羊膜制备与保存中的微生物安全性研究

目的：探讨人羊膜在制备和保存过程中的微生物安全性及其控制,为建立羊膜库提供便捷、有效的微生物控制方法.方法：20只剖宫产胎盘的羊膜取材后,均按不同的无菌处理程序和不同保存方法分组,检测时段为保存后24h、1月、3月、12月,均作细菌、真菌、支原体检测.5只顺产胎盘的羊膜,作细菌、真菌、乳酸菌、支原体检测.随访提供羊膜的25名产妇6个月,复查血清学.结果：仅用无菌生理盐水浸泡组中,2只胎盘的羊膜出现细菌污染;20只剖宫产胎盘的羊膜在其余各组中均未查出微生物污染;1只顺产胎盘的羊膜出现乳酸菌污染.25名产妇6个月的血清学复查均为阴性.结论：来源于健康产妇剖宫产胎盘的羊膜经抗生素液规范化无菌处理后,现今常用的保存方法可基本保证羊膜在1年保存期内免受细菌、真菌和支原体的污染.     

新鲜羊膜及几种保存羊膜移植治疗角膜碱烧伤

目的:近年来羊膜移植成为治疗角膜碱烧伤较为有效的手段之一,但其生物学基础尚不完全清楚.观察不同活性羊膜移植对兔眼角膜碱烧伤的治疗效果,并分析其生物活性成分作用.方法:实验于2004-01/07于重庆医科大学动物实验中心实验室完成,动物实验方法符合动物伦理学要求.①实验材料及分组:健康产妇剖宫产胎盘由重庆医科大学附属第一医院产科提供.选用新西兰大白兔45只,按随机数字表法分为5组(n =9):新鲜羊膜组、甘油保存羊膜组、乙醇保存羊膜组、真空干燥羊膜组及对照组.②实验方法:于新鲜羊膜制备后24 h内,保存羊膜保存1个月后行羊膜移植.③实验评估:术后2～21 d每日、21 d后每3日观察眼表角膜透明度及新生血管生长情况;术后14,30,60 d行荧光素染色,观察角膜上皮的修复情况;术后2周、1个月、2个月行组织病理和透射电镜观察.结果:白兔43只进入结果分析.①在角膜透明性及角膜上皮修复速度上新鲜羊膜组、甘油保存羊膜组和真空干燥羊膜组无明显差异,均明显优于乙醇保存羊膜组和对照组,乙醇保存羊膜组与对照组无明显差异.②在抑制新生血管方面,新鲜羊膜组明显优于甘油保存羊膜组及真空干燥羊膜组.结论:真空干燥羊膜、甘油保存羊膜和新鲜羊膜移植后均能减轻眼表碱烧伤的炎症反应,促进角膜上皮修复.其中新鲜羊膜效果最好,可能与其较其他羊膜含有更多的生物活性物质有关.     

重庆市2018—2021年儿童青少年视力不良检出率变化趋势和健康公平性

  目的  了解重庆市儿童青少年视力不良检出率及变化趋势,分析其健康公平性,为学生视力保护及近视防控提供参考。  方法  采用纵向研究,对2018—2021年度重庆市小学、初中和高中全年级的所有在校生进行裸眼视力检查,分析儿童青少年视力不良检出率及变化趋势。同时于2021年采用分层随机抽样,对重庆市2 302名儿童青少年裸眼视力和屈光度数(等效球镜,SE)进行健康公平性评价。  结果  2018—2021年重庆市儿童青少年视力不良检出率分别为54.12%,58.17%,60.03%和58.20%,视力不良检出率前3年呈增长趋势,2021年较2020年下降1.83%(χ_趋势2=13 870.45,P < 0.01);小学、初中、高中学生不同年份间视力不良检出率差异均有统计学意义(χ2值分别为17 396.36,2 093.95,771.87,P值均 < 0.01)。2018—2021年,女生视力不良检出率均高于男生(P值均 < 0.01)。裸眼视力基尼系数城市为0.054 57,高于乡村(0.035 94);SE的基尼系数城市为0.065 82,高于乡村(0.049 30),即儿童青少年近视在城市中表现得更不公平。  结论  新型冠状病毒肺炎疫情后期近视防控策略的应对调整与重庆市儿童青少年视力不良检出率降低相关。不同学段、性别在视力不良检出率上有差异。应根据变化趋势制定相应的近视防控措施;城市的视力不良检出率较乡村更加不公平,需要针对区域特点实施不同的近视防控措施。     

基于TBL的探究式翻转课堂教学模式在诊断学教学中的应用

目的 探讨基于团队学习（team-based learning,TBL）的探究式翻转课堂教学模式在诊断学教学中的应用效果。方法 选取笔者学校2015级临床医学专业8个行政班248名学生为研究对象,采用数字表法将其随机分为实验组（127人）和对照组（121人）,实验组实施TBL结合探究式翻转课堂教学模式,对照组应用传统教学模式,学期末比较两组学生诊断学期末理论考试和实践操作考核成绩,并通过问卷调查及师生访谈等方式了解学生对新型教学模式的效果评价。结果 实验组学生诊断学期末理论考试及实践操作考核成绩均显著高于对照组（P<0.01）,并且对诊断学教学效果的评价明显优于对照组（P<0.01）,同时,师生访谈显示新型教学模式能提高学生学习积极性和综合能力。结论 基于TBL的探究式翻转课堂教学模式能明显提升诊断学教学效果,可在临床医学专业课程中进行推广。     

肝癌铜死亡相关基因及其与预后、免疫浸润的关系分析

背景与目的 肝癌是消化道恶性肿瘤之一,发病率高、病死率高。铜死亡是一种铜依赖、新型的细胞死亡方式,继发于铜过载诱发的线粒体功能受损。铜死亡在多种肿瘤中扮演重要作用,但其与肝癌的关系尚不清楚。因此,本研究探讨铜死亡相关基因在肝癌中的表达特征,以及与肝癌预后及免疫浸润的关系。方法 从TCGA和GTEx数据库下载肝癌和正常肝脏组织转录组数据进行差异表达和突变分析。采用R语言“clusterProfiler”包进行GO和KEGG富集分析。采用LASSO、单因素和多因素回归分析筛选影响肝癌患者预后的基因并构建风险因子图。使用R包“rms”构建列线图。使用UALCAN数据库分析铜死亡相关基因与肝癌临床病理特征的关系并验证。使用Spearman相关性分析铜死亡相关基因与免疫细胞浸润和免疫检查点的相关性。采用TIMER2.0数据库分析铜死亡相关基因表达与肿瘤相关成纤维细胞（CAF）浸润的相关性,采用TISDB数据库分析CDKN2A和DLAT表达与髓源抑制性细胞（MDSC）浸润丰度的相关性。结果 与正常肝脏组织比较,9个铜死亡相关基因在肝癌中表达显著升高,CDKN2A突变频率最高。铜死亡相关基因主要参与蛋白质脂酰化、三羧酸循环、柠檬酸循环等生物过程。基于LASSO、单因素与多因素回归分析筛选出影响肝癌患者总体生存率（OS）的基因CDKN2A和DLAT,并以此构建风险因子图,时间依赖性受试者工作特征曲线显示其具有较好的预测能力。通过单因素和多因素回归分析筛选出CDKN2A、DLAT、T分期和肿瘤状态是影响肝癌患者OS的独立预后因素,基于上述因素构建了列线图,校正曲线显示该列线图预测和实际观察之间有很好的一致性。UALCAN数据库分析发现CDKN2A、DLAT与肝癌临床分期、肿瘤分级有关,且GEO数据库、HPA数据库及肝癌细胞中的验证结果与之一致。相关性分析显示,CDKN2A和DLAT表达与免疫细胞浸润和免疫检查点表达相关;TIMER2.0数据库分析显示,DLAT表达与CAF浸润明显正相关;TISDB数据库分析显示,CDKN2A和DLAT表达与MDSC浸润丰度无相关性。结论 铜死亡相关基因CDKN2A、DLAT可能是肝癌新的预后生物标志物和免疫治疗的新靶点。     

甘露醇促进人脐血CD34+细胞通过血脑屏障静脉迁移至高血压脑梗死大鼠脑组织

背景：单纯脐血细胞经静脉移植治疗脑梗死疗效有限，移植细胞经血脑屏障迁入脑内数量不足为重要原因之一。 目的：观察血脑屏障开放剂甘露醇对人脐血CD34+细胞经静脉移植治疗高血压大鼠脑梗死疗效的影响。 方法：分离人脐血CD34+细胞，脂质体方法转染pEGFPF质粒，制备pEGFP-CD34+细胞；45只雄性SD大鼠经线栓法建立大脑中动脉栓塞模型，造模后24 h随机分为3组：实验组注射1×106 GFP-CD34+细胞，继之注射20%甘露醇2 g/kg；阳性对照组注射1×106 GFP-CD34+细胞；空白对照组注射等量生理盐水。 结果与结论：①荧光显微镜下实验组每张切片脑组织GFP标记阳性的绿色荧光细胞计数平均值显著多于阳性对照组。②移植后第7天治疗组与其他各组神经功能损害评分差异无显著性意义；移植后28 d，各组神经功能均有不同程度恢复，实验组神经功能恢复明显优于阳性对照组和空白对照组(P < 0.05)。③实验组与其他两组相比，大鼠脑梗死体积均显著减少。④实验组脑组织匀浆胶质细胞源性神经营养因子水平较阳性对照组、空白对照组明显增高。提示血脑屏障开放剂甘露醇促进静脉移植CD34+细胞通过血脑屏障迁入至脑组织，并增强静脉移植CD34+细胞治疗脑梗死的疗效。     

眼科数字导航系统引导下白内障超声乳化手术培训模式探索

缩短学习周期、获得手术经验,对于白内障超声乳化手术初学者尤为重要。本文首次将VERION数字导航系统引入白内障超声乳化手术培训,总结培训经验,为建立一套与我国时代特点相适应的白内障超声乳化手术培训体系提供参考。     

新鲜羊膜及几种保存羊膜移植治疗角膜碱烧伤★

目的：近年来羊膜移植成为治疗角膜碱烧伤较为有效的手段之一，但其生物学基础尚不完全清楚。观察不同活性羊膜移植对兔眼角膜碱烧伤的治疗效果，并分析其生物活性成分作用。 方法：实验于2004-01/07于重庆医科大学动物实验中心实验室完成，动物实验方法符合动物伦理学要求。①实验材料及分组：健康产妇剖宫产胎盘由重庆医科大学附属第一医院产科提供。选用新西兰大白兔45只，按随机数字表法分为5组（n =9）：新鲜羊膜组、甘油保存羊膜组、乙醇保存羊膜组、真空干燥羊膜组及对照组。②实验方法：于新鲜羊膜制备后24 h内，保存羊膜保存1个月后行羊膜移植。③实验评估：术后2~21 d每日、21 d后每3日观察眼表角膜透明度及新生血管生长情况；术后14，30，60 d行荧光素染色，观察角膜上皮的修复情况；术后2周、1个月、2个月行组织病理和透射电镜观察。 结果：白兔43只进入结果分析。①在角膜透明性及角膜上皮修复速度上新鲜羊膜组、甘油保存羊膜组和真空干燥羊膜组无明显差异，均明显优于乙醇保存羊膜组和对照组，乙醇保存羊膜组与对照组无明显差异。②在抑制新生血管方面，新鲜羊膜组明显优于甘油保存羊膜组及真空干燥羊膜组。 结论：真空干燥羊膜、甘油保存羊膜和新鲜羊膜移植后均能减轻眼表碱烧伤的炎症反应，促进角膜上皮修复。其中新鲜羊膜效果最好，可能与其较其他羊膜含有更多的生物活性物质有关。     

极低频电磁场对雄性小鼠生殖的影响

目的　研究极低频电磁场 (ELFEMFs)对雄性小鼠生殖的影响。方法　 94只昆明种清洁级雄性小鼠分别暴露于 5 0Hz,0 .2、3.2、6 .4mT电磁场下 ,持续 2周或 4周 ,观测小鼠睾丸重量、睾丸组织学变化 ,计量其精子数、精子活动率及精子头部畸形率 ,采用流式细胞术检测睾丸不同倍体细胞的百分比、DNA含量以及各时相的细胞百分比。结果　 6 .4mT电磁场暴露 4周后 ,小鼠睾丸重量为( 76 .0 6± 32 .2 5 )mg ,比对照组 [( 111.4 4± 19.99)mg]明显下降 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;电磁场暴露各组小鼠睾丸组织学无明显改变 ;电磁场暴露 4周组小鼠精子数量均下降 ,其中 0 .2mT和 6 .4mT暴露组分别为 ( 4 .87± 0 .94 )× 10 6 ml和 ( 4 .30± 1.89)× 10 6 ml,与对照组 [( 6 .6 7± 0 .70 )× 10 6 ml]比较 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;电磁场暴露各组小鼠精子活动率均下降 ,0 .2、3.2、6 .4mT电磁场暴露组小鼠 2周和 4周的精子畸形率分别为 ( 7.4 16± 3.35 2 ) %、( 6 .86 2± 2 .94 7) %、( 8.112± 4 .6 15 ) %和 ( 10 .2 6 7±3.836 ) %、( 11.0 2 7± 7.0 5 9) %、( 8.814± 3.6 78) % ,与对照组 [( 4 .0 98± 2 .0 2 8) %、( 3.714± 1.830 ) % ]的差异有显著性 (P <0 .0 1) ;6 .4mT电磁场暴露 2周组小鼠     

经皮肾镜取石术治疗上尿路结石的临床体会

<正>泌尿系结石是泌尿外科的常见疾病,尤其是上尿路结石的发生几率很高。以往多采用开放性手术治疗,创伤大,术后并发症多,治疗效果不理想,该方法目前已逐渐被微创手术取代[l]。近年来,我院采用微创经皮肾镜取石术(MPCNL)治疗上尿路结石,取得了满意的临床效果,现将资料分析总结如下。