缺血—再灌注脑损伤的分子病理生理机制

脑血管病的发病率占各种疾病的前3位，其中缺血性脑血管病的发病率更有上升及发病年龄年轻化的趋势。由于本病发生机制及病理过程十分复杂，许多环节尚未被完全认识，故迄今尚无较理想的治疗药物。因此，目前对缺血性脑损伤病理生理机制的研究正方兴未艾，并取得了突破性进展，提出了自由基、能量耗竭、兴奋性氨基酸毒性、钙超载等学说。近年来，人们对参与缺血性脑损伤的分子病理生理机制又有了新的认识，发现许多分子介导的缺血性脑损伤。现对此作一综述，以便为预防和治疗缺血性脑损伤提供新的思路和途径。     

前列腺素E1对缺血再灌注脑损伤的保护作用

目的:探讨前列腺素E1(PGE1)对缺血再灌注脑损伤的保护作用。方法:采用线栓法复制大鼠局灶性脑缺血再灌注模型。缺血60min,再灌注24h对每只动物进行神经症状评分后,断头取脑,并进行脑梗死体积,脑含水量测定及病理学捡查。结果:①缺血再灌注模型组出现典型神经缺损症状,而PGE1剂量组均能改善大鼠神经功能障碍,其行为评分与模型组相比差异有显著性意义(P<0.05)。②缺血再灌注模型组脑梗死体积百分比高达(28.40±1.83)%,而PGE1中、高剂量组脑梗死体积百分比明显缩小(10.25±2.77)%,(12.90±2.58)%,与模型组相比差异有显著性意义(P<0.05)。③缺血再灌注模型组栓塞侧脑含水量明显增加,为(83.03±0.61)%,而PGE1三剂量组脑含水量均低于模型组,为(79.93±0.70)%,(79.67±1.12)%,(80.26±1.63)%,两者相比差异有显著性意义(P<0.05)。④缺血再灌注模型组脑组积病理形态学捡查可见;大量神经细胞固缩坏死,重度脑水肿,部分可见软化灶形成,而PGE13剂量组脑水肿及神经细胞坏死程度均明显减轻结论:PGE1能减轻脑缺血再灌注所致的组织损伤,发挥保护作用。     

前列腺素E_1对缺氧复氧乳鼠心肌细胞凋亡及bcl-2、bax蛋白表达的影响

目的:探讨前列腺素E1(PGE1)抑制缺氧复氧乳鼠心肌细胞凋亡的作用机制。方法:采用离体纯化培养的乳鼠心肌细胞建立缺氧复氧损伤模型,PGE1高、中、低各剂量组在缺氧复氧期分别给药;各组采用电镜技术和原位末端标记技术检测心肌细胞的凋亡情况,免疫组化技术检测bcl-2、bax蛋白表达情况。结果:与模型组比较,PGE1组心肌细胞的凋亡率显著降低,bcl-2蛋白表达明显上调而bax蛋白表达明显下调(P<0.01)。结论:离体培养的乳鼠心肌细胞建立的缺氧复氧损伤模型可诱导心肌细胞的凋亡,而PGE1可明显抑制这种凋亡的发生,其机制可能与促进bcl-2蛋白表达、抑制bax蛋白表达有关。     

息痛颗粒对小鼠出凝血时间及血瘀型大鼠血小板聚集的影响

目的:观察息痛颗粒对小鼠出凝血时间及对血瘀型大鼠血小板聚集的影响.方法:小鼠50只,随机分为空白对照组、阳性对照组,息痛颗粒大、中、小剂量组,每组10只,分别以生理盐水,丹参滴丸0.1g/(kg·d),息痛颗粒6.26g/(kg·d)、3.13g/(kg·d)、1.25g/(k·d)灌胃给药,1次/d,连续3 d.于末次灌胃后断尾法测出血时间,用毛细玻管法和玻片法测凝血时间.大鼠60只,随机分成6组,每组10只.血瘀模型组、阳性对照组、息痛颗粒大、中、小剂量组分别以生理盐水,丹参滴丸37.5 mg/(k·d),息痛颗粒5g/(k·d)、2.5g/(k·d)、1.25g/(kg·d)灌胃给药,1次/d,连续3 d.以上5组均于末次给药后1 h用肾上腺素加冷刺激形成大鼠急性"血瘀"模型.以正常大鼠灌服生理盐水作空白对照.第2 d各组分别自颈动脉取血,以比浊法测二磷酸腺苷(ADP)、胶原(COL)、花生四烯酸(AA)诱导的血小板最大聚集率.结果:与空白对照组比较,息痛颗粒大、中剂量组小鼠出、凝血时间均延长(P均＜0.05);息痛颗粒各组血瘀型大鼠ADP、COL、AA诱导的血小板最大聚集率均降低(P均＜0.05).结论:息痛颗粒有抗血小板聚集的功能.     

巴戟天醇提物对D-半乳糖致衰老大鼠小脑的作用

目的：观察巴戟天醇提物对D-半乳糖致衰老大鼠小脑的作用。方法：6月龄Wistar大鼠80只,雌雄各半,随机分为空白对照组、衰老模型组、阳性对照药（维生素E100mg/kg）组、巴戟天醇提物2.1g/kg和0.7g/kg两个剂量组,共5组,每组16只。各组一半动物,用分光光度计测定大鼠小脑组织中的SOD活性及MDA含量,以此分析巴戟天的抗氧自由基作用;另一半动物采用甲基绿-哌洛宁染色法观察大鼠小脑皮质蒲肯野细胞的形态变化,计算凋亡指数,用免疫组化法检测bcl-2蛋白及bax蛋白表达情况,以此来观察巴戟天醇提物的抗凋亡作用及其机制。结果：与空白对照组比较,衰老模型组大鼠小脑组织超氧化物歧化酶（SOD）活性降低、丙二醛（MDA）含量增加、蒲肯野细胞的凋亡指数增、bcl-2蛋白表达显著降低、bax蛋白表达显著升高（P〈0.01）;维生素E100mg/kg组、巴戟天醇提物2.1g/kg和0.7g/kg两个剂量组与衰老模型组相比,小脑组织SOD活性均明显增加、MDA含量显著降低、蒲肯野细胞凋亡指数显著降低、bcl-2蛋白表达显著升高、bax蛋白表达显著降低（P〈0.01）。巴戟天醇提物2.1g/kg组与VitE100mg/kg组的作用差异无显著性（P〉0.05）,而巴戟天醇提物0.7g/kg组与前两组相比小脑组织SOD活性降低、MDA含量增加、蒲肯野细胞的凋亡指数增、bcl-2蛋白表达显著降低、bax蛋白表达显著升高（P〈0.05）。结论：巴戟天醇提物对D-半乳糖致衰老大鼠小脑组织具有抗氧化作用及抗凋亡作用;巴戟天醇提物的抗凋亡作用可能与bcl-2pro-tein和bax蛋白表达的变化有关;巴戟天醇提物的抗氧化及抗细胞凋亡作用与阳性对照药VitE相似。     

冠心舒对犬实验性心肌缺血及心肌氧代谢的影响

目的 观察中药冠心舒对犬急性缺血性心肌的保护作用.方法 实验犬36只随机分为6组.通过结扎麻醉犬冠状动脉左前降支的方法,造成急性心肌缺血模型.经消化道给药后,测定心率、平均动脉压和冠脉血流量以及动静脉血氧含量,计算心肌耗氧量.免疫组化测定冠心舒对心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛 (MDA)的影响.结果 与模型组相比,中药冠心舒能降低心肌缺血犬的心率,使心肌耗氧量下降,增加其平均动脉压及心肌冠脉血流量,增加血供(P＜0.05,P＜0.01).冠心舒能提高心肌SOD的含量,降低MDA的量(P＜0.05,P＜0.01).结论 冠心舒能增加缺血心肌血供、降低氧耗,并有抗氧化作用.     

氟康唑对豚鼠心室肌细胞I_K和在HEK-293细胞中表达的HERG钾通道的抑制作用

目的研究氟康唑对豚鼠心室肌细胞延迟整流钾电流(IK)和在HEK-293细胞中表达的HERG钾通道的抑制作用。方法应用酶解法消化豚鼠单个心室肌细胞,观察氟康唑对IK的影响;采用磷酸钙沉淀瞬时转染的方法将HERG基因表达于HEK-293细胞上,观察氟康唑对野生型HERG钾通道电流、激活和失活曲线的影响,以及氟康唑对Y652A和F656C突变型HERG钾通道的作用;IK和HERG电流的记录均采用全细胞膜片钳技术。结果氟康唑(0.01、0.1、1、3、10、30、100、300和1 000μmol.L-1)浓度依赖性地抑制IK和HERG钾电流,其IC50值分别为(68.1±21.6)μmol.L-1和(48.2±9.4)μmol.L-1,对HERG钾通道的电压依赖性激活和失活曲线无影响;与野生型(WT)比较,Y652A和F656C突变型可减弱氟康唑对HERG通道的阻断作用。结论氟康唑能阻断IK和HERG通道,Y652和F656是氟康唑与HERG通道结合的关键位点。     

丹参素异丙酯对离体大鼠缺血/再灌注损伤心肌的影响

目的观察丹参素异丙酯(IDHP)对离体大鼠模拟缺血/再灌注损伤心肌能量代谢及超微结构的影响。方法 Wistar大鼠80只,随机均分为8组:空白对照组、模型组、复方丹参滴丸(CDDP)50.00mg·L-1前保护及后保护组、IDHP4.00mg·L-1和0.04mg·L-1两个剂量的前保护及后保护组。利用Langendorff灌流技术,制备心肌缺血/再灌注损伤(MIRI)模型,各用药组分别在预灌及复灌时,给予相应浓度的药物。各组灌流结束后,7只心脏采用高效液相色谱仪测定其高能磷酸化合物(HEP)含量;其余3只心脏利用电镜观察心肌细胞超微结构。结果各用药组ADP、AMP及腺嘌呤核苷酸总量(TAN)升高(P<0.01,P<0.05);CDDP50.00mg·L-1前保护和后保护组、IDHP4.00mg·L-1前保护和后保护组的ATP含量升高(P<0.05)。电镜显示:IDHP4.00mg·L-1前保护、后保护组及CDDP50.00mg·L-1前保护、后保护组超微结构与空白对照组相似,损伤较轻;IDHP0.04mg·L-1前保护、后保护组心肌细胞超微结构的损伤有所改善,但损伤仍较严重。结论 IDHP无论前保护还是后保护均能改善缺血/再灌注损伤心肌能量代谢,减轻心肌细胞线粒体结构损伤。     

珍珠口泰药膜抑菌、镇痛及抗口腔溃疡作用实验观察

目的：观察珍珠口泰抑菌、镇痛及抗口腔溃疡的作用。方法：珍珠口泰低、中、高剂量按临床等效剂量的l、3、5倍配制。①通过抑菌实验观察珍珠口泰各剂量及谷固醇的抑菌效果。②将50只小鼠随机分为珍珠口泰高、中、低剂量组，谷固醇阳性对照组和蒸馏水空白对照组，采用小鼠热板法观察珍珠口泰模型的镇痛作用；③将40只豚鼠随机分为珍珠口泰高、中、低剂量组，谷固醇阳性对照组及模型组，采用电灼烧制造口腔溃疡模型，观察珍珠口泰的抗溃疡作用。结果：珍珠口泰对甲型溶血性链球菌有轻度抑制作用；能明显提高小鼠热板刺激的痛阈值，3个剂量局部给药均可明显改善豚鼠口腔溃疡的面积及周围受累面积，溃疡修复时间提前。结论：珍珠口泰药膜有轻度抑制甲型溶血性链球菌的作用和镇痛及抗口腔溃疡的作用。