类风湿性关节炎的病理生理

类风湿性关节炎的特征为:(1) 滑膜被覆层增生,(2) 滑膜深层的浸润,(3) 滑膜腔内有渗出物。滑膜被复层的改变和滑膜腔内渗出物的特性,初看似乎没有多少特异性。然而,这些改变很可能是免疫反应所引起,而免疫反应在类风湿性关节炎中是有特异性的。况且,类风湿性关节炎,常在滑膜深层引起特殊的形态变化,如单核细胞的致密小结可在滑膜深层的血管周围出现。这些细胞活跃地合成免疫球蛋白,该过程似能引起被认为是造成类风湿性关节炎的一系列免疫反应。滑液中的免疫复合物类风湿性滑膜渗出液的补体(C)水平一般都下降。Pekin等证明,经适当校正蛋白含量后,类风湿性滑液的溶血补体(CH5O),比痛风症的滑液补体少一半,而比Reiters综合征     

骨髓间充质干细胞对成年大鼠视网膜节细胞再生的影响

目的：探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)对受损成年大鼠视网膜节细胞(RGCs)轴突再生的影响。方法：切断大鼠视神经,缝接自体坐骨神经(AG)。动物分对照组、AG MSCs组、AG MSCs tPNS(三七总皂苷)组。各组动物存活3、4周,用粒蓝逆行标记再生的RGCs,荧光镜下观察视网膜平铺片中再生RGCs的数量变化。免疫组化检测MSCs在玻璃体内的分化。结果：动物存活3、4周,再生的RGCs数目实验组与对照组有显著性差异。AG MSC组和AG MSCs tPNS组,存活的细胞表达Vimentin、NF和GFAP,Laminin无表达。结论：玻璃体植入MSCs可促进受损伤的视网膜节细胞轴突再生。     

胎鼠肺成纤维细胞的改良培养法

目的改良胎鼠肺成纤维细胞的培养方法。方法取19d胎龄129孕鼠,开胸取出胎肺,用胰酶稍微消化,再进行组织悬液贴壁培养。传代的肺成纤维细胞用免疫组化检测其vimentin和laminin的表达。结果24h后镜下可见组织块周边有长梭型细胞爬出,48h后生长迅速,3d接近融合。传代后杂细胞基本去除,5代后细胞的增殖能力逐渐下降。结论胰酶轻度消化后组织悬液贴壁法是一种可靠快速的肺成纤维细胞分离纯化培养方法。     

H-89和wortmannin对霍乱毒素促进受损视网膜节细胞再生作用的影响

【目的】研究蛋白激酶A(PKA)抑制剂H-89和磷酸肌醇3-激酶(PI3-K)特异抑制剂wortmannin对霍乱毒素(CTx)促进受损视网膜节细胞(RGCs)再生的影响,探讨CTx促进受损视网膜节细胞(RGCs)再生的作用机制。【方法】成年金黄地鼠近侧切断视神经(ON),移植一段自体坐骨神经(SN)与ON近侧残端缝接,玻璃体内注射给药。20只动物分4组,每组5只。注射CTx为CTx组,注射CTx和H-89为CTx+H组、注射CTx和wortmannin为CTx+W组、不给药组为对照组。用粒蓝(GB)逆行标记再生的RGCs,取视网膜于荧光镜下记数。【结果】动物存活4周后,对照组、CTx组和CTx+H组再生节细胞平均数(个/视网膜)分别为:(1431±352),(2567±883)和(1606±293)个/视网膜(n=5)。CTx+H组与对照组比较差异无显著性(P<0.05),而与CTx组比较有显著性差异(P<0.05),表明H-89可抑制CTx的促再生作用;CTx+W组再生节细胞数为:(1872±262)个/视网膜(n =5),与对照组和CTx组比较差异均有显著性(P <0.05),提示wortmannin对CTx有部分的抑制作用。【结论】CTx可能是通过PKA-CREB通路实现对受损RGCs的促再生作用,PI3-K-Akt通路可能是PKA-CREB通路的下游分支。     

兔视网膜LANT—6免疫反应细胞的研究

用免疫组织化学ＡＢＣ法和间接免疫荧光双标法，研究ＬＡＮＴ－６免疫反应神经元在成年兔视网膜的定位与分布。结果表明，ＬＡＮＴ－６免疫阳性细胞体仅位于节细胞层，呈圆形或椭圆，直径约为１０－４０μｍ，胞体可发生１个或多个树突伸向内网层，在神经纤维层偶见免疫视神经纤维。     

胆囊收缩素免疫反应神经元在蟾蜍视网膜的定位与分布

用免疫组织化学ABC方法研究胆囊收缩素(CCK)免疫反应神经元在蟾蜍视网膜的定位与分布。实验结果表明，在183个免疫反应阳性神经元中，85％为Ⅰ型无长突细胞，12％为Ⅱ型无长突细胞，3％的细胞体位于节细胞层，暂定为移位无长突细胞。CCK免疫陌性纤维呈点状散布于内网层的1～5各亚层。在视网膜平铺片上，CCK免疫阳性细胞体均匀分布于视网膜的中央区和周围区，其密度为30土2．3个／mm^2，它们的树突野呈对称性和非对称性两型，前的树突野大小为90～200um×60～110um，后的突起长度约为60～100um。     

体外定向诱导人胚胎干细胞分化为表皮样干细胞的研究

[目的]探索体外定向诱导人胚胎干细胞(hES细胞)分化为表皮样干细胞的条件,为研究其定向分化机理及寻找新的皮肤组织工程种子细胞奠定基础。[方法]将人胚胎干细胞单独(对照组)或与人羊膜上皮面向上全铺或半铺布半孔底共培养4~5 d,观察其形态变化并分别用β1整合素,CK15及CK19免疫组化检测人胚胎干细胞向表皮样干细胞的分化。[结果]人胚胎干细胞与人羊膜共培养4～5 d后,在人羊膜上皮面形成表皮样干细胞集落,表达高水平的表皮干细胞特异标记物β1整合素、CK15和CK19。在无羊膜覆盖处,细胞贴壁生长,形成单层表皮样细胞,细胞呈多边形,排列紧密,大部分细胞表达β1整合素。对照组大量细胞死亡,未见β1整合素阳性细胞。[结论]在体外人羊膜可定向诱导人胚胎干细胞分化为表皮样干细胞,并提示在羊膜上皮面的细胞克隆可能是表皮样干细胞,而贴壁生长的细胞可能大部分是表皮样瞬间放大细胞。     

体外定向诱导胚胎干细胞分化为表皮样干细胞的研究

目的　探索体外定向诱导小鼠胚胎干细胞 (embryonicstemcell,ES)分化为表皮样干细胞的条件 ,为胚胎干细胞来源的表皮样干细胞的临床应用 ,及ES细胞的定向分化机制的研究奠定基础。　方法　采用与人羊膜共培养法对小鼠胚胎干细胞进行定向诱导。实验分 3组 :1 羊膜上皮面向上 ,铺布全孔底 ;2 羊膜上皮面向上 ,铺布半孔底 ;3 以不加羊膜组为对照。用流式细胞仪、免疫组织化学技术对分化后的细胞进行鉴定。　结果　共培养 3～ 4d后 ,在第 1、2实验组中的人羊膜上皮面上 ,小鼠ES细胞形成表皮样干细胞集落 ,表达高水平的表皮干细胞特异标志物整合素 β1 、CK19和CK15。流式细胞仪检测结果显示 :整合素 β1 、CK19和CK15阳性细胞比率均较对照组有显著差异 (P <0 0 1)。而在第 2实验组中无羊膜覆处 ,细胞贴壁生长 ,形成表皮样细胞单层 ,细胞呈多边形 ,排列紧密 ,表达整合素 β1 ,仅见少数CK19和CK15阳性细胞散布于表皮样细胞之间。流式细胞仪检测结果显示 :整合素 β1 阳性细胞率与对照组有显著差异 (P <0 0 1) ,而CK19和CK15阳性细胞率与对照组差异不明显。　结论　人羊膜可诱导小鼠胚胎干细胞向表皮样细胞定向分化 ,并提示生长在羊膜上皮面上的细胞克隆可能是表皮样干细胞 ,而贴壁生长的细胞可能是表皮样细