H5N1亚型禽流感病毒NP基因的克隆与表达

根据已知H5N1亚型禽流感病毒NP基因序列设计、合成PCR克隆引物。自H5N1阳性病料中提取总RNA,反转录后采用高可信度DNA聚合酶,经PCR扩增NP基因,采用Invitrogen定向表达系统进行克隆表达,纯化获得N末端携带多聚组氨酸标签的重组NP蛋白,分子质量约66.0ku。采用单克隆抗体和阳性血清经ELISA、免疫印迹分析重组蛋白的免疫反应性。结果表明:所获得的重组NP蛋白在ELISA分析中均能与阳性血清和单克隆抗体发生特异性结合,但在免疫印迹分析中仅与阳性血清发生特异性结合。     

云南牟定狂犬病诊断及病毒部分N基因测序

自英国引进3株荧光素标记的针对狂犬病毒核蛋白的单克隆抗体,建立狂犬病直接免疫荧光诊断技术。根据已知狂犬病毒核蛋白(N或NP)基因序列,设计合成4对引物,建立狂犬病RT-PCR及套式PCR诊断技术。自牟定采集发病犬脑组织样品15份,免疫荧光及PCR诊断结果均为阳性。对PCR产物进行纯化后,克隆至pMD18-T载体测序(基因库登录号:EU095330),并与已知代表毒株对应序列进行比对及系统发育分析,结果表明:云南牟定狂犬病毒属于基因1型和血清1型毒株,与2006年广西发病犬分离毒株遗传关系密切,病毒部分N基因核苷酸及推导的氨基酸序列同源性分别为97.4%和99.0%。     

巴彦淖尔市干旱指数变化规律和草原退化原因

采用巴彦淖尔市4个牧业旗县气象站40a（30a）的关键时段平均气温和降水量资料，计算逐年干旱指数，由各站干旱指数来评定草原旱涝程度，并依此评判逐年牧草长势，分析其变化规律.结果表明，随着气候逐渐变暖，干旱指数呈增大趋势，即草原干旱呈加重趋势。气候干旱是引起草原沙化的主要因素之一，据此提出了防止草原退化的建议。     

家兔的骨软病的防治

家兔骨软病多因饲料中缺乏钙、磷或维生素D而引起,其次兔舍内长期潮湿、阴冷、阳光照射不足,兔运动量少也可发生该病。     

云南边境Asia 1型口蹄疫监测及病毒vp1基因序列比较

口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的主要侵袭偶蹄动物的一种急性热性高度接触性传染病。口蹄疫病毒存在7个不同血清型,病毒VP1蛋白抗原性差异是病毒血清型划分依据,而其编码基因核苷酸序列差异是同型病毒Topotype型或基因型划分依据。采用RT-PCR及O／A／C／Asia1多重RT-PCR技术,对2006年期间自云南边境地区采集境外流动动物组织样品120份,进行口蹄疫病原监测,检出Asia1型口蹄疫病毒阳性样品7份。对阳性样品中病毒vp1基因全序列进行扩增、纯化后,克隆至pMD18-T载体测序,并与已知代表性毒株进行比对及系统发育分析。结果发现：云南边境Aisa1型口蹄疫病毒阳性样品vp1基因核苷酸序列同源性介于83．4％～99．5％,不同分离毒株以15％序列差异作为分型标准,存在1个新拓朴型或基因型V,且与已知的4个拓朴型或基因型不同。系统发育分析确定了1个新的遗传谱系Ⅶ。部分VP1蛋白表位关键性氨基酸位点存在变异。     

禽流感血凝素基因的研究进展

高致病性禽流感(AI)是由禽流感病毒（AⅣ)引起的一种急性传染病,AⅣ 呈球形,有囊膜。其表面主要有两种糖蛋白,其中血凝素(hemagglufinin,HA)具有重要功能：能凝集红细胞,属I型糖蛋白;具有株和亚型的特异性,是AⅣ 型和亚型内新变种判断的主要依据;能结合宿主唾液酸之类的细胞受体;HA在病毒吸附及穿膜过程中起关键作用,HA 上裂解位点的序列直接影响AI病毒致病性的高低;HA的变异性很强,它的变异是AI病毒发生抗原变异的主要原因,HA是最主要的抗原物质。因此HA对AⅣ的生物学特征具有十分重要的意义。     

牛羊百叶干病的病因及中兽医治疗

百叶干病是一种由于饲养人员管理不当引发的一种消化疾病,该病在春冬季节发病率较高.病牛羊在患病初期通常会表现为食欲不振、腹泻,反刍频率降低且次数减少等症状,严重的病牛羊也会因身体衰竭而亡.     

H9N2亚型禽流感病毒血凝素基因的克隆与表达

根据已知H9N2亚型禽流感病毒血凝素基因序列,设计、合成PCR引物。自H9N2亚型禽流感病毒感染的鸡胚尿囊液中提取总RNA,反转录后采用高可信度DNA聚合酶扩增血凝素基因,采用Invitrogen定向表达系统进行克隆表达,纯化获得N末端携带多聚组氨酸标签的重组血凝素,分子质量约75 ku。采用阳性血清经免疫印迹及ELISA分析重组血凝素的免疫反应性,结果表明,重组血凝素能与H9N2亚型病毒抗血清发生特异性结合,具有良好的免疫反应性。     

猪圆环病毒基因组结构及其分子特征研究进展

目前,国际上已分离获得2个不同血清型的猪圆环病毒（PCV）,并命名为猪圆环病毒1型（PCV-1）和猪圆环病毒2型（PCV-2）。PCV-1对猪无致病性,而PCV-2被认为是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）的主要病原。PCV基因组为单股环状双向DNA,由2个头一头相对排列的开放性阅读框和基因间隔区组成,包含rep基因、cap基因及病毒DNA复制起始区茎环序列。rep基因编码2种不同的复制酶相关蛋白,cap基因编码病毒结构蛋白或衣壳蛋白,茎环序列在病毒蛋白合成、DNA自身复制及子代病毒产生中发挥重要作用。PCV-2衣壳蛋白110位（P→A）和191位（R→S）氨基酸突变,提高PCV-2在体外组织培养中的增殖效率,而减弱其对动物的致病性和毒力。     

祁连山白桦群落光合速率及其对环境因子的响应研究

为研究祁连山天然白桦林的光合特征及其影响因子,以青海仙米林场典型的天然白桦群落植被(白桦、小檗和珠芽蓼)为研究对象,采用Li-6400X便携式光合测定系统测定了3种植物的净光合速率(P_n)日变化,运用相关性分析和通径分析法研究了3种植物P_n对主要环境影响因子的响应。结果表明,晴天白桦叶片P_n显著高于阴天,小檗叶片P_n晴天高于阴天,珠芽蓼叶片P_n则是晴天低于阴天;晴天白桦和小檗叶片日同化量均高于阴天,珠芽蓼则是阴天显著高于晴天;晴天,白桦叶片P_n的决定因子和限定因子分别为光合有效辐射(PAR)和叶片温度(T_L),小檗分别为PAR和相对湿度(RH),珠芽蓼分别为气孔导度(G_s)和T_L;阴天,白桦叶片P_n的决定因子和限定因子分别为RH和大气温度(T_a),小檗分别为PAR和RH,珠芽蓼分别为RH和PAR。