人脐带沃顿胶间充质干细胞与脑肿瘤干细胞的共培养

背景:人脐带沃顿胶间充质干细胞满足了国际细胞治疗协会规定的间充质干细胞的特点,能够向骨、软骨、脂肪、肌肉、神经细胞诱导分化并支持其他干细胞的扩增,对免疫系统有良好的耐受性,对肿瘤有定向迁徙性.目的:观察人脐带沃顿胶间充质干细胞与脑肿瘤干细胞体外共培养后,脑肿瘤干细胞的生物学变化.方法:以原位法培养人脐带沃顿胶间充质干细胞,以酶消化法培养人脑肿瘤组织脑肿瘤干细胞,以细胞传代法获取第3代细胞.应用不添加任何生长因子的无血清培养基将两种细胞在24孔板中进行直接共培养.第3,7天应用流式细胞术检测细胞CD133表达;应用免疫荧光法检测贴壁细胞巢蛋白和胶质纤维酸性蛋白表达;将第3天离心所得的共培养上清液重悬第3代脑肿瘤干细胞并与正常培养悬浮的第3代脑肿瘤干细胞置入96孔板中,应用酶标仪检测两组细胞生长曲线的差异.结果与结论:两种细胞共培养后在倒置显微镜下可见脑肿瘤干细胞球随着培养时间的增加出现分解、贴壁、分化现象;贴壁的脑肿瘤干细胞免疫荧光染色胶质纤维酸性蛋白和巢蛋白均阳性.恶性程度高的脑肿瘤组织培养的脑肿瘤干细胞表达CD133量越高,而与沃顿胶间充质干细胞共培养后随着时间的变化均出现CD133表达量降低.共培养3 d的上清液培养的脑肿瘤干细胞与正常培养基培养的脑肿瘤干细胞相比,增殖明显受到抑制.结果显示沃顿胶间充质干细胞与脑肿瘤干细胞体外共培养后可限制脑肿瘤干细胞表面标记物CD133的阳性率以及细胞增殖能力并促使其分化.     

自体骨髓间充质干细胞培养后经肝动脉介入治疗失代偿期肝硬化1例

背景:骨髓间充质干细胞在特定环境下可分化成肝干细胞及肝细胞,从而参与肝结构和功能的修复和重构.目的:进一步验证自体骨髓间充质干细胞培养后经肝动脉介入治疗肝硬化的安全性、可行性及疗效.方法:1例肝硬化患者进行自体骨髓单个核细胞移植,骨穿采集自体骨髓体外分离纯化骨髓单个核细胞.骨髓单核细胞培养 4 d后经肝动脉插管将其移植入肝脏.移植后4周观察血清白蛋白、胆碱酯酶、凝血酶原活动度、总胆红素、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、凝血酶原时间、纤维蛋白原变化情况,观察患者并发症及预后.结果与结论:培养后骨髓间充质干细胞数量明显增多,患者移植前后各项指标变化情况:移植前血清白蛋白、胆碱酯酶、凝血酶原活动度、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、凝血酶原时间、纤维蛋白原分别为29.43 g/L,2 378.5 U /L,47.4%,112.78 U/L,79.36 U/L,17.91 s,2.01 g/L.移植后4周分别为33.30 g/L,2 866.5 U /L,55. 8%,79.01 U/L,56.37 U/L,16.26 s,2.35 g/L.移植后无严重不良事件发生.结果表明,自体骨髓间充质干细胞移培养后植治疗可使失代偿期肝硬化患者肝功能明显改善,治疗安全有效且不良反应小,可作为中晚期肝硬化患者的临床治疗方案.     

噬菌体抗体库的构建及人源抗内毒素类脂A抗体的筛选

目的寻找一种治疗内毒素血症及其并发症较为有效的途径.方法从感染革兰阴性杆菌J7患者体内含有内毒素类脂A抗体的淋巴细胞中提取mRNA,经反转录再从IgG重链Fd两端及轻链通用引物分别扩增Fab基因片段,依次插入到噬菌体载体pCOMR3中,电穿孔转入大肠杆菌XL-blue,经辅助病毒VCSM13感染,重组噬菌体溶源裂解.结果Fab抗体表达于噬菌体CPⅢ的N端,噬菌体抗体库的容量为4.8×106,筛选出抗内毒素类脂A抗体,经LPS蛋白对噬菌体抗体库进行3轮淘选,使抗内毒素类脂A的特异性抗体得到100倍的富集.结论通过直接和竞争ELISA实验筛选出3株结合活性好的特异性抗体,为下一步应用研究奠定了基础.     

自制α-硫辛酸缓释片对氧化低密度脂蛋白致兔实验性动脉粥样硬化的影响

背景：由于硫酸锌半衰期短,必须多次给药,所以临床常用针剂剂型患者依从性差。目的：利用食饵性兔动脉粥样硬化模型观察自制α-硫辛酸口服缓释片对动脉粥样硬化的预防作用及其可能途径。设计、时间及地点：随机对照动物实验,于2008—05/09在南方医科大学珠江医院中心实验室完成。材料：24只新西兰大白兔喂养1周后随机分成3组,分别为正常组、模型组、硫辛酸组,每组8只。方法：正常组喂饲普通颗粒饲料。模型组用高脂饲料喂养,即在普通饲料中加入1g胆固醇和8g猪油。硫辛酸组用高脂饲料喂养,另外每只兔通过胃管给予自制硫辛酸缓释片300mg/d。喂饲高脂饲料及预防性用药12周。主要观察指标：实验结束后分别检测各组血清三酰甘油、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、丙二醛、超氧化物歧化酶、氧化低密度脂蛋白、一氧化氮及内皮素1水平。结果：①纳入24只兔全部进入结果分析,无脱失。②喂饲高脂饲料后,模型组血清中总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇、丙二醛、氧化低密度脂蛋白及内皮素1水平均显著高于正常对照组（P〈0．05）,高密度脂蛋白胆固醇、超氧化物歧化酶及一氧化氮水平显著低于正常对照组（P〈0．05）。③硫辛酸组血清中总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇、丙二醛、氧化低密度脂蛋白及内皮素1水平均显著低于模型组（P〈0．05）。硫辛酸组超氧化物歧化酶及一氧化氮水平高于模型组（P〈0．01）。结论：自制α-硫辛酸缓释片具有预防动脉粥样硬化的作用,其机制可能与其清除超氧阴离子等自由基,减轻氧化低密度脂蛋白对血管内皮细胞的氧化损伤有关。     

1例神经纤维瘤病Ⅱ型的护理体会

双侧听神经瘤属多发性神经纤维瘤病Ⅱ型（NF2)。1822年由Wishant首先报道，本病罕见．约占听神经瘤总数的1％--2％。该病虽属良性病变，但肿瘤与周围重要组织毗邻，手术全切除十分困难。我科于2003年1月6日收治一例神经纤维瘤病Ⅱ型伴右桥小脑角脑膜瘤、胸腔肿瘤、皮肤咖啡色斑的患者。现将护理体会介绍如下。     

邻面去釉在正畸治疗中的应用

目的 评价邻面去釉在正畸临床治疗中的疗效。方法 选择“边缘病例”或Bolton指数异常病例共57例,将矫治前后进行比较。结果 57例均取得满意疗效,矫治简化、疗程缩短且疗效稳定。结论 邻面去釉是正畸治疗中不可忽略的治疗手段。     

人重组IL-3和GM-CSF促进IL-2衍生的T细胞的增殖

最近,作者报道了人重组多集落刺激因子(IL-3)和粒细胞-单核细胞集落刺激因子(Gm-CSF)能独立维持儿童急性T 淋巴细胞白血病细胞系的生长,这一发现提示这两种因子可能作用于正常的造血系统中极早期     

Brugada综合征1例

患者男性　 78岁因活动后气短数月 ,于 2 0 0 0年 5月 8日就诊。既往无头晕、黑朦及抽搐发作史。查体 :Ｂｐ 14 7ｋＰａ/ 10 7ｋＰａ ,ＨＲ 6 1次 /ｍｉｎ ,律整 ,可闻Ｓ4 ,无杂音 ;胸透心肺未见异常 ;ＵＣＧ示 :主动脉硬化 ,主动脉瓣增厚 ,其余各项参数均在正常范围 ;ＥＫＧ示 :窦性心律 ,心率 88次 /ｍｉｎ ,Ｐ Ｒ间期 0 19ｓ ,Ｑ Ｔ间期 0 37ｓ,ＱＲＳＶ1:ｒｓＲ 型、Ｖ2 :ＲｓＲ 型、Ｖ3:ＲＳ型 ,ＱＲＳ时限 0 11ｓ、ＳＴＶ1～ 3 下垂形抬高 0 15ｍｖ～ 0 30ｍｖ、ＴＶ1～ 3 倒置或 -双向 ,诊断 :窦性心律 ,心电轴正常 ,不完全右…     

食管癌患者SIL_(-2R)和IL_(-6)的研究

本文对25例食管癌患者和31例健康对照者外周血单个核细胞(PBMC)经 PHA 刺激后 IL_(-6)产生能力和细胞培养上清中 SIL-_(2R)水平做了研究,同时检测了血清中 SIL_(-2R)水平。结果显示,食管癌患者产生 IL_(?)能力显著升高(P<0.001);食管癌患血清 SIL_(-2R)水平同健康者相比也显著升高(P<0.001),而细胞培养上清SIL_(-2R)浓度,两者比较差异无显著性(P>0.05)。     

66例痛风病患者血尿酸观察

痛风是瞟吟代谢紊乱及尿酸排泄减少所引起的一组疾病。高尿酸血症是痛风的重要生化标志,高尿酸血症与发生痛风的关系,及又如何引起痛风性关节炎和尿酸性肾病变等,这些一直是痛风发病中所研究的重要问题。tide床表现痛风患者最初临床表现为反复发作的急性关节炎,主要是在中老年男性和绝经后妇女。急性痛风性关节炎亦是40岁以上男性最常见的疾病。多数患者无前驱症状,仅部分患者于发病前有疲乏,周身不适及关节局部刺激痛等,先兆关节发作时,多数患者无全身症状,仅少数伴有头痛、低热、白细胞升高及血沉快等。四季均可发病,以春秋季最…