武汉地区学生近视的相关因素分析

目的通过对武汉市武昌区几所学校进行视力状况调查,探索学生近视的影响因素。方法采用分层整群随机抽样原则和自填问卷法,抽取武汉市武昌区1497名小学、中学及大学学生的视力检测数据进行相关因素分析。统计分析采用2χ检验、相关分析及多元逐步回归。结果学生近视率为57.2%(男生为55.9%,女生为58.5%),随着学习阶段的变化近视率呈逐步增加的趋势,但男生和女生近视率无显著性差异。影响近视的因素分别为:年龄增大、看书时不能保持一尺眼距、平均每天近距用眼时间长、既往患过眼疾。结论各学习阶段视率均高于2000年全国水平,男生和女性近视率接近。近视的发生发展是一个循序渐进的过程,与视近年限、视近距离和持续时间密切相关,此外既往患过眼疾的学生有增加近视危险性的可能。     

利用酶切保护PCR检测鱼肉中二(噁)英类化合物

目的 探讨利用酶切保护PCR分析(EPM-PCR)检测鱼肉中二(噁)英类化合物(DLCs)的毒性当量(TEQs)的可行性.方法 将2份1 g鱼肉样本经过硝化、提取及净化步骤以后,采用EPM-PCR分析方法检测其中TEQs,并与高分辨率气相色谱-高分辩率质谱联用技术(HRGC-HRMS)的检测结果进行比较.结果 两份鱼肉样本经酶切保护PCR分析得到的TEQs值分别是10.92 pg/g和39.61 pg/g,相当于HRGC-HRMS标准方法 的2.91倍和3.68倍.结论 EPM-PCR可作为有效的筛选鱼肉样本中DLCs的一种手段.     

Enhancement of Immunological Activity of CpG ODN by Chitosan Gene Carrier

To investigate the enhancement of immunological activity of CpG ODN by chitosan gene carrier in mice, the effect of lymphocyte proliferation was detected in mice by using MTT, the levels of IgG and cytokines (IL-2 and IL-12) in serum were measured by ELISA and peripheral blood T lymphocyte subsets CD4 , CD8 were analyzed by flow cytometry. Our results showed that spleen lymphocytes isolated from the CS-CpG ODN group of mice showed the strongest proliferation (SI =1.551), and the levels of IgG, IL-2 and IL-12 in serum were higher than those of other groups. Com- pared with the immunization with CpG ODN, the immunization with CS-CpG ODN gene carrier was more efficient in up-regulating the percentage of CD4 T cells and the ratio of CD4 /CD8 of mice. It was concluded that CS gene carrier of CpG ODN was much more effective in improving immunity of CpG ODN in mice.     

枸橼酸他莫昔芬胶囊的人体生物等效性

目的:研究枸橼酸他莫昔芬胶囊在人体的相时生物利用度和生物等效性.方法:20名健康男性受试者,采用双周期交叉、自身对照试验设计,分别单剂量口服枸橼酸他莫昔芬受试和参比制剂各40 mg,采用液相色谱-串联质谱法测定其血药浓度,应用DAS软件计算药动学参数和相对生物利用度,评价2种制剂的生物等效性.结果:枸橼酸他莫昔芬受试和参比制剂的主要药动学参数:t1/2分别为(53.5±14.4)h和(51.7±8.9)h;tmax分别为(3.9±0.9)h和(4.0±1.1)h;Cmax分别为(108.1±19.8)μg·L-1和(101.3±16.5)μg·L-1;AUC0-72分别为(3 073.7±439.1)μg·h·L-1和(3148.8±373.7)μg·h·L-1;AUC0-∞分别为(5 074.8±1 082.2)μg·h·L-1和(5 121.2±902.0)μg·h-1.方差分析结果表明,2种制剂的主要药动学参数之间差异无显著性.枸橼酸他莫昔芬受试制剂的相对生物利用度为(97.9±10.8)%.结论:经统计学分析,两种制刑具有生物等效性.     

细胞DNA中8-OH-dG的毛细管区带电泳检测方法的研究

目的以人肝肿瘤细胞HepG2为工具细胞,通过优化选择毛细管区带电泳的运行电压、温度、缓冲溶液pH值等条件,建立细胞DNA氧化损伤后8OH dG的毛细管区带电泳分离检测方法,并以此方法分别检测未经H2O2处理组与经15mmol LH2O2处理组HepG2细胞DNA中8OH dG含量的变化。方法提取DNA采用饱和盐析法,避免经酚氯仿抽提导致8OH dG的产生。DNA溶液中加入DNaseI、蛇毒磷酸二酯酶及碱性磷酸酶得到游离核苷,并经去蛋白,二乙醚抽提后用于HPCE分析。优化后的分析条件为紫外检测器波长为254nm;pH值为9.5,浓度为20mmol L硼酸钠水溶液;毛细管长度为47cm;运行电压为25kV;温度为25℃;进样方式为重力进样,进样时间为20秒。结果在上述实验条件下,细胞DNA处理得到的游离核苷电泳结果与5种核苷标准品的电泳结果符合。经或未经H2O2处理组HepG2细胞DNA中均检测出8OH dG峰,H2O2处理组细胞DNA中8OH dG含量增加。结论此方法操作简便易行,进样量小,需时间及费用少,灵敏度较高,对人体无损害,并为8OH dG在人群生物监测方面的应用奠定了实验基础。     

二噁英对HepG2和SPC-Al细胞P53和P38 MAPK基因表达的影响

[目的] 探讨二(口恶)英(TCDD)对人体肝癌细胞株(HepG2)和肺腺癌细胞株(SPC-A1)中P53基因和P38 MAPK基因表达的影响,并研究剂量与效应的关系.[方法] 用常规的细胞培养方法,利用RT-PCR方法对2种基因进行表达,并以β-actin作为内对照.对基因表达的强度进行比较分析.[结果] P38 MAPK基因在2种细胞中都有表达,在HepG2中,P38 MAPK基因表达随浓度1、 5、 10、 20 nmol/L增加先抑后扬(表达值分别为0.900、 0.820、 1.260、 0.898,P＜0.05),而在SPC-A1中差异无显著性(表达值分别为0.898、 0.919、 0.808、 0.846,P＞0.05).P53基因在人体肝癌细胞株(HepG2)中有表达,并随浓度增加而上调(表达值分别为0.764、 0.890、 1.099、 1.218、 1.405,P＜0.05)而在肺腺癌细胞株(SPC-A1)中未见表达.[结论] 二英对人体肝癌细胞株(HepG2)中P53基因和P38 MAPK基因有诱导作用,在肺腺癌细胞株(SPC-A1)中仅见对P38 MAPK基因有诱导作用,P53蛋白未见阳性表达.     

外切酶保护PCR快速检测垃圾焚烧飞灰中二噁英类化合物

[目的]利用外切酶保护PCR分析(exonuclease protection mediated-PCR assay，EPM-PCR)方法检测焚烧炉飞灰中的二噁英类化合物(dioxins-like chemicals，DIEs)的毒性当量(toxic equivalency quantifies，TEQs)。[方法]将两份5g飞灰样品经过抽提、浓缩及纯化等前处理步骤后，采用EPM-PCR方法检测其中的二噁英类化合物的TEQs。与高分辨气相色谱-质谱联用技术(high-resolution chromatography combined with high-resolution mass spectrometry，HRGC-HRMS)检测结果相比较，分析其差异原因。[结果]两份垃圾焚烧飞灰样品TEQs值分别为1288ng／kg和160130ng／kg，相当于根据HRGC-HRMS检测结果估算出来的TEQ值的1．61倍和2．63倍。EPM-PCR检测TEQ值偏高可能由于检测物中包含一些被化学方法排除的物质(如多氯联苯)造成。[结论]结合有效的前处理过程，EPM-PCR可快速地用于实际样品的定性与定量检测。     

高通量筛选DNA加合物位点方法的探讨

目的探讨建立一种高通量的筛选DNA加合物结合位点的方法。方法以烷化剂氮芥处理人肝瘤HepG2细胞形成DNA加合物模型．利用基因表达系列分析技术(serrial analysis of gene expression，SAGE)对连接介导聚合酶链式反应(ligation mediated PCR，LMPCP)进行改良，以改良后的方法进行检测。结果PCR扩增产物大小约为75bp，与理论设计相符合。结论该方法的设计合理、可行。     

电解可脱性铂金弹簧圈栓塞治疗颅内动脉瘤

目的　评价电解可脱性铂金弹簧圈(GDC)栓塞颅内动脉瘤的效果。方法　在局麻或全麻及全身抗凝下,经导引导管将微导管头端送入动脉瘤腔,用GDC逐步将瘤腔填塞满意。术前、术中、术后造影对比,随访1～16个月。结果　 22例共23个动脉瘤,栓塞21个,其中16个100％栓塞(76．2％),4个90％栓塞(19．0％),1个50％栓塞(4．8％);1个伴发动脉瘤未作处理;1个栓塞失败。死亡1例,余术后随访无SAH发生。4例动眼神经麻痹中3例完全恢复,1例稍有好转。结论　 GDC栓塞治疗颅内动脉瘤安全可靠,效果良好,为颅内动脉瘤的治疗开拓了新途径。     

电解可脱性铂金弹簧圈栓塞治疗颅内动脉瘤

目的：评价电解可脱性铂金弹簧圈（ＧＤＣ）栓塞颅内动脉瘤的效果。方法在局麻或全麻及全身抗凝下,经导引导管将微导管头端送入动脉瘤腔,用ＧＤＣ逐步将瘤腔填塞满意。术前、术中、术后造影对比,随访１－１６个月。结果２２例共２３个动脉瘤栓塞２１例,其中１６个１００％栓塞（７６２％）,４个９０％栓塞（１９．０％）,１个５０％栓塞（４．８％）;１个伴发动脉瘤未作处理;１个栓塞失败。死亡１例,余术后随访无ＳＡＨ发生