一种新型β-内酰胺酶SHV-59的发现

目的鉴定来自新生儿病房血液培养的产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的β-内酰胺酶SHV基因. 方法应用PCR技术对分离自新生儿病房血培养样本的5株产ESBLs肺炎克雷伯菌进行SHV基因扩增,利用ABI 377自动荧光测序仪对PCR扩增产物进行测序,并采用琼脂稀释法测定11种抗菌药物对产酶菌的最低抑菌浓度(MIC). 结果 5株肺炎克雷伯菌SHV基因PCR扩增均阳性,DNA序列分析证实其中4株为SHV-12型,另外1株产一种新SHV型β-内酰胺酶,该酶与SHV-1比较显示2个氨基酸位点突变,分别为丙氨酸(Ala)134→缬氨酸(Val)和脯氨酸(Pro)269→亮氨酸(Leu),新型β-内酰胺酶经确认并命名为SHV-59(GenBank注册号:AT790341). 结论本院发现一新型β-内酰胺酶SHV-59.     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs株的耐药性与基因检测

目的研究深圳市人民医院2002年1月-2003年12月临床下呼吸道分离的产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性、ESBLs基因型以及基因型和耐药表型的相关性。方法共收集临床下呼吸道分离产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌61株，采用酶抑制剂增强法作表型确证试验，琼脂稀释法作药敏试验，应用PCR、序列分析，确定ESBLs基因型。结果61株产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对亚胺培南的敏感率是100％，MIC50 0．5mg／L，两种细菌表现出不尽相同的耐药表型。共检出10种0内酰胺酶基因型，CTX-M型、SHV型和TEM型的检出率依次为83．6％、44．3％和37．7％，其中以CTXM14最多，共38株；SHV型仅见于肺炎克雷伯菌，SHV-12最常见，有20株；TEM型均为TEM-1。结论本院临床下呼吸道产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药情况严重，为多重耐药菌。ESBLs有7种基因型，CTX—M型是主要的基因型，其次是SHV型；两种菌中各基因型的分布不同，其耐药表型也不同。     

鼠脑缺血再灌注损伤后兴奋性氨基酸的变化及黄芪对其影响

目的 :研究鼠脑缺血再灌注损伤后脑组织兴奋性氨基酸 (EAA)及黄芪对其影响。方法 :采用沙土鼠双侧颈总动脉夹闭脑缺血模型 ,于缺血后 1 5min、再灌注 4 8h取脑组织测定Glu、Asp、GABA、Gly。结果 :缺血 1 5min后 ,脑组织Glu、Asp含量明显升高 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1 ) ,GABA含量升高 (P <0 .0 5 ) ,黄芪可降低脑组织Glu含量 (P <0 .0 5 )。缺血后 1 5min再灌注4 8h后 ,脑组织Glu及Asp含量显著升高 (P <0 .0 5 ) ,黄芪可使脑组织Glu含量降低 (P <0 .0 5 )。结论 :黄芪抗缺血性脑损伤的作用机理可能与其对抗脑缺血及其再灌注后EAA的升高有关     

狼疮性肾炎患者血清中IL-18和sFas/sFasL水平及意义

目的：探讨狼疮性肾炎（ＬＮ）患者血清中Ｉ国８和ｓＦａｓ／ｓＦａｓＬ变化及相关性方法;利用夹心ＥＬＩＳＡ方法检测３５例ＬＮ患者和１８例正常健康人群血清ＩＬ－１８,ｓＦａｓ、ｓＦａｓＬ水平。结果：ＩＬ０１８水平比较９,ＬＮ组和活动期ＬＮ组显著高于静止期ＬＮ及正常对照组（Ｐ〈０．０１）,而静止期ＬＮ患者与正常对照组差无显著性（Ｐ〉０．０５）。ｓＦａｓ,各ＬＮ患者组均明显高于正常对照组（Ｐ〈０．０１。其中     

血管紧张素转换酶和血管紧张素受体基因多态性与冠心病的关系

目的　探讨深圳地区冠心病 (CAD)与血管紧张素转换酶 (ACE)基因与血管紧张素 的 1型受体 (AT1R)基因多态性的关系。方法　分别采用 PCR及 PCR- Afl II酶切法 ,检测 89例 CAD患者和 14 8例健康对照的 ACE和AT1R基因型。结果　 CAD组与对照组比较 ,ACE DD基因型频率 (2 4 .7%比 8.1% ,P<0 .0 1)及 D型等位基因频率 (4 4 .4 %比 33.4 % ,P<0 .0 5 )均为升高。 CAD组与对照组 AT1R基因型频率分布无显著性差异 (P>0 .0 5 )。携带 AT1R C等位基因的个体患 CAD的风险与其同时携带 ACE DD基因型无关 (P>0 .0 5 )。结论　深圳地区CAD的发生和发展可能与 ACE基因 I/ D多态性有关 ,而与 AT1R基因 A116 6 C多态性无关     

慢性肾功能不全患者血清可溶性Fas及相关因子的变化

目的 研究慢性肾功能不全患者血清可溶性Ｆａｓ／ＡＰＯ－（ｓＦａｓ）及相关因子的变化。方法 采用ＥＬＩＳＡ法检测２０名正常人和６０例慢性肾功能不全患者血清ｓＦａｓ及ＩＬ－６、ＴＮＦ－α水平。结果 肾功能代偿期ｓＦａｓ、ＩＬ－６和ＴＮＦ－α无明显改变;肾功能代偿期ｓＦａｓ开始增高,其升高与血甭ＢＵＮ和Ｃｒ明显相关。ＩＬ－６及ＴＮＦα在肾功能失代偿期明显变化,进入肾功能衰竭期后显著升高。其中ＩＬ－６ 关     

Fas和细胞凋亡与肾脏疾病

细胞凋亡是机体维持自稳态和免疫系统正常发育的重要机制,也是肾脏发生、发育及肾脏疾病的病理损伤与修复过程中必不可少的环节,Ｆａｓ系统不仅参与肾小球损伤过程中肾细胞的凋亡,也参与急性肾移植的排斥。此外,系统性红斑狼疮及狼疮性肾炎的发展与Ｆａｓ功能缺陷相关     

补阳还五汤及其有效部位组方对沙土鼠脑缺血后反应性星形胶质细胞活化的影响

目的：比较研究补阳还五汤及其有效部位组方对脑缺血后反应性星形胶质细胞活化的影响。方法：采用沙土鼠双侧颈总动脉夹闭脑缺血模型,分别腹腔注射补阳还五汤及其有效部位组方,于不同时间取脑组织,以 免疫组化方法测定胶质纤维酸性蛋白（GFAP）的表达。结果：缺血15min后各组脑组织无GFAP表达。缺血15min再灌注24h后,脑组织GFAP表达达高峰,主要在海马区表达,补阳还五汤及其有效部位组方可使GFAP表达减弱,两者作用相近。缺血15min再灌注48h后,GFAP表达有所减弱,而补阳还五汤及其有效部位方组GFAP表达则较模型组有所增强,两者作用相近。结论：星形胶质细胞活化主要在脑缺血后再灌注期,在再灌注早期,补阳还五汤及其有效部位组方通过对抗缺血性脑损伤而改善星形胶质细胞功能的紊乱;在再灌注后期,则通过促进星形细胞的活化,利于损伤的修复。     

缺失型α地中海贫血的基因芯片检测

目的 探讨基因芯片诊断地中海贫血的方法。方法 共测定了50份已知基因分型的血液样品。抽提基因组DNA，经聚合酶链反应后。进行荧光标记及杂交，扫描芯片荧光信号图像，并将分析的结果与原基因类型进行对照。结果 10例正常个体及40例缺失型。地中海贫血患者被诊断，其中-SEA型29例，占72.5％；-α^3.7型6例，占15.0％；-α^4.2型12.5例，占7％。结果均与原诊断相符。结论 基因芯片法可快速、准确地筛查缺失型α地中海贫血。     

血管紧张素转换酶基因多态性与原发性高血压的关系

目的：研究深圳地区人群血管紧张素转换酶（ACE）基因多态性与原发性高血压的关系。方法：抽取原发性高血压（EH）患者152例及正常对照组150例外周血基因组DNA，应用PCR技术进行ACE基因I／D分型。结果：在正常对照组中，ACE基因I／D多态DD、DI、Ⅱ基因频率分别为0.12,0.76和0.62，其中DD和Ⅱ等位基因频率分别为33％、67％。EH组DD型和D等位基因频率增加。结论：基因型DD和D等位基因与深圳地区人群原发性高血压相关联。