基于血浆代谢组学与谱效相关的柴胡和白芍醋炙及配伍前后抗肝纤维化作用机制和物质基础研究

本研究利用UHPLC-Q-TOF-MS/MS技术结合血浆代谢组学方法分析柴胡和白芍醋炙及配伍前后抗肝纤维化的作用机制,并通过谱效相关方法筛选潜在的药效物质。通过皮下注射CCl4橄榄油溶液复制肝纤维化大鼠模型,分别灌胃给予柴胡、醋柴胡、白芍、醋白芍、“柴胡-白芍”药对及“醋柴胡-醋白芍”药对水煎液,持续给药六周后收集血样和组织样品用于药效指标检测及血浆代谢组学分析。本实验获得南京中医药大学实验动物伦理委员会批准(批准号:202103A002)。药效学结果表明,各给药组均能降低丙氨酸氨基转移酶(ALT, P <0.01)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST, P <0.01)和羟脯氨酸(HYP, P <0.01)水平,显著提升谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px, P <0.05)水平。通过UHPLC-Q-TOF-MS/MS技术对内源性代谢物进行分析,在正、负离子模式下共鉴定出20种与肝纤维化发病机制相关的差异性代谢物,主要涉及到视黄醇代谢、甘油磷脂代谢、甘油酯代谢、脂肪酸生物合成和花生四烯酸代谢5条代谢通路。同时,引入成分矫正率的概念用以评估各给药组对差异性代谢物的回调作用...     

基于HPLC指纹图谱结合化学模式识别的川芎炮制前后对比研究

目的建立川芎生品和不同炮制程度的酒炙品HPLC指纹图谱,通过指纹图谱动态变化,从客观上确认最佳炮制时间,同时结合化学模式识别方法比较酒炙前后化学成分指纹峰的差异,寻找差异标志物,为川芎的炮制工艺优化及炮制机制研究提供科学依据。方法采用HPLC法,Hypersil Gold C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),乙腈-0.3%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,体积流量0.8 mL/min,全波长扫描,检测波长254 nm。采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)计算相似度,运用聚类分析(hierarchical cluster analysis,HCA)、主成分分析(principal component analysis,PCA)和正交偏最小二乘法-判别分析(orthogonal partial least squares-discriminant analysis,OPLS-DA)对川芎生品与酒炙品进行化学模式识别研究。结果建立了川芎生品和不同炮制程度酒炙品的指纹图谱,共标定22个共有峰,通过与对照品比对,指认了6个成分,分别为阿魏酸(7号峰)、洋川芎内酯I(8号峰)、阿魏酸松柏酯(15号峰)、洋川芎内酯A(17号峰)、藁本内酯(19号峰)和丁烯基苯酞(20号峰);通过指纹图谱动态变化监测,确定了最佳炮制时间为15~20min;通过HCA、PCA和OPLS-DA可明显将川芎生品与酒炙品分为2类,藁本内酯、丁烯基苯酞等6个成分可能是影响二者质量的差异标志物。结论建立的指纹图谱方法精密度、重复性、稳定性良好,结合化学模式识别可用于川芎炮制前后整体质量控制,进行炮制过程监测和炮制程度判断。     

柴胡和白芍醋炙前后组方四逆散对抑郁大鼠粪便代谢组学的比较

目的   应用1H-NMR代谢组学技术探究慢性不可预知温和应激(CUMS)抑郁大鼠粪便代谢组学的变化,评价柴胡和白芍醋炙前后组方四逆散的抗抑郁作用,并探讨四逆散中君药柴胡和臣药白芍醋炙的增效机制及炮制内涵。方法   利用CUMS程序建立大鼠抑郁模型,以1H-NMR为技术手段研究不同给药情况下抑郁大鼠粪便代谢组学的变化。结果   CUMS抑郁大鼠模型复制成功。代谢组学结果表明,与空白组比较,模型组大鼠中共有17种代谢物水平发生变化。与模型组比较,四逆散组及柴胡和白芍醋炙后组方的四逆散组干预后的抑郁大鼠代谢发生显著变化。与四逆散组比较,柴胡和白芍醋炙后组方的四逆散组干预的抑郁大鼠粪便中乳酸、α-葡萄糖、β-葡萄糖、甲酸、乙酸、苏氨酸6种代谢物的水平发生变化,同时对丙酮酸代谢、糖酵解与糖质新生代谢、甲烷代谢、乙醛酸和二羧酸代谢、甘氨酸-丝氨酸-苏氨酸代谢、氨酰合成代谢共6条代谢通路产生影响。结论   柴胡和白芍醋炙后组方的四逆散抗抑郁作用更佳,这可能与能量代谢、氨基酸代谢、免疫调控及肠道菌群有关。      

基于UHPLC-Q-TOF-MS/MS的白芍炒制前后化学成分研究

目的:采用超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱法,探讨白芍炒制前后化学成分的变化。方法:采用AgilentC18色谱柱,0. 1%甲酸水溶液-乙腈梯度洗脱,体积流量0. 3 m L/min,串联四级杆飞行时间质谱分别测定不同产地各10批生、炒白芍中的化学成分。结果:分别在生、炒白芍中鉴定出40种化学成分。结论:通过UHPLC-Q-TOF-MS/MS技术,为分析生、炒白芍中的化学成分提供一种快速、高效的分析方法,为综合评价生白芍和炒白芍的质量提供参考。     

白术多糖的分离纯化和化学结构研究

采用柱层析进行分离纯化,并用HPLC和13CNMR等方法分别阐明中药白术中多糖PSAM-1和PSAM-2的化学结构.结果表明多糖PSAM-1和PSAM-2均为杂多糖,平均分子量分别为1.36×105、1.04×105,PSAM-1由半乳糖、鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖组成,PSAM-2由木糖、阿拉伯糖、半乳糖组成.     

硫磺熏蒸前后中药菊花中金属元素及微量元素的ICP-AES检测

目的:对硫磺熏蒸前后中药菊花中金属元素和微量元素的含量进行分析研究。方法:采用微波消解法进行前处理,应用电感耦合等离子体发射光谱(ICP-AES)法测定含量。结果:中药菊花中Al、Fe、Mn、Zn等金属元素含量丰富,硫磺熏蒸前后S元素和Cu元素的含量有显著性差异。结论:实验室自制硫磺熏蒸菊花药材,测试结果显示含有较多的S元素,推测中药菊花中S元素含量的增加可能与加工过程中使用硫磺熏蒸工艺有关,测定中药菊花中金属元素及微量元素的含量对于全面和客观评价其质量具有重要意义。     

不同医疗机构细辛饮片质量评价

目的调查不同医疗机构的细辛饮片质量。方法从全国不同医疗机构收集12批次的细辛饮片样品,参照《中国药典》2010年版Ⅰ部细辛检查和含量测定项下的方法,采用高效液相色谱法测定收集到的细辛饮片样品中指标成分细辛脂素的含量,并对饮片中的马兜铃酸Ⅰ的含量进行限量检查。结果不同医疗机构的细辛饮片质量存在差异,细辛脂素的线性方程为Y=14.82X+21.87,r=0.999 5,细辛脂素在5.0~250.0μg/mL范围内线性关系良好,平均回收率为97.82%,相对标准偏差(RSD)为1.89%。用高效液相色谱法测定12批细辛饮片,其中6个批次的道地产"辽细辛"不仅指标成分(细辛脂素)含量达标,而且限量成分(马兜铃酸Ⅰ)处于相对较低水平。结论不同医疗机构细辛饮片质量存在差异,道地产"辽细辛"质量更优。     

大黄附子汤血清药物化学初步研究

目的 对大黄附子汤进行血清药物化学初步研究,通过分析入血成分探讨该复方发挥药效的物质基础。方法 采用血清药物化学的研究方法,同时建立大黄附子汤及大鼠ig给予大黄附子汤后血清HPLC指纹图谱,通过分析比较分别给予大黄附子汤、单味生药所得血清样品,初步鉴定大黄附子汤在大鼠血清中的移行成分。结果 大鼠ig给予大黄附子汤后,血清中发现18个入血成分,其中14个为代谢产物;4个为原型成分。结论 大黄附子汤入血成分主要来自大黄和附子,复方血清药物化学研究为深入阐述大黄附子汤药效物质基础提供依据。     

中药饮片质量标准的研究现状及相关思考

本文介绍了中药饮片质量标准的研究内容,对当前中药饮片有效部位的定量分析、挥发性成分的定性分析、指标性成分的定量分析、重金属及微量元素含量分析、色谱指纹图谱研究等质量标准的研究现状进行了综述,同时对各种新方法在中药饮片质量控制中的应用进行了评述.文章对中药饮片质量研究中存在的相关问题进行了思考并提出:要推进中药材GAP工程,从源头上控制中药饮片质量;构建中药饮片规范化生产流程,保证中药饮片质量;探索新方法新技术在中药饮片质量标准研究中的应用等对策;并对中药饮片质量控制的发展前景进行了讨论.     

基于HPLC指纹图谱的不同产地升麻质量评价研究

建立不同产地升麻药材的指纹图谱。使用Kromasil色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相乙腈-0.1%甲酸溶液,梯度洗脱,柱温35℃,流速1.0 mL·min^-1,检测波长254 nm。提取12个色谱峰作为指纹图谱共有峰,采用相似度评价、聚类分析、主成分分析等方法,对所收集的21批样品进行系统比较与归类。结果确定了12个共有峰,将不同产地的样品分为3类。该法重复性好,简便可靠,可以为不同产地升麻的质量控制和评价提供依据。