PAI-1基因启动子区4G/5G多态性与反复自然流产相关性的研究

目的:探讨纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)基因启动子区4G/5G插入和缺失多态性与反复自然流产的相关性。方法:应用聚合酶链反应(PCR)技术检测57例反复自然流产患者和153例对照组PAI-1基因启动子区4G/5G多态性,并进行比较。结果:反复自然流产组PAI-1基因型频率和等位基因频率分布:4G/4G为26.3%,4G/5G为54.4%,5G/5G为19.3%,4G等位基因频率为0.535,5G等位基因频率为0.465;对照组PAI-1基因型频率和等位基因频率分布:4G/4G为21.6%,4G/5G为56.2%,5G/5G为22.2%,4G等位基因频率为0.497,5G等位基因频率为0.503,经统计学处理,两组各基因型和等位基因频率均无显著性差异(P>0.05)。结论:PAI-1基因启动子区4G/5G多态性与反复自然流产发病无明显的相关性。     

早产新生儿体重对CAH筛查中17-羟孕酮结果的影响分析

目的探讨不同出生体重早产新生儿17-羟孕酮(17-OHP)分布状况,以及对筛查先天性肾上腺皮质增生症(CAH)结果的影响。方法采用时间分辨荧光免疫分析方法检测新生儿末稍血17-OHP浓度。结果体重<1500g的早产新生儿17-OHP均数±SD为(63.3±16.3)nmol/L,体重1500～1999g的早产新生儿17-OHP均数±SD为(38.1±22.6)nmol/L,体重2000～2499g的早产新生儿17-OHP均数±SD为(28.1±12.7)nmol/L,体重≥2500g的早产新生儿17-OHP均数±SD为(20.8±10.2)nmol/L。正常体重组(≥2500g)的早产新生儿17-OHP值与其余三个低体重早产新生儿组比较,有显著性差异(P<0.05)。结论用统一17-OHP切割值<30nmol/L对新生儿CAH筛查结果有一定的影响,建议低体重早产新生儿(<2500g)的17-OHP切割值定为<70nmol/L较好,以减少假阳性率和召回率。     

实时PCR和cycling probe技术检测母血浆游离胎儿DNA筛选重型β地中海贫血胎儿

目的 通过检测孕妇外周血中的游离胎儿DNA来筛选重型β-地中海贫血胎儿.方法 选择行产前基因诊断的夫妇6对,孕妇孕周23～26周.血液学检查:胎儿的父亲均为β-地中海贫血17M/N型,孕妇本人为携带除17M/N型之外的另一β-地中海贫血突变类型.针对CD17(A→T)无义突变,设计β-珠蛋白肽链上该等位基因的一对特异性引物和通过cycling probe法分别设计检测正常基因序列和基因突变位点的两条荧光探针,分别用FAM和HEX荧光标记.结合RT-PCR技术检测孕妇外周血中游离胎儿DNA,诊断胎儿是否遗传了其父亲的β地中海贫血17M/N碱基突变位点.同时与脐血血液学检查所诊断的胎儿地贫基因型对照.结果 提取的6例孕妇血浆DNA模板中有3例同时显示FAM和HEX荧光信号值阳性结果,即这3例孕妇的胎儿遗传了父亲β-珠蛋白肽链上CD17位点的突变碱基(A→T).另外3例孕妇血浆DNA模板的FAM信号值阳性,HEX信号值阴性,即所孕胎儿没有遗传父亲的CD17位点的突变碱基.结论 利用RT-PCR和cycling probe技术检测孕妇外周血中的游离胎儿DNA可用来筛选患重型地中海贫血的胎儿.     

应用磁激活细胞分选法从母血中分离胎儿有核红细胞做FISH行无创性产前诊断的研究

目的:尽管胎儿有核红细胞在母血中含量甚微,但它的存在却为无创伤性产前基因诊断提供了潜在资源。本研究意在建立一种利用从母血中分选出的胎儿有核红细胞进行无创伤性产前基因诊断的方法。方法:抽取14例妊娠18~32周的拟行产前诊断的孕妇外周血20m l,分别进行单梯度密度离心、用CD14、CD45、CD71标记的阴性和阳性免疫磁珠分选、K le ihaur-Betke(K-B)染色和荧光原位杂交(FISH)。结果:所有标本均分选出胎儿有核红细胞(nuc leated red b lood cell,NR-BC),并经K-B染色和FISH鉴定。由FISH确定的胎儿性别,经脐带血培养染色体核型分析鉴定,结果显示该方法判定男胎的敏感度为100%,特异度为92.86%;判定女胎的敏感度为92.86%,特异度为100%。结论:应用磁珠分选母血中的胎儿细胞,并通过FISH标记进一步检测胎儿特定染色体行无创性产前诊断的方法有重要的临床应用价值。     

孕中晚期胎儿血细胞成分的研究

目的建立孕周为19~37周各胎龄段的正常胎儿脐血血细胞成分的参考值范围,了解胎儿血细胞的生成情况,为产前和早产儿血液学疾病的诊断提供依据。方法采用Cou lter GENS system2型全自动血液分析仪检测182例胎儿血常规12项参数,并用显微镜人工镜检分类。结果从19~37周WBC从3.58×109/L增加到5.76×109/L,随孕周的增加WBC是逐渐增加的,WBC分类结果显示以淋巴细胞为主,中性粒细胞较少,随孕周的增加,淋巴细胞逐渐减少,中性粒细胞逐渐增加,有核红细胞随孕周的增加而逐渐减少,单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞随孕周的变化不明显;RBC、HGB、HCT随着孕周的增加而逐渐增加,而MCV则是随着孕周的增加而逐渐减少,MCH、MCHC在各胎龄段之间的差异无统计学意义;PLT在各胎龄段之间的变化不明显,基本维持在210×109/L的水平,PDW、MPV、PCT在各胎龄段之间差异亦无统计学意义。结论胎儿脐血血细胞成分处在一个动态的变化过程中,建立不同胎龄段胎儿脐血中血细胞成分的参考值范围有助于产前和早产儿疾病的诊断。     

应用转铁蛋白受体和胎儿血红蛋白标记染色方法分选孕妇外周血中胎儿有核红细胞的研究

由于孕妇外周血中胎儿细胞的含量极少，Hahn，Holzgreve和Bianchi等报道，孕妇每毫升外周血中仅有1～2个完整胎儿细胞。所以采用特异性单克隆抗体对胎儿细胞进行标记，并结合流式细胞仪进行高效富集分选的技术，是分离、纯化孕妇外周血中胎儿细胞的最佳手段。但因目前尚未发现识别胎儿细胞的特异性抗体，故不同学者选用的标记性抗体也有所不同。本研究采用荧光激活细胞分离技术（fluorescence-activated cell sorting，FACS），通过对孕妇外周血及未孕妇女外周血中转铁蛋白受体（transferrin receptor，CD71）单标记染色和胎儿血红蛋白（fetal haemoglobin，HbF）单标记染色与双标记染色情况的比较，探讨CD71与HbF染色法分选胎儿有核红细胞的价值。     

胎儿心脏三血管气管平面在先天性心脏病筛查中的价值

目的 探讨胎儿三血管气管平面的声像图特点及其筛查胎儿先天性心脏病的价值。方法 回顾性分析2003年4月至2005年4月1212例接受产前胎儿心脏超声筛查孕妇资料，取胎儿心脏检查的常规6个标准切面，然后在四腔心切面的基础上缓慢平行向胎儿头侧移动探头即可显示上纵隔横切面，即三血管气管平面，再叠加彩色多普勒血流显像，观察各房室及大动脉血流分布和血流方向。结果 1212例胎儿超声心动图检出胎儿心脏结构异常47例，22例合并心外畸形。33例在本院引产，20例尸检，其中18例尸检与产前超声诊断相符，1例单心房单心室并大动脉位置正常误诊为单心房单心室并大动脉转位，1例单心房单心室并永存动脉干误诊为完全性心内膜垫缺损并永存动脉干。15例胎儿抽脐带血检查染色体，3例染色体异常。结论 三血管气管平面在筛查胎儿大动脉和心室流出道异常的先天性心脏病中有重要作用。     

胎儿三血管气管平面在胎儿心室发育不良诊断中的价值

目的探讨胎儿三血管气管平面(3V T切面)在胎儿心室发育不良诊断中的价值.方法回顾性分析2003年4月-2005年1月在我院产前诊断门诊接受产前胎儿心脏超声筛查孕妇1212例,年龄20～44岁,孕周为16～38周.取胎儿心脏检查的常规6个标准切面,然后在四腔心切面的基础上缓慢平行向胎儿头侧移动探头即可显示胎儿上纵隔横切面,即三血管气管平面,再叠加彩色多普勒血流显像,观察各房室及大动脉血流分布和血流方向.结果 1212例胎儿超声心动图均获得满意的3V T切面,共检出胎儿心脏结构异常47例,其中心室发育不良11例(8例左心发育不良综合征和3例右心发育不良),年龄23～42岁,平均(29.8±5.7)岁,孕周20～39周,平均(26.7±5.6)周.10例心室发育不良均已引产并有5例尸检,尸检结论与超声检查完全一致,1例胎死宫内.结论胎儿3V T切面是一个简单、可靠的胎儿心脏大血管的筛查方法,能提高我们对涉及大动脉异常胎儿先心病的理解,是诊断胎儿心室发育不良的又一个重要切面.     

胎儿心轴异常——先天性心脏病和胸腹病变的诊断线索

目的探讨胎儿心轴异常在先心病和胸腹病变超声诊断中的意义。方法中孕期经超声检查的173例正常胎儿和54例先心病、10例胸腹病变胎儿,分为三组,在四腔心切面上进行心轴角度的测量和分析。结果正常胎儿的平均心轴角度为(41.1±8.2)°,先心病组为(51.4±18.3)°,与正常组相比有显著性差异(P<0.0001),其中左心发育不良综合征、心内膜垫缺损、右室双出口等病种合并心轴异常的比例较高。胸腹病变组平均心轴角度为(59.7±15.9)°,与正常组相比有显著性差异(P<0.001),导致心轴异常的病种主要为膈疝和腹腔内脏外翻。按超过正常胎儿99%正常值范围(20.3°～61.9°)为异常心轴统计,心轴左偏(>62°)在三组中分别为1/173(0.6%),16/54(29.6%)和1/10(10.0%);心轴右偏(<20°)在三组中分别为0,6/54(11.1%)和3/10(30.0%)。结论中孕期胎儿心轴角度的测定简单易行,当其<20°或>62°时提示可能存在心脏畸形或胸腹腔病变,应进一步检查确诊。     

规范超声筛查胎儿脐膨出的价值

目的探讨规范超声筛查在胎儿脐膨出诊断中的价值。方法按照我院胎儿超声筛查规范分三阶段进行，早孕期（11～14孕周）、中孕期（18～24孕周）超声筛查和晚孕期胎儿畸形补漏检查。结果2003年1月至2005年5月间我院共进行了21924例胎儿超声筛查，其中脐膨出11例，超声检出5例，漏诊6例。漏诊的原因都是没有严格按照胎儿超声筛查规范进行。结论胎儿规范超声筛查可以帮助我们检出大多数的脐膨出，尽可能避免漏诊，即可客观地反映脐膨出的情况，又可减轻医疗风险。