糖尿病人群胰岛素受体基因变异的研究

动用聚合链反应及单链构型多态性技术分析５２例Ⅱ型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）者及５４例正常对照组胰岛素受体基因第１７及２０外显子的变异。结果显示：外显子１７的１００８位ＧＧＣ－ＧＧＴ多态性频率在ＮＩＤＤＭ组为２９．４％，而在正常对照组为９．０７％（Ｘ＾２＝１０．０２，Ｐ〈０．００５）．外显子２０的１１６９位甘氨酸多态性ＧＧＴ→ＧＧＣ在ＮＩＤＤＭ与正常对照组的频率分别为１５．４％和３．７％（Ｘ＾２＝４．３７     

高胰岛素血症,高脂血症致动脉粥样硬化的实验研究

使用加与不加高脂血清的不同胰岛素对培养的动脉平滑肌细胞进行刺激，以了解其光学及电结构改变。结果显示：胰岛促细胞生长强度与胰岛成正比，高脂血清使平滑肌细胞排列无序化，失去特征结构，变为泡沫细胞；胰岛素与高脂血清复合作用，不仅使细胞形态、结构改变，并使之由收缩型变为增殖型，还导致胶原纤维产生。结果提示：控制高胰岛素血症、高脂血症患者的血胰岛素、血脂水平，有助于预防和推迟动脉粥样硬化的产生和发展。     

2型糖尿病患者PAI-1基因、ATN基因多态性与冠心病的关系(附281例分析)

目的：从分子遗传水平对2型糖尿病（2－DM）和冠心病患者进行多基因联合研究,以探讨其内在的相互联系。方法：281例病例均进行血管紧张素转换酶（ACE）基因,血管紧张素肽原（ATN）基因,血浆纤溶酶原激活物抑制因子（PAI－1）基因多态性测定,并进行Logistic多元回归分析。结果：在2－DM组,冠心病者PAI－1基因型频率及等位基因频率明显变化（P＜0．05,P＜0．01）,ATN基因型频率及等位基因频率明显变化（P＜0．05,P＜0．01）,在非糖尿病组,ATN基因型频率有明显的统计学差异（P＜0．05）,Logistic多元回归分析发现,冠心病和年龄,肥胖,PAI－1基因,ATN基因有显著关系。结论：ATN基因多态性可能是冠心病的危险因素,PAI－1基因突变可能主要是2－DM合并冠心病的危险因素。     

球囊血管成形术后再狭窄中ET和IGF-I的改变

目的探讨内皮素(endothelin,ET)及胰岛素样生长因子-I(insulin like growth factor-I,IGF-I)在球囊损伤血管内皮后的改变及意义。方法用自制导管制造大鼠血管内皮损伤模型,观察不同时间受损血管病理改变,同时用放射免疫法测定血浆ET及IGF-I含量结果血管内皮损伤后,随着时间延长,平滑肌细胞大量增殖造成管腔狭窄,血浆ET及IGF-I升高明显,各时间点与对照组相比均有显著性差异,且两者具有较好相关性。结论ET与IGF-I相互作用促进血管平滑肌增殖,两者可能共同参与了球囊血管成形术后再狭窄的病理过程。     

The effects of glucose, insulin and oxidized low density lipoprotein on apopto sis in vascular endothelial cells

Objective To study the effects of high concentrations of glucose, insulin and oxidized low density lipoprotein (ox-LDL) on apoptosis in cultured bovine aortic endothelial cells (ECs). Methods For qualitative determination of EC apoptosis, acridine orange (AO)/ethidium bromide (EB) staining and DNA agarose gels electrophoresis were used. Cellular DNA fragmentation ELISA measured apoptosis by quantitating the fragmentation of 5-bromo-2’-deoxyuridine-labeled DNA. Results High concentrations of glucose (20 mmol/L, 40 mmol/L), insulin (3000 μU/ml) and ox-LDL (50 μg/ml, 100 μg/ml) induced concentration- and time-dependent apoptosis in ECs. They had a synergetic effect on EC apoptosis. The combined effect of high concentration of glucose, insulin and ox-LDL was greater than any two of them; the effect of two was greater than one alone. Low concentration of insulin (30 μU/ml) decreased apoptosis in ECs induced by high concentrations of glucose (40 mmol/L), but no similar effect occurred with ox-LDL (100 μg/ml). Conclusion High ambient glucose, insulin and ox-LDL can induce excessive apoptosis in cultured ECs, and low ambient insulin can prevent EC apoptosis. Excessive EC apoptosis induced by the separate or synergetic effect of hyperglycemia, hyperinsulinemia and hyperlipidemia may be one of the reasons for loss of endothelial integrity, dysfunction of the vascular endothelium and increased plasma membrane permeability, which are all involved in the development of diabetic macrovascular complications.     

白色念珠菌水溶物诱导小鼠冠状动脉损伤模型的建立

目的探讨建立白色念珠菌水溶物(Candida albicans water soluble fraction,CAWS)诱导幼年小鼠冠状动脉损伤模型的可行性。方法将48只4～6周龄C57BL/6小鼠随机分为实验组和对照组,各24只。先连续5 d分别给予实验组和对照组小鼠腹腔注射0.4 mg CAWS和磷酸盐缓冲液。完成最后一次注射后的24 h、3 d、7 d及28 d,两组各取6只小鼠处死,留取心脏标本,组织切片并苏木精-伊红(HE)染色;测量小鼠体质量、心脏质量及心脏/体质量比值。结果实验组小鼠3 d、7 d的体质量、心脏质量、及心脏/体质量比值较对照组降低,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组在24 h、3 d时,6只小鼠中各有5只出现冠状动脉损害,表现为以中性粒细胞为主伴单核细胞浸润;7 d、28 d时,6只小鼠均出现冠状动脉损害,表现为近段扩张,炎症细胞以巨噬细胞为主,冠脉管壁出现成纤维细胞增生及弹力层黏液样变性等。实验组小鼠心脏病理变化类似川崎病冠状动脉损害。结论 CAWS连续腹腔注射能够诱导C57BL/6小鼠产生冠状动脉损伤的病理改变,建立一种表现与川崎病相似的动物模型。     

β_1肾上腺素受体基因多态性与小儿血管迷走性晕厥的相关性研究

目的探讨β1肾上腺素受体(ADRB1)基因多态性Arg389Gly与小儿血管迷走性晕厥(VVS)发病的相关性。方法晕厥组为不明原因晕厥(unexplained syncope,UPS)患儿54例,其中男18例,女36例,平均11.8岁;对照组为同期健康体检儿童54例,其中男20例,女34例,平均11.2岁。入选病例均行直立倾斜试验(head-up tilt test,HUTT),根据HUTT结果,分HUTT阳性组即VVS组和HUTT阴性组,各组病例均应用聚合酶链反应PCR和基因测序方法检测ADRB1基因Arg389Gly多态性。结果健康儿童的等位基因Arg389和Gly389的频率分别为73.15%和26.85%,HUTT阳性患儿等位基因Arg389和Gly389的频率分别为66.67%和33.33%,HUTT阴性患儿等位基因Arg389和Gly389的频率分别为85.42%和14.58%;HUTT阳性患儿的Gly389等位基因频率明显高于HUTT阴性组患儿及健康对照儿(P<0.05)。HUTT阳性组共30例(55.6%),其临床分型中心脏抑制型6例(20.0%),混合型9例(30.0%),血管抑制型15例(...     

胰岛素介导的内皮依赖性血管舒张功能与高血糖关系的实验研究

目的：研究不同浓度胰岛素，葡萄糖对培养血管内皮细胞一氧化氮（NO）产生的影响，探讨糖尿病时内皮依赖性血管舒张异常的作用机制。方法：用放免法测定内皮细胞cGMP水平来反映NO的量，半定量RT－PCR检测NO合酶（eNOS)mRNA水平。结果：胰岛素（0.18-6.0nmol/L)，葡萄糖（20mmol/L,40mmol/L)能增加内皮细胞cGMP产量，并呈浓度和时间依赖性；高浓度葡萄糖上调eNOS mRNA水平，而胰岛素对其无影响，在高浓度葡萄糖下，胰岛素（6.0nmol/L)刺激NO的生成作用明显降低。结论：胰岛素介导的内皮依赖性血管扩张与胰岛素刺激内皮细胞NO合成有关；血管内皮对胰岛素的敏感性减低是胰岛素抵抗的一部分；高浓度葡萄糖可能会抑制胰岛素介导的内皮依赖性血管舒张。     

局部进展期直肠癌术前新辅助治疗疗效分析

目的 观察术前同期放化疗或术前单纯放疗在T3、T4期或影像学淋巴结阳性直肠癌患者治疗中的疗效和安全性.方法 回顾分析2000 -2009年收治的141例局部进展期或影像学淋巴结阳性的直肠癌患者资料,其中术前同期放化疗97例,术前单纯放疗44例.放疗采用二维或三维技术,化疗采用4种方案.结果 随访率为91.5％,随访满3、5年者分别为106、68例.降期率达59.0％ (82/139),保肛手术率达65.5％ (91/139).3、5年总生存率分别为85.8％、65.7％,局部复发率分别为9.2％、14.1％,转移率分别为33.8％、45.8％.术前同期放化疗患者中位无瘤生存期优于术前单纯放疗(51:31个月,x2=12.88,P=0.000).肿瘤降期患者在远处转移时间上迟于未降期患者(60:29个月,x2=14.65,P=0.000).急性不良反应多为1、2级,伤口愈合延迟及吻合口瘘发生率低.结论 术前同期放化疗或术前单纯放疗能明显降低肿瘤分期、提高手术保肛率,不良反应小且绝大多数患者可耐受.     

大黄酸对人前体脂肪细胞增殖与分化的影响

目的:研究大黄酸(rhein,Rh)对人前体脂肪细胞增殖与分化的影响,并进一步探讨其作用机制.方法:采用噻唑蓝(MTT)比色法测定RH对人前体脂肪细胞增殖的影响;通过形态学观察脂肪细胞的分化程度及形态学变化;并用油红O染色法,检测脂肪细胞内甘油三酯积聚量的变化;应用RT-PCR检测RH干预后分化抑制基因CHOP mRNA的表达.结果:各浓度组RH(0.1、1、2.5、5、10 ug/ml)抑制人前体脂肪细胞增殖,作用呈剂量依赖性;RH对脂肪细胞分化的抑制作用亦呈剂量依赖性;1 ug/ml的RH使CHOP mRNA表达增加.结论:RH可抑制人前体脂肪细胞增殖与分化,该作用可能与CHOP表达上调有关.