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目的:构建人源FOXG1真核表达载体,瞬时转染HeLa细胞实现FOXG1过表达,观察FOXG1对HeLa细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响,为后续研究人源FOXG1基因在肿瘤中的作用机制奠定理论基础。方法:利用One Step Cloning法构建重组质粒pEGFP-C1-FOXG1,并通过酶切、测序对重组质粒进行鉴定;采用脂质体介导的转染法将pEGFP-C1-FOXG1瞬时转染至HeLa细胞,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达,Western blot检测HeLa细胞中EGFP-FOXG1融合蛋白的表达;进一步,分别通过CCK8、伤口愈合和Transwell实验检测FOXG1对HeLa细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。结果:酶切鉴定和测序表明重组质粒pEGFP-C1-FOXG1构建成功;瞬时转染HeLa细胞24小时后,能够在荧光显微镜观察到绿色荧光,48小时后转染效率达到90%;Western blot显示EGFP-FOXG1融合蛋白正确表达;CCK8实验表明过表达FOXG1能够促进HeLa细胞的增殖;伤口愈合和Transwell实验表明FOXG1过表达可以促进HeLa细胞的迁移和侵袭。结论:成功构建了pEGFP-C1-FOXG1重组质粒,并在HeLa细胞中正确表达;功能实验表明FOXG1能够促进HeLa细胞增殖、迁移和侵袭。 相似文献
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目的:体外建立顺铂( DDP)诱导的人肝癌耐药细胞株( HepG2/DDP),研究其生物学特性。方法以采用药物大剂量冲击结合低剂量持续诱导方法诱导HepG2细胞株,建立人肝癌顺铂耐药细胞株HepG2/DDP;MTT法检测顺铂对HepG2和HepG2/DDP的半数抑制浓度(IC50)和耐药系数(RI),绘制细胞生长曲线及计算细胞倍增时间,并用流式细胞仪( FCM )检测细胞周期。结果历时5个月成功建成HepG2/DDP细胞株,MTT法检测DDP对HepG2的IC50为1.35μg/ml,HepG2/DDP的IC50为23.35μg/ml,RI达17生长曲线表明其增殖速度明显低于亲本HepG2人肝癌细胞,且倍增时间增加;细胞周期分析发现相对于亲本HepG2细胞,G0/G1期细胞减少、S期与G2/M期细胞增多。结论成功建立稳定耐药细胞株HepG2/DDP。 相似文献
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0引言我院2009年发现1例视网膜脱离手术后健眼近视患者,现报告如下。1病例报告患者,男,35岁,糖尿病病史10a,因“左眼视网膜脱离”入院。入院时情况:全身情况:血糖8.0mmol/L,血压正常。眼部检查:左眼视力光感,右眼视力1.0。左眼眼压9mmHg,右眼眼压14mmHg。左眼结膜充血,角膜透明,前房轴深,房水清,瞳孔圆,对光反射(+),晶状体透明,玻璃体混浊,眼底可见视网膜青灰色隆起累及黄斑,右眼未见异常。B超显示:左眼视网膜脱离。A超显示:双眼的眼轴正常。入院后给予抗炎药物治疗,完善检查后局部麻醉下行左眼玻璃体切除+硅油填充+视网膜激光光凝术。术后俯卧位并给予局部及全身抗生素和激素治 相似文献
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目的 分析中成药治疗脑小血管病相关认知功能障碍(vascular cognitive impairment caused by cerebral small vessel disease,CSVD-VCI)的随机对照试验(RCT)的结局指标应用情况,并针对存在的问题提供建议.方法 全面检索3个英文数据库、4个中文数据库和2个临床研究线上注册网站,筛选近10年符合本研究纳入标准的RCT,提取信息,评估偏倚风险,分析其结局指标.结果 检索获文献10455篇,剔重后余8681篇,筛选后纳入30篇RCT报告,偏倚风险总体较高.其结局指标分为8大类,即临床症状指标、神经影像学指标、神经电生理指标、血液生化学指标、血液流变学指标、中医证候积分、临床有效率、安全性指标.其中,纳入RCT的报告频次和报告率最高的是临床症状指标;有2个RCT以中医证候积分为结局指标,并报告相应评价标准.结论 中成药治疗CSVD-VCI的RCT结局指标应用目前存在临床上的合理性和局限性,且在研究设计层面结局指标主次不明、设盲不足、报告不详,影响了中成药治疗CSVD-VCI的RCT质量.建议本领域研究者在未来完善顶层设计,同时积极开展本领域核心指标集的筹建工作,进而提升临床研究质量. 相似文献
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目的 对耐酸产紫青霉OUCMDZ-019的次级代谢产物进行化学成分和生物活性研究,发现潜力结构资源。方法 对菌株进行规模发酵得到粗提物,利用常压柱层析、凝胶分子筛以及半制备高效液相等方法进行次级代谢产物的分离纯化;利用现代波谱学方法(核磁共振1D NMR、2D NMR、圆二色谱ECD、旋光等)对化合物进行结构鉴定,并评价其抗病毒生物活性。结果 分离鉴定得到4个单体化合物,(-)-Mitorubrinol (1)、6″-Hydroxy-(R)-mitorubrinic acid (2)、(-)-Mitorubrinic acid (3)、Purpurquinone D (4)。结论 从耐酸真菌产紫青霉OUCMDZ-019的次级代谢产物中分离鉴定得到了化合物1~4,均属于嗜氮酮类化合物,研究获得规模量产化合物3,为后续药物的结构衍生打下基础。 相似文献
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目的 比较不同的过程评估指标或指标组合诊断危重症患儿喂养不耐受的敏感度及特异度.方法 收集196例危重症患儿鼻饲开始前5d内能量摄入情况及喂养不耐受各项过程评估指标的发生情况.通过比较敏感度及特异度,分析7项评估指标中单项指标或联合指标对喂养不耐受的诊断能力.结果 分别以启动肠内营养后的5d内患儿通过肠内营养能量摄入未达到目标能量的2/3或80%为喂养不耐受的诊断标准,7项评估指标中,胃潴留与呕吐2项指标的ROC曲线下面积>0.7.当以未达到目标能量的2/3作为诊断标准时,使用胃潴留单项指标的敏感度及特异度分别为94.28%、73.91%;当以未达到目标能量的80%作为诊断标准时,胃潴留联合呕吐的敏感度及特异度分别为90.83%、68.70%.结论 临床医护人员在诊断危重症患儿喂养不耐受时可优先考虑胃潴留与呕吐2项指标联合或单独使用胃潴留,有助于尽早识别患儿喂养不耐受情况,促进其肠内营养有效实施. 相似文献