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71.
CTAB法制备超螺旋质粒DNA 总被引:1,自引:0,他引:1
研究了基因治疗用载体质粒DNA的一种非色谱的大规模纯化方法-CTAB沉淀法,并对其进行了工艺优化. 首先采用高纯过滤介质CelPure去除大量杂质,并利用CTAB浓度梯度溶液研究了不同形式DNA(超螺旋质粒DNA、切口质粒DNA、线性质粒DNA、染色体DNA)沉淀能力的差异,选择性地从蛋白质、RNA及其他形式DNA中提取超螺旋质粒DNA. 针对含有pcDNA3的DH5a菌株,确定CTAB完全沉淀超螺旋质粒DNA的浓度为2.0 g/L,由NaCl对不同沉淀的溶解能力,确定溶解沉淀的最优盐浓度为0.75 mol/L. 用此方法得到的超螺旋质粒DNA的纯度达90%以上,收率为78.94%. RNA、蛋白质残量以及内毒素均符合药品质量标准要求. CTAB对质粒DNA的沉淀效果与质粒DNA的初始浓度有关,并且超螺旋质粒DNA浓度的降低与CTAB的添加量呈一定的线性关系. 超螺旋质粒的分子量越小越不易被分离,并且结构特性比分子量在分离过程中更据主导作用. 相似文献
72.
重组人白细胞介素-6包含体溶解工艺研究 总被引:2,自引:0,他引:2
本文系统研究了影响大肠杆菌表达的重组人白细胞介素 6 (rhIL 6 )包含体溶解的因素 ,确定了rhIL 6包含体溶解的最佳工艺条件 ,即在 pH为 8 4的 5 0mmol/LTris HCL缓冲体系中 ,变性剂尿素和还原剂 β 基乙醇 (β ME)的浓度分别为 8mol/L和 5 0mol/L ,包含体含量为 1 0mg/mL ,在 4℃下溶解 1h。包含体溶解后蛋白含量可达到 1 3mg/mL左右 ,目标蛋白的溶解率达到 98% ,纯度为 5 0 %左右 相似文献
73.
74.
75.
阿姆河右岸区块碳酸盐岩气藏H2S成因与分布规律 总被引:1,自引:0,他引:1
土库曼斯坦阿姆河右岸区块内的气藏天然气中普遍含有H2S,尤其是西北部气藏H2S含量相对较高,深入研究其成因和分布规律,才能最大限度地减少和控制由此产生的危害。根据该区地质条件和天然气组分特征,结合H2S形成机理,分析认为:①天然气中的H2S主要来源于硫酸盐热化学还原反应。由于西北部卡洛夫-牛津阶碳酸盐岩储层顶部为石灰岩和膏盐岩互层,并直接被膏盐层覆盖,具有发生硫酸盐热化学还原反应的物质条件,故其H2S含量高;东南部无石灰岩和膏盐岩互层,且有泥岩段将石灰岩储层与上覆膏盐岩层分隔,故其H2S含量低。②H2S含量的高低整体上受沉积相带的控制。在深水高伽马泥岩分布区及开阔台地深水沉积区,H2S含量普遍较低;而在无高伽马泥岩分布区H2S含量普遍较高。③东南部较大的逆断裂破坏了高伽马泥岩层的封隔性,使H2S分布规律更复杂化。 相似文献
76.
文章通过中国学习者英语口语语料库(COLSEC)和美国当代英语语料库(COCA)中的口语子库进行比较,研究中国学习者在英语口语中使用常用模糊限制语的主要特征.经统计检验发现:中国学习者与本族语使用者在模糊限制语的使用上存在显著差异.在程度变动模糊限制语的使用上存在多用和少用两种倾向,而范围变动模糊限制语的使用呈现明显不足的趋势.在缓和型模糊限制语里中国学生偏向超用语气强烈的情态模糊限制语,而直接缓和模糊限制语的表达方式缺乏多样性,对间接模糊限制语中的口语体词语与书面语体词语的使用混淆不清.本文分析解释了形成这些显著差异的原因,对英语口语教学有一定的启示意义. 相似文献
77.
吴蕾 《中国图象图形学报》1997,2(12):905-908
1989年研制了一套图象处理程序,利用闪光X射线照相拍摄的射流底片图象,可给出射流质量,速度,动能沿射流前进方向的分布数据。以石油射孔弹为例,给出了射流上述特征参数,同时,还给出了射流的“速度-质量”实验数据,该结果与理论数据模拟结果相比较,相符较好。 相似文献
78.
79.
在分析了油液污染产生的原因及其对机械设备的危害的基础上,根据油液中悬浮颗粒对光线的散射和吸收的特性,提出了利用AVR处理器控制激光的入射光强,采用双光路光纤传感器,通过检测激光透射过油液后的透射光强,并经光电转换后输入AVR进行处理,得到油液中磨粒信息的设计方法,从而实现了对设备的实时在线状态监测。 相似文献
80.