一种快速定量检测炭疽杆菌方法的建立

目的：建立一种快速、准确、特异定量检测炭疽杆菌的方法。方法：根据复合探针荧光定量分析原理，以炭疽杆菌染色体rpoB基因为靶序列，设计合成引物和探针，对炭疽杆菌进行实时定量聚合酶链反应（PCR）检测，并探讨荧光探针与淬灭探针用量及比例、镁子浓度、淬灭探针长度对定量结果的影响。结果：本法最适条件：荧光探针浓度300mmol/L、荧光探针与淬灭探针的比例为1／2，镁离子浓度为3mmol/L，淬灭探针长15个核苷酸，该法检测炭疽杆菌的灵敏度达10^3拷贝，能特异区分炭疽杆菌与其他蜡样杆菌。结论：复合探针荧光定量PCR技术能够快速准确、特异、敏感地对炭疽杆菌进行定量分析，可为临床诊断提供帮助。     

直肠癌结肠造口患者生活体验的质性研究

目的探讨直肠癌结肠造口患者出院后的生活体验。方法采用质性研究方法,对15例直肠癌结肠造口术后生存1年以上的患者进行访谈。结果由于原发疾病和造口的存在,造口者在生活中承受着极大的的心理压力,主要集中在排便控制、自理能力、经济压力、担心癌症复发、夫妻生活等方面。结论护理人员应重视造口患者的内心体验,及时提供造口护理的知识和技能,并建立符合我国国情的家庭、社区康复护理模式。     

经皮氧饱和度在动脉危象监测中的应用与研究

目的探讨经皮氧饱和度监测仪应用于四肢动脉手术后监测动脉危象的可行性。方法在确认正常健康人左右肢体氧饱和度无显著性差异的前提下,对76例四肢动脉手术患者,于术后作健、患肢氧饱和度监测。以SPO2值、脉搏波形为效应指标,研究动脉危象患者健、患侧肢体的SPO2、脉搏波形及其临床意义。结果76例中20例发生动脉危象,发生率26.31%。危象组健、患侧氧饱和度比较,t=8.8411,P<0.05;非危象组比较,t=1.1122,P>0.05。结论经皮氧饱和度监测能发现血管危象早期迹象,具有操作简便、数据客观、无创伤等优点。     

基于"互联网+护理"平台实施慢性伤口管理的SWOT分析及对策

近年来,随着互联网和大数据的迅猛发展,"互联网+护理"已被广泛应用于医疗卫生行业。为了更好地满足人们对慢性伤口管理日益增长的需求,慢性伤口管理已进入全新的互联网时代。本文应用SWOT分析法剖析当前"互联网+护理"在慢性伤口管理的内部优势和劣势以及外部机会和威胁,旨在阐明当前国内基于"互联网+护理"平台在慢性伤口管理的研究现状,分析存在的问题并阐述对策,以供护理人员参考。     

SARS冠状病毒CT基因型发现及相关特征

目的 研究SAPS冠状病毒基因型及相关特征。方法 对杭州市首例SAPS病人分离的SAPS冠状病毒ZJ01株进行全基因组测序，并在GenBank数据库登录。记录号：AY297028，版本号：gi：30910859。整个全基因组由29715bp组成。使用GeaBank数据库中最新登陆的SARS病毒的基因组进行序列比对、突变点分析和多态性分析、特殊片段的系统进化分析。结果 发现在ZJ0l株的9391、17555、21712、22213和27819位点，分别是T、T、G、T和T核苷酸碱基，和CenBank数据库中的其他SARS冠状病毒株比较，除第l、2、4和5突变位点(C：G：C：C／T1 T1 T2 T)之外，发现在21712位点(第3个)A／G突变也参于这一遗传标识。因此我们提出5个突位点将17株病毒分为两种基因型的新概念，即C：G：A：C：C与T：T：G：T：T两型，简称C型和T型。ZJ01病毒株属于T基因型．在中国大陆内地是首次发现和发表。突起蛋白基因片断的进化树分析，广州的GZ01 C基因型株进化距离和其他病毒株相差甚远；比较而言，和C基因型BJ0l、CUHK-Wl病毒株较为接近，其次是T基因型的Fl和F2组。5个突变位点(C：G：A：C：C／T：T：G：T：T)的两个发生在编码突起蛋白(S)的基因中，分别是A／G和C／T突变，由此引起的突起蛋白(S)氨基酸变化是Asp／Gly(天门冬氨酸／甘氨酸)和Thr／Ile(苏氨酸／异亮氨酸)。结论 这些基因型特征和变异是否会引起生物学及临床症状的差异是非常值得重视的。     

实时荧光PCR法检测DPYD*9等位基因的单核苷酸突变

目的:建立一种简便、特异的对二氢嘧啶脱氢酶基因DPYD*9进行等位基因分型的方法。方法:以DPYD基因为靶合成含突变位点的野生型引物WF、突变型引物TF和共同的下游引物R,用DNA荧光嵌入染料SYBRG reenⅠ进行荧光PCR扩增,对产物进行溶解曲线分析以确定基因型;同时优化了引物浓度,分析其灵敏度并与普通PCR进行了比较,对20份PCR产物进行了验证。结果与结论:以野生型基因组为模板时,WF和R组合有荧光响应,而TF和R组合无荧光响应;当以突变型基因组为模板时,TF和R组合有荧光响应,而WF和R组合无荧光响应。两者Ct值均为24,Tm值均为83oC。优化引物浓度为0.25μmol/L,荧光PCR可分出10个模板拷贝数的基因型,而普通PCR只能区分模板为8.0×102拷贝数的基因型。PCR产物测序证实荧光PCR法与直接测序结果一致。该方法能准确快速地区分DPYD*9的基因型,敏感性和特异性强。     

基因芯片结合可环化探针对单碱基突变的检测

目的：将基于连接反应的可环化探针(circularizable oligonucleotide probe，C-probe)技术用于基因芯片对单碱基突变的检测。方法：可环化探针是一种检测核酸分子中单碱基突变的线性寡核苷酸分子，中间部分是通用引物结合区(约40mer)，5’端与3’端是两段与待检测的DNA分子中靶序列互补的目标序列识别区(各约20mer)。与靶序列互补结合后，可环化探针的两个末端在空间靠近并在DNA连接酶的作用下连接形成环状分子，利用荧光分子标记的通用引物对连接产物进行PCR扩增，再利用基因芯片检测荧光标记的PCR产物，从而确定所检测的核苷酸位点的性质。本实验以检测CYP3A4基因外显子5中14026位点的单核苷酸多态性为例，优化了连接反应、荧光标记通用引物的PCR扩增以及探针杂交检测等条件，并用该方法对合成模板和人基因组DNA标本进行检测。结果：以合成的寡核苷酸序列为模板进行10倍系列稀释，确定可环化探针的检测灵敏度，PCR产物的凝胶电泳结果表明，检测灵敏度达到10^3拷贝；可环化探针对合成的野生型和突变型模板具有良好的区分效果。用该方法检测人基因组DNA标本，芯片检测结果与测序结果符合，证实了该方法的可行性。结论：连接反应是最具特异性的酶促反应，将其与基因芯片技术结合用于单碱基突变检测，有助于简化荧光标记过程，提高检测结果的准确性。     

年轻护士规范化培训的效果评价

目的通过对年轻护士(护龄≤3年)实施规范化培训,使其尽快适应护士角色,胜任各项护理工作,从而为患者提供优质的护理服务。方法对2004-2009年毕业的年轻护士实施规范化培训,并使用自行设计的调查表对已完成培训的180名护士进行问卷调查,了解其对规范化培训的意见和建议。结果调查显示,年轻护士规范化培训后,其理论水平和操作技能显著提高。结论对护龄≤3年的年轻护士进行规范化培训可提高其综合素质和业务水平,促进护理队伍的建设,对提高临床护理工作质量有重要的意义。