脂肪组织中TNF-α基因表达与神经肽Y Y5受体反义基因减肥降脂作用关系的研究

目的：探讨脂肪组织中TNF-α基因表达与神经肽Y（NPY）Y5受体反义基因减肥降脂作用的关系。方法：建立高营养饮食诱导的肥胖大鼠模型，侧脑室插管后注射NPY Y5受体反义，错义寡核苷酸或生理盐水，观察肥胖大鼠腹腔内脂肪组织湿重与血脂的变化，采用RT－PCR技术检测腹膜后胎肪组织中TNF-α基因的表达水平。结果：（1）高营养饮食诱导下，肥胖大鼠腹腔内脂肪组织湿重与血脂水平均明显高于正常大鼠，腹膜后脂肪组织中TNF-α基因的表达水平则显著高于正常大鼠；（2）NPY Y5受体反义寡核苷酸干预后，肥胖大鼠腹腔内脂肪组织湿重与血脂水平均明显降低，腹膜后脂肪组织中TNF-α基因的表达水平则显著低于肥胖对照大鼠。结论：侧脑室注射NPY Y5受体反义寡核苷酸可显著低肥胖大鼠的体脂，血脂，其机制可能与腹膜后脂肪组织TNF-α基因的表达下调有关。     

Insulin/FoxO1/Pdx1/MafA基因在宫内发育迟缓大鼠胰腺发育中的表达

目的:探讨宫内发育迟缓(intrauterine growth retardation,IUGR)大鼠在胚胎期和新生后Insulin/FoxO1/Pdx1/MafA基因的表达?方法:清洁级SD大鼠,雌雄鼠1∶3合笼交配,孕鼠按受孕顺序随机分为2组(IUGR组和对照组)?IUGR组自妊娠第1天至分娩给予正常对照组饲料进食量的半量;对照组妊娠全程任意摄取饲料;应用显微分离及提取技术取大鼠胚胎发育第14.5天?第19.5天及新生大鼠胰腺组织;采用HE染色,光镜观察胰腺不同发育时期形态学变化;使用RT-PCR技术检测胚胎发育第14.5天,第19.5天及新生大鼠胰腺Insulin/FoxO1/Pdx1/MafA基因的表达情况?结果:①与对照组大鼠相比,IUGR组胰腺在发育各期均有形态学上的改变,表现为组织松散,结构不清晰,胰岛数量及面积减少;②Insulin/FoxO1/Pdx1/MafA基因全程均有表达;③Insulin?MafA基因随胎龄的增长表达量增多,与对照组相比,IUGR组Insulin基因表达无明显差异(P > 0.05),而MafA基因表达较之减少(P < 0.05);④FoxO1?Pdx1基因均在胚胎早期表达较多,随胎龄的增长表达量下降,且与对照组相比,IUGR组Pdx1基因表达无明显差异(P > 0.05),FoxO1表达较对照组减少(P < 0.05)?结论:宫内发育迟缓对胰腺发育相关基因Insulin/FoxO1/Pdx1/MafA的表达有影响?     

南京市学龄儿童β3-肾上腺素能受体Trp64Arg变异的检出及其意义

目的　探讨β3 肾上腺素能受体 (β3 AR)Trp6 4Arg变异在南京市学龄儿童中的分布情况及其意义。方法　用基因多态性分析方法对 177名儿童的 β3 AR基因型进行调查分析 ,并测量其身高、体质量 ,计算体重指数 (BMI)。结果　调查对象中有Trp6 4Arg基因型的分布 ,以女童肥胖者为多。有Trp6 4Arg变异的女童 ,其BMI高于无变异者。结论　南京市学龄儿童中有β3 ARTrp6 4Arg变异基因型的分布 ,其与女童的肥胖有关。     

女童性早熟与血清瘦素、类胰岛素样生长因子-1水平及脑电图关系的研究

目的 探讨特发性中枢性性早熟(ICPP)与单纯性乳房发育(SPT)女童血清瘦素、类胰岛素样生长因子-1(IGF-1)水平、脑电图异常率及这些指标对真性性早熟的诊断价值。方法 乳房早发育为主患儿中特发性中枢性早熟18例,单纯性乳房发育12例,用放射免疫法和酶标免疫法测定两组血清瘦素、IGF-1及行脑电图检查。结果 ICPP组血清瘦素、IGF-1水平明显高于SPT组(P均<0.001)。其脑电图异常率明显高于SPT组(P<0.01)。血清瘦素与IGF-1之间呈明显正相关(r=0.668 P<0.001)。血清瘦素与黄体生成素(LH)或LH/卵泡刺激素(FSH)间无相关性。结论 血清瘦素、IGF-1、脑电图可作为真性性早熟的早期诊断指标之一。     

三种尿微量成份在过敏性紫癜中的应用

过敏性紫癜(HSP)是一种全身性毛细血管炎性病变，为小儿常见病，其临床表现多样，如累及。肾脏可出现相应的临床表现，但往往此时肾脏受累已较久，而且是否累及肾脏又决定其远期预后，故早期监测。肾脏是否受累对其预后及治疗起重要作用。我们通过对HSP患儿尿微量白蛋白(Alb)、尿β2微球蛋白(β2—MG)、尿N—乙酰—β—D—氨基葡萄糖苷酶(NAG)的检测，探讨其变化规律及临床意义，现报告如下。     

长期低铅染毒大鼠脾脏光镜及电镜结构的观察

应用光镜和透射电镜技术观察长期低铅染毒后大鼠脾脏的结构改变。光镜下可见,脾脏边缘带相对面积减小,脾小结个为数明显减少。电镜观察可见,脾脏免疫细胞出现不同程度的线粒体肿胀、空泡化或固缩;内质网肿胀、脱颗粒。上述变化均随着铅染毒剂量的增加而加重。结果提示,长期低铅染毒可导致脾脏免疫细胞的损伤。     

Alstrom综合征患儿ALMS1基因突变分析

目的:采用DNA测序法对Alstrom综合征患儿进行ALMS1基因突变分析,同时分析患者的ALMS1基因突变特点?方法:收集临床资料,采用聚合酶链反应扩增ALMS1基因的外显子及剪切位点序列,对扩增产物进行测序和序列分析,寻找突变位点?结果:患者临床表现较典型,以婴幼儿期出现视锥-杆细胞性视网膜色素营养不良(最终导致失明)?感音神经性耳聋?躯干型肥胖?胰岛素抵抗?高胰岛素血症及2型糖尿病等为主要临床特征?患者的ALMS1基因第9外显子上发现c.7664T >A(p.L2555X),理论上这种杂合无义突变会导致蛋白翻译提前终止,第16外显子上发现c.10613~10619AGACdel,为杂合缺失移码突变,理论上这种框移突变导致蛋白质序列明显改变,第8外显子发现c.1570~1574CTCins,纯合插入非移码突变,蛋白危害性未知,可能致病?这3种突变类型均未见文献报道?结论:在患者的ALMS1基因上发现了c.7664T>A?c.10613~10619AGACdel杂合突变及c.1570~1574CTCins纯合突变;迄今为止发现的106种突变类型,大部分位于16?8和10外显子,极少数报道有位于12和18外显子?本例位于第9外显子的基因突变,在国内外属首次报道?     

马鞍山市城区学龄前儿童肥胖情况调查

目的 了解马鞍山市城区学龄前儿童超重和肥胖的流行现状及主要影响因素,为制定有效的干预措施提供科学依据。方法 采用整群抽样的方法,对马鞍山市城区13所幼儿园3~6岁儿童3 891名进行测量身高、体重,以实测体重超过标准体重120%,并排除继发性肥胖作为诊断标准。结果 马鞍山市城区学龄前儿童超重的发生率为13.6%,单纯性肥胖的发生率为7.86%,其中男童肥胖发生率明显高于女童(χ²=10.546,P=0.001)。各年龄组间儿童肥胖总发生率差异有高度统计学意义(χ²=19.504,P<0.001),学龄前儿童单纯性肥胖的发生率随年龄递增而增高,5岁上升明显。结论 马鞍山市城区学龄前儿童单纯性肥胖症的发生率较高,预防儿童肥胖重点应放在学龄前期。     

神经肽Y Y5受体基因反义寡核苷酸脑室给药对肥胖大鼠外周瘦素抵抗的影响

目的 探讨神经肽Y（NPY）Y5受体基因反义寡核苷酸脑室给药对饮食所致肥胖大鼠外周瘦素抵抗的影响。方法 （1）建立高营养饲料诱导的肥胖大鼠模型，侧脑室插管后注射NPY Y5受体基因反义、错义寡核苷酸及生理盐水，观察大鼠腹膜后脂肪湿重的变化；（2）采用ELISA双抗体夹心法测定血清瘦素含量、放免法测定血清胰岛素含量，RT－PCR技术检测脂肪组织中ob基因的表达水平，评价该疗法对肥胖大鼠外周瘦素抵抗的影响。结果 经NPY Y5受体基因反义寡核苷酸干预后，肥胖大鼠腹膜后脂肪湿重、血清胰岛素含量、血清瘦素含量、腹膜后脂肪组织ob基因mRNA表达水平均明显降低，降腹膜后脂肪组织湿重与肥胖错义组差异未达到统计学意义外，其余指标与肥胖盐水组、肥胖错义组相比差异均有显著性，而肥胖错义组与肥胖盐水组之间各观察指标差异均无显著性。结论 侧脑室注射NPY Y5受体基因反义寡核苷酸可显著减少营养性肥胖大鼠的腹膜后脂肪，降低肥胖大鼠脂肪组织ob基因表达及血清瘦素、胰岛素含量，改善外周瘦素抵抗。     

重组瘦素干预对营养性肥胖大鼠脑组织瘦素受体表达的影响

目的观察重组瘦素(leptin)对营养性肥胖大鼠脑组织瘦素特异性受体(OB-R和OB-Rb)mRNA表达的影响,探讨OB-R和OB-Rb表达水平的变化及与肥胖发生的关系,以期更加深入地研究肥胖症发生的中枢信号转导机制。方法雄性大鼠54只随机分成2组,分别喂以普通饲料和高营养饲料共7周;模型制备后再将正常组和肥胖组分别分成3组:正常对照组、正常leptin干预组、正常生理盐水干预组和肥胖对照组、肥胖leptin干预组、肥胖生理盐水干预组,每组各9只。参照Noble法及大鼠脑冠状面定位图谱,给大鼠行右侧脑室插管。恢复7d后,每日10Am在大鼠清醒状态下从导管注入重组leptin5μL(1μg/μL)或等量的生理盐水,连续5d。大鼠处死前,经升主动脉灌注4%多聚甲醛固定,制作石蜡切片、制备地高辛标记的RNA探针,应用原位杂交技术及DIG-AP-NBT-BCIP免疫学检测观察OB-R和OB-RbmRNA的表达水平。结果肥胖leptin干预组大鼠(A=0.336±0.060,t=5.45P<0.01)和正常各组脑组织中大鼠(A分别为0.312±0.072、0.347±0.077和0.341±0.078)OB-RbmRNA的表达水平均较肥胖对照组(A=0.164±0.051,t=4.91P<0.01)、肥胖生理盐水组(A=0.172±0.057)明显增高,而各组间OB-RmRNA的表达未见显著性差异(F=0.334P=0.89)。结论重组leptin干预可增加脑组织中OB-RbmRNA的表达,OB-Rb表达水平的变化可能参与肥胖发生的中枢信号转导机制。