肝癌单克隆抗体-柔红霉素结合物的制备及其选择性细胞毒作用的研究

我室研制的HAb18单克隆抗体特异性高,免疫组化肝癌阳性率80％,在荷肝癌裸鼠及肝癌病人体内显像均良好。以HAb18与柔红霉素(DAU)连续制备了HAb18-Dextran-DAU免疫抗癌药物。经检测,H-Ab18-Dex-DAU结合物中抗体仍保持其特异性结合能力,证明制备过程中抗体活性未受到明显损伤;48h细胞毒性试验显示结合     

可调控的肝癌特异性基因治疗载体的构建

目的　构建新型AFP顺式作用元件调控的基因表达载体 ,检测该调控元件的特异性和可调控性。方法　PCR扩增截短的AFP基因启动子、增强子 ,将上述片段与含有报告基因强化绿色荧光蛋白基因的载体pEGFP 1的多克隆位点连接 ,构建成为AFP基因顺式作用元件调控的肝癌特异性EGFP表达载体 (pEGFP 1 EP)。用脂质体法将表达载体转染表达或不表达AFP的肿瘤细胞系 ,荧光显微镜观测重组AFP顺式作用元件的启动活性 ,并用流式细胞术检测全反式视黄酸对它的抑制作用。结果　成功地将AFP基因启动子、增强子克隆到报告基因载体pEGFP 1的多克隆位点 ,酶切鉴定和DNA序列分析无误 ,荧光显微镜观测证实EGFP能在AFP阳性肝癌细胞特异性表达 ,1× 10 -7M全反式视黄酸对其活性有明显的抑制。结论　AFP顺式作用元件修饰的基因治疗载体 ,在基因转录水平特异性调控目的基因的表达 ,为下一步将其作为肝癌基因治疗载体奠定了基础。     

肝癌单克隆抗体导向阿霉素的实验研究

本实验采用间接交联方法,以葡聚糖(DEX)为连接臂,制备了鼠抗人肝癌单抗Hab18-DEX-阿霉素(ADM)结合物。在体外观察该结合物对肿瘤靶细胞和非靶细胞的杀伤效应及在荷人肝癌裸鼠体内的分布情况,并对荷人肝癌裸鼠进行了导向治疗实验。经     

制备抗原肽所用宫颈癌细胞培养方法的建立及HLA表达的检测

目的　探讨制备抗原肽所用宫颈癌细胞的培养方法及检测其HLA的表达。方法　先利用CO2孵箱和普通培养瓶进行培养 ,测定其生长状况 ,然后流式细胞仪检测HLA Ⅰ、Ⅱ类分子的表达 ,再用免疫荧光法检测不同浓度IFN γ对Hela细胞HLA Ⅰ、Ⅱ类分子的表达和IFN γ对不同培养时间Hela细胞HLA分子的表达。结果　IFN γ能够明显提高对数生长期的Hela细胞HLA Ⅰ类分子的表达 ,而IFN γ刺激前后Hela细胞HLA Ⅱ类分子的表达均为阴性。结论　本方法可缩短细胞培养时间 ,利用IFN γ诱导细胞提高HLA Ⅰ类分子的表达 ,为提供制备抗原肽所用宫颈癌细胞奠定了基础。     

大剂量放射性~（131）Ⅰ标记抗人肝癌单抗HAb18制剂的临床前质量控制

目的：对改良Ｍａｔｈｅｒ氏法标记的大剂量￣（１３１）Ⅰ－ＨＡｂ１８ＭｃＡｂ进行了临床前质量控制．方法：用常规检测方法（柱层析法、ＰＡＧＥ电泳法、体外培养细胞结合分析等）检测了三批样品的游离碘率、体外细胞免疫结合率、无菌、热原质及热稳定性实验等．结果：本法标记物样品热原质、无菌、毒性试验均合格，￣［１３１］Ⅰ蛋白标记率≥８８．３％，游离碘率≤１２．６％，细胞免疫结合率＞５０％，白蛋白非特异标记率＜６％，标记物在３７℃４８ｈ内，游离碘释放率＜２０％，细胞免疫结合率＞４０％．结论：本法制备的碘标记物各项安全指标合格．热稳定实验提示超过４８ｈ的标记物游离碘及免疫活性变化较大．     

超抗原抗肿瘤研究进展

提高机体抗肿瘤的免疫力,特别是细胞免疫能力以达到抑制肿瘤的目的,是目前肿瘤生物治疗研究的主要方向之一。超抗原(Superantigen,SAg)是一类能够高效地刺激T细胞增殖并且促使其释放多种大量的细胞因子的蛋白质分子。用外源性SAg抗肿瘤是近年来出现的一种新型肿瘤免疫治疗实验研究模式。这种供助“外力”-SAg以提高机体自身抗肿瘤免疫能力的模式的实验研究效果也明显优于机体固有的细胞因子等的抗肿瘤作用,是一种很有希望的高效肿瘤免疫治疗方法。     

病理学教学中“创造性、信息化、个性化”教改目标模式实践的思考

病理解剖学在普通高等医学院校教育中处于基础课和临床课之间 ,既有对所学过的解剖学、组织胚胎学、生理学知识的复习应用 ,又有对将要学到的内外妇儿等临床课的前瞻性了解 ,鉴于病理课在医学教育中的重要地位 ,我们将创造性、信息化、个性化教学模式应用于我校病理解剖课的教学实践中 ,取得了明显的教学效果 ,得到专家及同行的认可并加以推广。它作为课堂教学改革的指针 ,使病理课走进了一个衔接基础医学和临床医学的宽广天地。1　 创造性教学创造性是学生素质教育中的一个重要衡量指标 ,宽松良好的环境、扎实广泛的基础知识和科学明晰的思…     

肿瘤抗原基因MAGE-3的克隆、原核表达与纯化

目的: 克隆人MAGE-3基因并进行原核表达和分离纯化. 方法: 通过RT-PCR从人黑色素瘤细胞株中扩增MAGE-3全长cDNA,经PCR扩增MAGE-3基因3′端324 bp片段,克隆入pGEX-4T-1载体,构建重组原核表达质粒pGEX/MAGE-3,对含有该质粒的大肠杆菌DH5α进行诱导表达和分离纯化.结果: 经RT-PCR扩增出大小约950 bp的基因片段,以此为模板经PCR扩增出约320 bp片段,测序结果与GenBank公布的MAGE-3序列一致,成功构建了pGEX/MAGE-3原核表达质粒,经IPTG诱导在大肠杆菌中表达Mr约42 000的GST融合蛋白,纯化的蛋白纯度为89%.结论: 成功克隆了人MAGE-3基因全长cDNA并对其3′端324 bp片段编码的108个氨基酸的蛋白进行了原核表达和分离纯化,为该蛋白应用于肿瘤免疫治疗奠定了基础.