不同滋养层对维持人胚胎干细胞的生长作用

目的 比较不同滋养层对保持连续传代培养的人胚胎干细胞(hESC)不分化和高增殖能力作用的差异.方法 分别用小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)、人包皮成纤维细胞(hFF)、人骨髓间充质细胞(hMSC)作为滋养层培养hESC系H9细胞,采用碱性磷酸酶染色和台盼蓝染色观察不同滋养层支持的hESC的碱性磷酸酶阳性克隆数、细胞产量和细胞存活率,并采用免疫荧光染色对传代5代以后的hESC进行生物学鉴定.结果 3种滋养层细胞均可维持hESC呈克隆样生长,但是不同滋养层支持的克隆的形态差异大.3种滋养层细胞支持的hESC的大鼠抗阶段特异性胚胎抗原-3及碱性磷酸酶染色均呈阳性.MEF支持的hESC的碱性磷酸酶阳性克隆数、细胞产量和细胞存活率均显著高于人来源滋养层(均P<0.01).hMSC支持的hESC的碱性磷酸酶阳性克隆数、细胞产量均显著高于hFF的hESC(均P<0.01).结论 3种滋养层细胞均可支持hESC的正常生长.MEF最有利于hESC的增殖,但是两种人来源滋养层细胞为去除动物源性的hESC培养体系奠定了基础.在维持hESC增殖方面,hMSC优于hFF.     

尘螨与过敏性疾病的关系

目的进一步调查徐州市区人群尘螨感染情况,了解尘螨的生物学特性及其与临床过敏性疾病的关系,为管理部门制定决策及公众采取预防措施提供依据。方法采用尘螨变应原皮肤点刺试验（skin prick test,SPT）,并以组胺当量标准检测健康人群及临床过敏患者的阳性率;检测居民室内尘螨并计数。结果检测在校大、中、小学生和幼儿307人,阳性50人（16.3%）;临床过敏患者997例,阳性713例（71.5%）。健康人群与患者组内各年龄段之间SPT阳性率差异无统计学意义（P〉0.05）,但各组女性SPT阳性率均高于男性（P〈0.05）;检测居民卧室30户,螨检阳性23户（76.7%）。结论徐州市区居民室内尘螨孳生多见,易引起过敏,患者四季均可发病。加强居室环境螨类控制,是减轻螨病症状和减少过敏发作的重要预防措施。     

微量快速斑点免疫金银染色法检测囊尾蚴病患者血清抗体的 …

目的 建立一种便捷的囊尾蚴病免疫学诊断方法。方法 在斑点免疫金染色法的基础上，待检血甭标本原倍使用，缩短抗原抗体及金标二抗的作用时间，建立微量快速斑点免疫金银染色法。结果 ＲＭＤｏｔ－ＩＧＳＳ法检测囊尾蚴病患者血清９６份，阳性率为１００％；检测健康因员血清５０份，特异性为９６％；检测华支睾吸虫病患者、卫氏并殖吸虫病患者、日本血吸虫病患者血清各１０份均未出现变叉反应；但棘球蚴病患者血甭１０份有明显的     

徐州市义务献血员弓形虫感染情况初步调查

目的 了解徐州市义务献血员弓形虫感染情况。方法 用斑点免疫金银染色法（Dot-IGSS）检测徐州市中心血站流动采血车在徐州市区采集的义务献血员血清中抗弓形虫IgG。结果 共检测2589份血清，抗弓形虫IgG阳性率为3.01%。献血员的弓形虫感染率无性别、职业和血型之间的显著性差异。结论 为预防输血后弓形虫病，应将弓形虫感染指标作为献血员的必检项目。     

葡萄膜炎患者外周血单个核细胞IRF1mRNA的表达及意义

目的 观察葡萄膜炎患者外周血单个核细胞(PBMC)IRF1 mRNA的表达.方法 收集42例葡萄膜炎患者(A组)和30例正常人(B组)外周血,采用淋巴细胞分离液密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(PB-MCs),逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测PBMC Th1细胞转录因子IRF1 mRNA表达的相对含量.酶联免疫吸附法(ELISA)检测PBMCs培养上清液干扰素-Y(IFN-γ)表达水平.结果 A组PBMC中IRF1 mRNA相对含量显著高于B组(P<0.01),A组IFN-γ水平显著高于B组(P<0.01).A组IRF1 mRNA表达相对含量与硎-γ的表达水平呈正相关(r=0.56,P<0.01)结论葡萄膜炎患者的Th1细胞过度分化可能与IRF1表达增强有关.     

葡萄膜炎患者外周血单个核细胞TLR9、TLR7 mRNA的表达及意义

目的 观察葡萄膜炎患者外周血单个核细胞(PBMCs)Toll样受体9(TLR9)、Toll样受体7(TLR7)mRNA的表达.方法 收集42例葡萄膜炎患者(其中发病与感染相关者12例,与感染无关者30例)和正常对照组(30例)外周血,采用淋巴细胞分离液密度梯度离心法分离PBMCs,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测PBMCs TLR9、TLR7 mRNA表达的相对含量.结果 与感染相关葡萄膜炎患者PBMCs TLR9、TLR7 mRNA相对含量显著高于与感染无关葡萄膜炎患者和正常对照组(P<0.01),与感染无关葡萄膜炎患者与正常对照组比较TLR9、TLR7 mRNA相对含量差异无统计学意义(P>0.05).结论 TLR9、TLR97的表达在与感染相关葡萄膜炎患者中显著升高,提示感染因素在葡萄膜炎中的作用可能通过TLR9、TLR7介导.     

华支睾吸虫模拟抗原表位的筛选和鉴定

目的从噬菌体12肽库中筛选华支睾吸虫模拟抗原表位。方法应用噬菌体随机12肽库亲和筛选华支睾吸虫病患者混合血清IgG,经过3轮的淘筛,随机挑取蓝色噬菌斑进行扩增,以ELISA检测其免疫活性,挑选免疫活性较高的克隆进行序列分析及免疫学鉴定。结果8个阳性克隆测得6个DNA序列,Western-bloting显示6个单克隆噬菌体均可与华支睾吸虫患者血清反应,斑点免疫金银染色法有3个克隆可被华支睾吸虫患者血清识别。结论应用噬菌体肽库筛选技术可以获得华支睾吸虫模拟抗原表位。     

高强度聚焦超声治疗瘢痕妊娠对卵巢储备功能的影响

 目的 比较高强度聚焦超声(high intensity focused ultrasound, HIFU)和子宫动脉栓塞术(uterine artery embolization, UAE)治疗剖宫产瘢痕妊娠(cesarean scar pregnancy, CSP)时对卵巢储备功能的影响。方法 采用回顾性研究的方法,选择2013-01至2018-06保定市妇幼保健院收治的CSPⅡ型患者142例,根据治疗前预处理方法不同分为两组,HIFU组96例采用HIFU,UAE组46例采用UAE,预处理后行宫腹腔镜手术,比较两组术前,术后3、6、12个月的血清雌二醇(E₂)、卵泡刺激素(FSH)、促黄体生成素(LH)、抗苗勒管激素(AMH)水平及窦卵泡数(AFC)的变化。比较两组术后患者血HCG在4周内转阴率及5周内月经恢复率。结果 (1)HIFU组不同时间点AMH、FSH、LH、E₂和AFC比较,差异均无统计学意义。(2)UAE组不同时间点E₂差异无统计学意义;而AMH、AFC在UAE后3、6、12个月较术前显著降低;FSH及LH在术后 3、6个月较前明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。(3)两组相比,术前AMH、FSH、LH、E₂、AFC差异均无统计学意义;UAE组AMH、AFC术后3个月、6个月均低于HIFU组相应时间点,而FSH、LH水平则高于HIFU组,差异均有统计学意义(P<0.05)。(4)HIFU组和UAE组术后5周月经恢复率分别为98.9%和91.3%,两组差异有统计学意义(P<0.05);两组术后4周血β-HCG转阴率比较,差异无统计学意义。结论 HIFU治疗CSP安全有效、无创、可重复,不影响卵巢储备功能,尤其对于有再生育要求的CSP患者更具有重要意义。     

快速斑点免疫金染色法检测抗囊尾蚴抗体的初步应用

将猪囊尾蚴液抗原点加于混合纤维素酯微孔滤膜，以快速斑点免疫金染色法（F－Dot-IGS)检测囊尾蚴病患血清抗体，以建立简便，经济和敏感，特异的快速免疫学诊断方法，初步结果显示，共检测40例囊尾蚴病患血清抗体，阳性率100％；检测40例健康人血清均为阴性，除包虫病人外，10例肝吸虫病人，10例血吸虫病人和10例肺吸虫病人血清未见交叉反应，本法快速，更为简便，经济，有较高的敏感性和特异性，适于基层流行病学调查和临床快速诊断。