转化而来,并在NRPS的催化下与四肽或五肽缩合形成尿苷肽类抗生素。尿苷肽类抗生素生物合成机制的阐明为利用组合生物合成技术获得新结构的尿苷肽类化合物奠定了基础。     

异丙肾上腺素治疗严重房室传导阻滞合并尖端扭转型室速24例疗效观察

目的观察异丙肾上腺素治疗严重房室传导阻滞（高度、Ⅲ°房室传导阻滞）合并尖端扭转型室速（Tdp）的疗效。方法取住院严重房室传导阻滞合并尖端扭转型室速（Tdp）患者41例,予静脉滴注滴注异丙肾上腺素,同时纠正合并电解质紊乱情况,观察患者心电图变化及临床病情进展。结果所有患者用药后数小时病情均得到有效控制,且副作用少。结论在严重房室传导阻滞合并Tdp的紧急情况下,静脉滴注异丙肾上腺素疗效显著,可做首选。     

超重和肥胖对青少年血压的影响

目的：研究超重和肥胖对青少年血压的影响。方法：采用整群抽样方法,对上海市青浦区11～17岁在校学生进行流行病学调查。对血压超过正常水平的调查对象,在1个月内复测其血压。结果：入组学生共4175人,其中女性2183人（52．3％）。4175人中,血压正常者3025人（72．5％）,正常高值血压750人（18．0％）,1级高血压346人（8．3％）,2级高血压54人（1．3％）。女性超重和肥胖的检出率分别为6．7％和3．0％,男性则分别为13．7％和6．3％。多因素logistic回归分析结果显示,在调整性别、年龄、父母高血压史和体育活动水平后,超重和肥胖是青少年高血压的独立危险因素,超重的优势比（95％可信区间）为1．42（1．16～1．75）,肥胖为2．35（1．78～3．11）。被动吸烟、高血压家族史与青少年高血压无显著相关性。结论：超重和肥胖是影响青少年血压水平增高的主要因素。     

关节冲洗配合外敷方治疗膝骨性关节炎疗效观察

目的:观察"输液式"关节冲洗配合外敷方治疗膝骨性关节炎的远期疗效。方法:对48例患者采用关节冲洗每周1次,4次为1疗程,治疗1个月,冲洗后外敷中药,临床治愈后随访3～8年,观察远期疗效。结果:复发率10.42%,有效率89.58%。结论:"输液式"关节冲洗配合外敷方两种方法联合施治,患者症状、体征得到明显改善,经长期随访观察,远期疗效满意。     

以鼻出血为主要症状的鼻腔Rosai-Dorfman病一例

患者男,17岁.以反复右鼻出血3个月为主诉于我院就诊,起初每次出血量约3 ml,鲜红色,从鼻腔流出,以后出血增多,每次约20 ml,且反复出血,伴轻度持续性不完全性右鼻塞及少许脓性分泌物,偶带暗红色血丝,无嗅觉障碍,无头痛、头晕,无发热、耳鸣、耳闷,无黑便.     

兔先天性青光眼网络膜血管改变

用小鼠跳台法观察紫河车水煎液对由东莨菪碱及亚硝酸钠所致的小鼠记忆损伤过程的影响，结果显示，紫河车对小鼠记忆学习能力具有明显的改善作用，抗缺氧及负荷游游泳试验结果表明，紫河车可显著提高小鼠的耐缺氧能力，延长负荷游泳时间。     

脑室外引流加鞘内给药治疗脑室出血

目的观察脑室穿刺外引流并鞘内注射药物治疗脑室出血的疗效。方法侧脑室前角穿刺以WH-1型一次性使用颅脑外引流器行脑室外引流，病人生命体征平稳情况下做腰椎穿刺，生理盐水等量置换脑脊液20～30ml，并腰穿鞘内注入尿激酶1kU＋地塞米松5mg。每日1次，采用该方法治疗脑室出血16例。观察其疗效。结果16例病人全部意识恢复，颅内压下降。脑脊液转清均较快。无1例脑积水并发症发生。结论脑室外引流并鞘内给药是治疗脑室出血的有效方法。     

全髋置换术后感染处理之浅见

目的对人工全髋关节置换的病例进行分析总结,探讨手术后感染的处理.方法回顾调查1995年1月～2001年6月我院进行人工全髋关节置换术152例(157髋)患者.男73例,女89例;平均年龄56.2岁.对感染患者术前、术后和随访期间的症状、体征、X线照片进行总结评价.结果 152例(157髋)患者其中5例现已死亡,失访5例,其余142例(143髋)患者随访1.5～8.0年,平均4.1年.伤口感染3例,均为浅表感染,未发现有深部感染.所有感染患者经治疗后治愈.结论完善的术前准备,严格的术中无菌操作,合理的术后处理,可降低全髋术后感染的发生率.