大鼠局灶性脑缺血再灌注后Ref-1、NF-κB及IκB的表达

目的研究大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后Ref-1蛋白、NF-κB及IκB的动态变化。方法采用大脑中动脉线栓法制作局灶性脑缺血再灌注模型,应用免疫组化法检测Ref-1、NF-κB、IκB的动态表达。结果与对照组及假手术组相比,脑缺血再灌注后,随着再灌注时间的延长,Ref-1蛋白、IκB阳性细胞数逐渐减少(P<0.05),NF-κB蛋白阳性细胞数逐渐增加(P<0.05)。结论脑缺血区再灌注损伤可导致Ref-1蛋白酶活性下降、IκB降解,引起NF-κB的激活,进一步导致自由基大量产生,加重了细胞内DNA的损伤,从而促进损伤区的神经元凋亡。     

叠氮胸苷对人胶质母细胞瘤细胞株端粒酶活性、增殖和凋亡的影响

目的 探讨叠氮胸苷(AZT)对TJ905 人胶质母细胞瘤细胞株端粒酶活性、增殖和凋亡的影响及其机制.方法 体外培养TJ905细胞分别经50、100及200 μmol/L叠氮胸苷处理24 h后,用端粒重复扩增法检测端粒酶活性及集落形成效率;继续培养并维持相应叠氮胸苷浓度,取第1、3和6代细胞,利用Western blot检测cyclin A表达水平,用流式细胞术检测细胞周期分布并结合单细胞凝胶电泳检测细胞凋亡,用Ki-67免疫细胞化学染色检测细胞增殖活性.结果 叠氮胸苷可抑制TJ905细胞的端粒酶活性.50和100 μmol/L组cyclin A表达水平均显著低于对照组(P<0.01),并均呈时间和剂量依赖性降低.三个用药组的Go/G1期细胞均显著少于对照组(P<0.05～0.01),S期细胞均显著多于对照组(P<0.05～0.01);在各用药组第1代GO/G1期细胞减少和S期细胞增加均呈剂量依赖性;各用药组S期细胞增加均呈显著的时间依赖性,而Go/G1期细胞减少仅在50 μmol/L组呈时间依赖性.各用药组第1和6代的凋亡细胞数均显著多于对照组(P<0.05～0.01);各用药组第6代的凋亡细胞数随用药浓度升高而相应增加(P<0.05～0.01),且均多于同浓度组的第1和第3代(P<0.05～0.01).各用药组集落形成效率及Ki-67阳性细胞数均显著低于对照组(P<0.01),二者还随用药浓度增加和(或)作用时间延长相应减少.对照组各代间以上各指标的差异均无统计学意义(P>0.05).结论 叠氮胸苷可通过抑制端粒酶活性抑制TJ905细胞cyclin A表达,阻止该细胞从S期向G2期过渡,发挥其抑制增殖和诱导凋亡的作用.     

室管膜瘤染色体DNA失衡的比较基因组杂交研究

目的 探讨室管膜瘤基因组DNA失衡与其组织学类型、分级和部位及患者性别和年龄的关系.方法 用比较基因组杂交检测了16例室管膜瘤的染色体基因组DNA获得和丢失.结果 16例室管膜瘤的基因组DNA获得和丢失检出率分别为15/16和13/16,共发现24个有DNA获得和19个有DNA丢失的染色体区带.黏液乳头状型(WHO Ⅰ级)的获得和丢失区带数均最多,而富于细胞型(WHOⅡ级)和伸长细胞型(WHOⅡ级)的这些异常均多于间变性室管膜瘤(WHOⅢ级).部分获得和丢失区带仅见于黏液乳头状型、富于细胞型、伸长细胞型和间变性中的一种类型,使这些室管膜瘤亚型呈现特征性基因组DNA失衡谱.黏液乳头状型、富于细胞型和伸长细胞型均常出现+7;前两者均有+5,后两者均有-22q;间变性组中+1q 最常见,但无其他亚型常见的+5、+7、-4q、-19q和-22q.任何获得和丢失区带的检出率均无性别差异(P>0.05);≤30岁组和颅内组均以+1q和+7p最常见,>30岁组和脊髓组均以+7最常见,≤30岁组与>30岁组及颅内组与脊髓组比较,三者的检出率差异均有统计学意义(P<0.05).结论 室管膜瘤的基因组DNA失衡频率随其级别升高而相应减少,以上各亚型的特征性基因组DNA失衡谱是决定它们组织学表型和级别的分子遗传学基础,+1q、+5、+7p、+7、-4q、-19q和-22q是评价其生物学行为和患者预后的重要分子遗传学标志.     

胶质瘤VEGF、VEGF—C和VEGFR-3表达对间质血管生成及肿瘤细胞增殖的影响

目的探讨胶质瘤血管内皮生长因子（VEGF）、血管内皮生长因子-C（VEGF-C）和血管内皮生长因子受体-3（VEGFR-3）表达变化,以及对肿瘤细胞增殖和间质血管生成的影响。方法收集2000～2009年手术切除WHOI～Ⅱ级、Ⅲ级和Ⅳ级胶质瘤标本各20例,采用组织微阵列技术及免疫组织化学染色（SPAB法）观察不同级别胶质瘤组织中VEGF、VEGF—C、VEGFR-3和Ki-67抗原的表达及CD31阳性血管密度。结果60例胶质瘤组织中肿瘤细胞及间质血管内皮细胞VEGF、VEGF—C和VEGFR-3阳性表达率分别为88-33％（53160）和100％（60160）、100％（60160）和16．67％（10／60）、100％（60／60）和21．67％（13／60）,不同级别组间差异均无统计学意义（P〉0．05）。I～Ⅱ级、Ⅲ级及Ⅳ缀组的VEGF阳性肿瘤细胞密度分别为（17．65-t-9．00）、（37．30±18．54）和（83．40±22．98）个/0.05mm2;VEGF—c阳性肿瘤细胞密度为（38．00±17．82）、（79．30±5．23）和（102．00±13．07）个,0．05mm2;VEGFR-3阳性血管密度（3．65±2．01）、（10．50±3．98）和（14．60±7．29）血管数,4HF;Ki．67抗原阳性肿瘤细电密度（9．30±3．43）、（31．15±9．44）和（60．15±13．60）个,0．05mm2;CD3I阳性血管密度（6,75±2．24）、（10．35±2．98）和〈14．30±3．51）血管数／4HF,各组之间以上5种指标比较差异均有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）,且拔此闷均呈显著性正相关关系（r=0．663—0．910,P〈0．01）。结论胶质瘤细胞普遍过表达VEGF和VEGF-C,面胶质瘤间质血管内皮细胞则普遍过表达VEGFR-3,三者表达水平均随着肿瘤级别的升高而相应增加;由此形成的旁分泌环通过诱导间质血管生成促进肿瘤细胞增殖,在胶质癌的发生、发展过程中起着重要作用。     

血管母细胞瘤复发相关因素的临床病理分析

为了探讨与血管母细胞瘤（ＨＢ）复发密切相关的因素，为临床评估病人术后复发的可能性及预后提供参考依据，我们对５７例ＨＢ病人作了术后长期随访和临床病理资料分析。结果发现，其中１６例（２８．１％）在术后３～１３２个月复发，复发组首次发病年龄小、术前病程短、肿瘤体积小、常皇家族性发病、肿瘤呈多灶性、肿瘤中毛细血管白细胞附壁少或缺如，主要含毛玻璃样间质细胞和肿瘤中出现较多异型核间质细胞，与未复发组比较差异均有显著性（Ｐ＜０．０５～０．００５）。提示上述因素与ＨＢ复发密切相关，是评估病人术后复发的可能性及预后的重要参考指标。     

胶质瘤细胞血小板源生长因子B链的纯合二聚体与其受体基因表达和受体活化水平的研究

目的探讨胶质瘤细胞血小板源生长因子Ｂ链的纯合二聚体（ＰＤＧＦＢＢ）及其受体（ＰＤＧＦＲ）基因表达和ＰＤＧＦＲ活化水平在胶质瘤发生、发展中的作用。方法用原位杂交和免疫组化染色观察了７３例不同级别的人胶质瘤组织标本。结果６２例（８４９％）的肿瘤细胞表达ＰＤＧＦＢｍＲＮＡ，其阳性率和阳性肿瘤细胞含量均随肿瘤恶性程度升高而递增。ＰＤＧＦＲα、ＰＤＧＦＲβ和这两种受体及其信号传递通路活化标记物酪氨酸磷酸化蛋白（ＰＴｙｒ）的阳性率均为１００％。这３种阳性肿瘤细胞密度（个／００５ｍｍ２）彼此间均呈正相关（ｒ＝０８３８～０８９７，Ｐ＜００１），并均随肿瘤恶性程度及肿瘤细胞ＰＤＧＦＢｍＲＮＡ表达水平升高而同步增加，差异均有显著性（Ｐ＜００５～００１）。但各肿瘤组内两种受体阳性肿瘤细胞密度间无显著性差异（Ｐ＞００５）。结论胶质瘤细胞普遍存在ＰＤＧＦＢＢ自分泌环，ＰＤＧＦＲα和ＰＤＧＦＲβ在该自分泌环中均起重要作用，该自分泌环活性异常增加可能对ＰＤＧＦＢＢ及其受体表达有正反馈诱导作用，并可能在胶质瘤发生及恶性进展过程中发挥重要作用。     

海马不同地区域缺血时损伤和hsp70mRNA表达差异

目的：探讨缺血再灌注后鼠脑海马CA1区选择性易损伤和迟发神经元死亡现象,以及hsp70mRNA差异表达的可能机制。方法：观察鼠前脑缺血再灌注时,海马CA1区、CA3区及齿状回锥体细胞在组织学变化;以及原位杂交技术检测各区hsp70mRNA的诱导表达。结果：缺血再灌注7d后海马CA1区锥体细胞缺失明显,而CA3区及齿状回未见明显形态学变化。CA1区hsp70mRNA的诱导较其余两区迟,而持续时间较长。结论：在缺血早期加强或在缺血后期抑制hsp70mRNA的诱导,有可能保护CA1区锥体细胞。     

胶质瘤细胞端粒结合因子表达水平与肿瘤细胞增殖和凋亡关系的研究

一、材料与方法1.标本来源 :收集天津医科大学总医院神经外科 1994～20 0 0年手术切除的人脑胶质瘤石蜡包埋标本 71份。患者中男 48例 ,女 2 3例 ,年龄 12～ 74岁。按ＷＨＯ标准进行分类和分级 ,其中Ⅰ～Ⅱ级组 2 2例 (毛细胞型星形细胞瘤 1例、室管膜下巨细胞型星形细胞瘤 2例、中枢神经细胞瘤 1例、纤维型星形细胞瘤 10例、原浆型星形细胞瘤 2例、肥胖型星形细胞瘤 1例、少突胶质细胞瘤 2例、混合性星形少突胶质细胞瘤 1例、室管膜瘤 2例 ) ,Ⅲ级组 2 4例 (间变性星形细胞瘤2 3例、间变性混合性星形少突胶质细胞瘤 1例 ) ,Ⅳ级组 2 5例 (…     

胶质瘤细胞中端粒结合因子表达水平与肿瘤恶性程度关系的研究

目的探讨细胞端粒结合因子的表达水平与肿瘤细胞恶性程度的关系。方法以71例不同级别的人胶 质瘤组织为研究材料,用免疫组织化学染色方法检测端粒结合因子TRF1及TRF2蛋白。结果71例(100％)全部 表达TRF1蛋白,70例(98.6％)表达TRF2蛋白,两者的表达水平呈正相关(r=0.865,P＜0.01),并均随肿瘤恶性 程度的增高而相应减少(P＜0.01)。结论胶质瘤细胞中TRF1、TRF2蛋白的表达水平均与肿瘤恶性程度密切相 关,均随肿瘤恶性程度的增加而相应减少。     

胶质瘤miR-29c 表达异常减少及其对肿瘤细胞增殖的影响*

目的:探讨microRNA- 29c（miR-29c）在胶质瘤中的表达及其对细胞分裂周期蛋白42（CDC 42）的调控作用和对细胞增殖的影响。方法:用锁定寡核苷酸原位杂交法和免疫组织化学法检测60例不同级别胶质瘤及10例非肿瘤对照脑组织中miR-29c和CDC 42的表达水平，实时荧光定量RT-PCR、Westernblot及MTS 法分别检测U87MG细胞中miR-29c 瞬时表达、CDC 42mRNA和蛋白表达及其对胶质瘤细胞增殖的影响。结果:各级别胶质瘤的miR-29c 表达水平均明显低于非肿瘤对照脑组织，且随肿瘤级别升高而显著降低，各组间的差异均有统计学意义（P<0.001）。 而CDC 42表达水平则呈相反趋势，其表达水平随胶质瘤良恶性级别增加相应升高，除Ⅰ～Ⅱ级组与非肿瘤对照组之间外，其余各组间的差异均有统计学意义（P<0.001）。 与对照组相比，miR-29c 转染组的CDC 42mRNA（P<0.001）和蛋白表达水平（P<0.01）均明显降低。miR-29c 转染组细胞的增殖能力明显低于U87MG空白对照组和Scr转染组（P<0.05）。 结论:miR-29c 是胶质瘤的抑瘤miRNA，其表达水平可作为评价胶质瘤良恶性级别的重要参考指标。miR-29c 在胶质瘤中表达减少解除了其对靶基因CDC 42转录后水平的抑制作用，并导致肿瘤细胞无限增殖。表明miR-29c 表达异常减少可能是引起胶质瘤发生、发展的关键事件。